药物在水产饲料中的应用现状及其生态效应

在水产养殖过程中,因为功能和作用显著,药物在水产饲料中被广泛应用;但由于药物的残留、富集及其在环境中存在迁移和转化作用,药物的使用同时也给生态环境带来了一系列的问题。对当前水产饲料中不同种类药物的应用状况进行了概述,并着重对渔用药物的使用所导致的生态效应进行以下几个方面的总结和分析:养殖动物体内的药物代谢,药物在环境中的归趋,药物对水环境中水生生物、细菌耐药性及其最终对人的影响;阐明了药物在水产饲料中的应用与生态环境和人类健康有着十分密切的关系,对其进一步深入研究有重要的理论和实际意义。     

多效生长因子（Pleiotrophin）基因沉默后的基因表达谱初步分析

多效生长因子（pleiotrophin,PTN指蛋白,Ptn指基因）是一种可同肝素结合的分泌性的生长/分化因子,具有刺激细胞粘附、迁移、存活、生长和分化等功能.我们前期研究发现,Ptn稳定沉默可以显著降低细胞的生长及成瘤能力.为进一步了解Ptn表达沉默后小鼠基因转录谱的变化,用小鼠表达谱芯片比较了对照及Ptn沉默细胞的基因表达差异.在检测的24 000个基因中,Ptn沉默后上调2倍以上的基因有240个,下调2倍以上的基因有129个.值得引起注意的是,在Ptn沉默的MEFs细胞中,同DDK综合症相关的基因家族,schlafen（Slfn）家族的Slfn 2、Slfn 3、Slfn 4以及基质金属蛋白酶（matrix metalloproteinase,MMP）家族的Mmp 3、Mmp 10、Mmp 13表达均显著上调;而可促进内皮细胞运动,参与血管发生的基因angiomotin(Amot)表达显著下调.通过研究,获得了一系列Ptn沉默后表达变化的基因信息.     

米曲霉原生质体的营养互补融合及二倍体的诱发分离*

采用1％溶壁酶加1％蜗牛酶的混合液获得的原生质体,以30％聚乙二醇(MW=6,000)、0.01M CaCl_2、0.05M Gly做为融合剂,对米曲霉进行了原生质体的营养互补融合,融合频率为0.27—0.47％。自4个菌株的4对杂交组合中获得了异核体,并分离到97株绿色融合株。二倍体的孢子经PFA和UV诱发分离后,获得了二株生长速度快、蛋白酶活性高和产孢能力强的单倍体菌株。     

黄瓜花叶病毒亚组I和Ⅱ分离物外壳蛋白基因的序列分析与比较

对我国分离的经生物学和血清学鉴定为黄瓜花叶病毒（ＣＭＶ）亚组Ｉ和Ⅱ的各一分离物（ＧＢ、ＸＢ）的外壳蛋白（ＣＰ）基因进行了序列分析和比较。以提纯病毒ＲＮＡ为模板,进行逆转录及ＰＣＲ扩增,并通过常规基因克隆方法得到插入ＣＰ基因片段的重组克隆。对插入ＧＢ和ＸＢ两个分离物ＣＰ基因片段的重组克隆进行全序列测定,结果表明重组克隆序列长分别为７７７ｂｐ和７９２ｂｐ均只含一个开放读框（ＯＲＦ）,长度为６５７ｎｔ,     

石荠苎属的遗传分化与种间关系分析

杂交实验结果表明,石荠苎属(唇形科)中国产的7个种,即小花荠苎Mosla cavaleriei、石香薷M． chinensis、小鱼仙草M．dianthera、杭州石荠苎M．hangchouensis、疏花荠苎M．pauciflora、石荠苎M． scabra和苏州石荠苎M．soochouensis,彼此之间生殖隔离。这7个种中,疏花荠苎是四倍体,由杂交伴随多倍化产生。根据21个代表居群在15个酶系统的28个位点的等位酶资料分析,其余6个二倍体种组成3个亲缘关系密切的种对。杭州石荠苎和石香薷的亲缘关系最近,石香薷可能由于涉及繁育系统类型的大突变而与杭州石荠苎分化开来。小花荠苎与小鱼仙草比较接近,但它们的遗传分化很显著,除了突变之外,染色体结构也有大的变异,最明显的表现是随体的位置不同,小花荠苎的随体位于长臂上,而小鱼仙草与其它种一样,随体位于短臂上。石荠苎和苏州石荠苎在酶基因位点上的分化不大,但生境隔离、花期隔离和繁育系统的差别等能有效地保持种的独立性。不同的生境要求、不同的花期、花的形态结构的分化、繁育系统类型的不同、杂种F_l代高度不育、染色体数目和核型的差异等均为石荠苎属下种间有效的隔离机制,而且近缘种间常是多种机制共同起作用。     

