IGF-1 基因转染对脂肪间充质干细胞活性的影响及机制研究

目的:探讨携带IGF-1基因慢病毒转染脂肪间充质干细胞(ADMSCs)的可行性,对其引起的细胞凋亡机制做出初步研究,并讨论其与PI3K/Akt通路的关系。方法:分离培养ADMSCs,利用脂质体将携带IGF-1基因的慢病毒载体转染入ADMSCs。实验分为Blank组,Lv-non和Lv-IGF-1三组,转染后用MTT法测定各组细胞的生长情况并绘制生长曲线,流式细胞术测定各组细胞凋亡,Western blot测定各组中IGF-1、Akt、p-Akt及凋亡相关蛋白的表达。结果:成功分离、培养了大鼠脂肪间充质干细胞;携带IGF-1慢病毒载体转染ADMSCs后,流式细胞术检测发现Lv-non和Blank组凋亡率明显高于Lv-IGF-1组(P0.05)。同时发现Lv-IGF-1组中促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9蛋白和Bax的表达水平显著下调(P0.01),抗凋亡蛋白Bcl-2显著上调(P0.01)。MTT法结果显示Lv-IGF-1能促进细胞生长,在5到6天时显著高于其他两组(P0.05)。通过检测PI3K/Akt通路发现,Lv-IGF-1组PI3K和p-Akt水平显著高于Blank和Lv-non组(P0.05),通路被激活。结论:携带IGF-1基因慢病毒载体成功转染ADMSCs。在ADMSCs中过表达IGF-1蛋白可以促进细胞生长,同时抑制细胞凋亡,其机制可能与PI3K/Akt通路蛋白磷酸化相关。     

手术治疗先天性心脏病患者活动期心内膜炎的相关因素

目的:确定先天性心脏病活动期感染性心内膜炎(active infective endocarditis,AIE)的手术指征。方法:于2003-2011年从71个机构数据库中调查并采集247例患有感染性心内膜炎的儿童及成人先天性心脏病(congenital heart disease,CHD)患者数据,其中74例(30%)进行了AIE手术治疗。回顾性分析患者的年龄、性别、感染心内膜炎前对CHD的诊断、致病微生物和感染部位等数据。结果:与AIE手术治疗必要性显著相关的指标是感染性心内膜炎(infective endocarditis,IE)病发前对心脏异常的诊断缺乏、主动脉瓣IE、瓣周脓肿、心力衰竭以及抗生素发生变化。逐步逻辑回归方程分析结果表明瓣周脓肿、心力衰竭以及抗生素改变是先天性心脏病患者进行AIE手术治疗必要性的独立决定因素。结论:对IE合并CHD的患者而言,当心力衰竭、瓣周脓肿或抗生素变化发生时,手术可作为治疗AIE的一种手段。     

白纹伊蚊细胞株——ACK_4的建立及对六株虫媒病毒的影响

Singh报道,白纹伊蚊(Aedes albopictus)细胞对分离登革热病毒比小白鼠乳鼠和Vero细胞更敏感,并产生特异性细胞病变。Pav又用于对登革热病毒的鉴定上,效果颇佳。鉴于此情况,我们参照Singh白纹伊蚊幼虫的组织培养方法加以改进,建立了白纹伊蚊细胞株——ACK_1~*,现已传至第81代。用登革热Ⅱ     

利用~1H-NMR模拟谱研究二核苷酸A2′P(CH_3)5′A的构象性质

根据Altona等人的方法,在利用~1H-NMR模拟谱确定18℃、40℃、70℃三种温度下有关质子化学位移及偶合常数基础上,分析了A2′P(CH_3)5′A的两种非对映异构体(a)和(b)的构象状态。它们与A2′P(OH)5′A相比发现:(1)在18℃时两个核糖环是S型构象占主要成分,但随温度升高有的核糖环趋向于转化成N型构象;(2)磷酸骨架的扭角ε′和β分别改变±2°及±12°;(3)A2′P(CH_3)5′A(a)和(b)的两个核糖环均属部分重叠,并且前者的重叠程度小于后者;(4)随着温度升高,A2′P(CH_3)5′A(a)比A2′P(CH_3)5′A(b)有着更强的去堆积效应。     

猪卵母细胞体外成熟与冷冻附睾精子的体外受精

由屠宰母猪卵巢分离得到505枚卵母细胞,经成熟培养,其中468枚卵丘细胞扩张,成熟率为92.7％。采用冷冻的附睾精子授精,受精率为41.9％(57/136),其中单精受精率36.8％(50/136),多精受精率5.1％(7/136)。授精卵体外培养24和48小时后的卵裂率分别为5.3％(15/258)和12.9％(30/232)。把35枚早卵裂期胚胎和250枚未见卵裂的1-细胞期受精卵移入4头受体母猪的输卵管内,其中2头妊娠,分别于1990年4月10日和29日正常分娩,共生产仔猪21头。     