杭州石荠苎和石香薷的遗传多样性研究

杭州石荠苎分布于华东沿海少数地区,石香薷则分布于长江以南的广大地区。采用淀粉凝胶电泳方法,分析了１５个酶系统,获得２８个位点的资料。分析结果表明,杭州石荠苎和石香薷均具较低的遗传多样性水平。杭州石荠苎常用的遗传多样性指标为Ａ＝１．２５,Ｐ＝２１．４３％,Ｈｅ＝０．０８２,Ｈｔ＝０．１０１４;石香薷为Ａ＝１．１０,Ｐ＝９．５２％,Ｈｅ＝０．０２１,Ｈｔ＝０．０４５０。在有限的遗传多样性中,杭州石荠苎的遗传多样性主要存在于居群之内（Ｇｓｔ＝０．２２１９）,石香薷的遗传多样性主要存在于居群之间（Ｇｓｔ＝０．５５３３）。石香薷维持更低的遗传多样性是受该种繁育系统类型和进化历史的制约。分析了同工酶多样性和形态多样性的关系,并根据杭州石荠苎的遗传多样性分布式样提出了杭州石荠苎遗传多样性保护的策略。     

MatriX Generator （MG）：一个基于DNA片段的0／1矩阵生成程序

分子群体遗传学研究的特点是取样量人——存在于群体样本中的遗传变异必须要充分代表该群体和该物种的遗传变异量及分析的位点数多——位点样本必须恰当代表基因组。大样本的群体取样和位点取样产生大量的原始数据,使原始数据人工处理非常困难甚至不可能,从而迫切需要原始数据处理的自动化。目前一些大公司提供的凝胶图像收集仪器和配套的软件已经使原始数据的获取基本上自动化或半自动化。获得DNA片段分子量数据后,必须把这些分子量数据转变成可反映操作单位(样本)之间关系的数据矩阵,原来用于计算分子量的那些软件已不实用或派不上用场。目前,除了用于fAFLP的Binthere弥补了部分不足外,还没有此类软件。Binthere存在固定栏宽(Bin)的缺陷,也就是将分子量最大值与最小值之间等分的方法来归纳不同操作单位(OUT)之间的异同,使得分子量绝对值差很小的数据可能被归入不同的栏,导致结果不正确。为了解决这类问题,我们设计编写了一个新的软件,取名为Matrix Generator (MG)。与同类软件相比,MG具有两个主要优点：(1)采用动态栏宽和智能归并算法,克服了固定栏宽可能造成的错误：(2)可用于非荧光标记的分子标记技术。MG的基本思路是：分子量差异越小的片段,越可能是同缘片段,越应该处于相同的栏内。为此,我们采用绝对对应的动态过程。也就是说,从最小分子量到最大分子量之间的栏目数不是事先确定,而是由所分析的所有样品的特点和所使用的凝胶的分辨率(用户根据凝胶的特点给出数值)决定的。当两片段的差异小于凝胶所能达到的分辨率时,两片段被认为是同缘片段而归入相同的栏内。归并的过程从差异最小值开始,直至任意两片段的差异都大于凝胶的分辨率为止。这样就排除了同缘片段被隔离或者非同缘片段被合并的错误,从而使最可能同缘的片段归结在同一位点。MG第一版(v1．0,DOS版)集中体现了实用和易用的优点而没有包含同类软件所具有的一些功能,所以MG必须与其他软件结合使用。对于非荧光标记的分子标记技术,如RAPD、RFLP、AFLP等,可用Quantity One等软件得到分子量,用Excel生成样品与(分子量数据代表的)DNA片段矩阵,然后用MG处理。对于荧光标记的分子标记技术,如fAFIP、fSSR等,除可以用Excel牛成矩阵外,可直接用Binthere和Genotyper等生成分子量矩阵,然后用MG处理。MG输出的矩阵经过适当编辑后,就可用后续的软件如Paup、Ntsys、Philip等运算。为了检验MG的有效性,我们用六道木属(Abelia)的AFIJP分析数据进行检验,14个样品的DNA片段分别用Binthere和MG进行处理。前者得到295个含信息的位点,后者得到210个含信息的位点。用Nei and Li (1979)的算法分别计算距离矩阵并对两距离矩阵作Mantel检验。结果,两矩阵之间存在一定的差别,但相似性系数高达0．941 63,说明两种方法总体上会得到相似的结果,但局部会有所不同。用Paup对两矩阵作进一步分析,生成两个Neighbor-joining (NJ)树。结果表明,MG生成的数据更符合实际情况,而且分辨率高。     

罗汉果疱叶丛枝病的媒介昆虫和防治途径的研究

试验结果指出:棉蚜Aphis gossypii Glov.是罗汉果Siraitia grosvneri(Swingle)Jeffrey.疱叶丛枝病的媒介昆虫。有翅蚜和无翅蚜都有传毒力:传毒习性的研究结果指出:每苗接虫三头或使之吸食15分钟以上,就足以使健苗发病。 由于媒介昆虫自然传播的主导因素.所以理论上和实践上都指出与病区隔离种植实生苗,是解决罗汉果疱叶丛枝病的根本措施之一。     

β—淀粉酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达

β—淀粉酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达王峥,周蓓芸,郑幼霞（中国科学院上海植物生理研究所,２０００３）关键词高温放线菌,β—淀粉酶,基因克隆β—淀粉酶是一种外切型淀粉水解酶,它从淀粉的非还原性末端依次水解α－１,４葡萄糖昔键,产生分构型的麦芽糖。内...