热带山地雨林生态系统水文动态特征的研究

采用小集水区定位研究方法,研究分析了尖峰热带山地雨林天然更新林生态系统５个水文年水分循环的动态特征。年降水量分配在１６９．８～３５０．０ｃｍ,林冠层截留率年变化１１．０％～１７．６％范围,旱、雨季变化在１４．４％～３１．４％和１１．５％～１９．４％之间;其中树干茎流率年平均为７．１％,雨季平均为６．８％,雨季月变化在２．２％～１２．４％。总径流动态特性以每年７～９月的增加响应较快,１１月至翌年２月径流衰减缓慢。水量平衡参数为：年均降水量２６６８．３ｍｍ,１４．３％为冠层截留,４６．７％为径流输出,５３．３％为蒸发散失。土壤渗透水性能为,７０ｃｍ厚土层,当雨量小于３０ｍｍ,进入土层的水分全部被吸持,雨量在３５～５０ｍｍ,２５％的降水量渗漏,雨量在５０～１００ｍｍ内,２６．５％～５６．３％的降水量下渗,其吸持和滞留贮存水性能与土壤的结构、持水量、孔隙度密切相关。     

68例重症肝炎院内感染分析

重症肝炎（简称重肝）常并发院内感染,且对其预后有重要影响。我院自2001年-2004年共收治68例重症肝炎患者,其中39例发生院内感染,现作一回顾性调查分析。旨在加强对医院内感染的防治,提高护理质量,为降低病死率提供参考依据①资料和方法：病例与调查方法,全部病例系我院2001年1月-2004年12月我院治疗的重肝患者68例,其中男性51例,女性17例。年龄19—72岁,诊断均符合上海全国病毒性肝炎会议修订标准,采用回顾性调查方法,对所调查的重肝遂项查阅,列表登记。②院内感染的诊断标准凡入院时经临床体检,血象及腹水等检查无感染存在,也不处于潜伏期,参照美国疾病控制中心（CDC）所列标准,凡在入院48小时之后发生感染者为医院感染。其结果见正文：     

中国盛夏褐飞虱北迁过程的动态数值模拟

以控制和影响褐飞虱Nilaparvata lugens (Stal)迁飞过程的生理生态参数为依据,应用时空分辨率较高的中尺度数值预报模式-MM4和三维轨迹计算方法对我国盛夏褐飞虱的北迁过程进行了动态模拟。模拟结果及其与实测虫情资料的对比研究表明：（1）我国盛夏褐飞虱北迁的虫源地主要在22.5°N～27°N,110°E～116°E之间。（2）空中迁飞路径有三条：主径取32°方位角,副径分别取10°和75°方位角。（3）降落虫汇区有三个：主降区为长江中下游稻区,副降区分别为鄂西北、川东北稻区和浙东南、闽北稻区。（4）理论模拟与实际虫情普查分析比较吻合,说明该模型可作为迁飞害虫灾变机制研究的一个重要工具。     

Chelex-100快速提取放线菌DNA作为PCR扩增模板

旨在建立有效扩增16S rRNA基因序列的放线菌DNA快速提取的方法。采用Chelex-100法提取放线菌DNA,使用PCR扩增16S rRNA基因序列评价提取核酸的质量。结果显示,Chelex-100法能够在10 min之内从放线菌中快速提取DNA,所提取的DNA可以直接用于PCR扩增反应,PCR扩增产物电泳条带清晰,符合理论预期结果。因此,Chelex-100法提取放线菌DNA可以作为16S rRNA基因序列PCR扩增的模板,该方法具有经济、简便、快速的特点,适合于放线菌菌株大规模地筛选和分类鉴定。     

长期大强度运动对大鼠脑组织神经肽Y,亮氨酸脑啡肽,强？…

目的和方法 采用ＡＢＣ免疫组织化学法结合图象分析,观察大鼠脑组织神经肽Ｙ、亮氨酸脑啡肽、强啡肽Ａ１－１３在长期（共７周）大强度（速度由１５ｍ／ｍｉｎ递增至３５ｍ／ｍｉｎ、运动时间为２０～２５ｍｉｎ／ｄ）的运动下的变化。结果 安静状态下在丘脑室旁核（ＰＶ）、下丘脑背内侧核（ＤＭ）、下丘脑腹内侧核（ＶＭＨ）等核团ＮＰＹ无显著性变化;在此 的末次急性运动结束后３ｈＮＰＹ变化尤为明显。安静状态下大鼠尾壳Ｌ