裂解型腺病毒Ad-E1A对人脐静脉内皮细胞的影响

以QBI-293A细胞基因组DNA为模板,PCR扩增E1A基因,酶切连接到pAdTrack-CMV转移质粒上,pAdTrack-CMV-E1A经PmeI线性化后,与pAdEasy-1共转化大肠杆菌BJ5183,筛选重组腺病毒质粒pAdEasy-1-pAdTrack-CMV-E1A,经PacI线性化,脂质体转染QBI-293A细胞,获得裂解型腺病毒Ad-E1A。裂解型腺病毒Ad-E1A在ECV304细胞内复制裂解,抑制细胞的生长,并可以降低VEGF的表达,探讨了Ad-E1A可能通过抑制ECV304细胞NF-κB的激活而引起细胞生长抑制的机制,说明Ad-E1A具有抑制肿瘤转移的功能。     

施用沼肥对烤烟生长发育和生理特性以及烟叶化学成分的影响

通过田间试验和实验室检测研究了沼肥发酵原料配方,并就发酵后的沼肥对烤烟生长发育、生理特性和化学成分的影响进行了探索。结果表明,比较5种沼肥发酵的原料配方以A3处理最适宜沼肥种烟;在烤烟生长过程中施用沼肥,能促进烤烟早生快发,茎干显著变粗,叶面积显著变大,干物质积累也显著增加,同时,沼肥能使烟叶中硝酸还原酶和蔗糖转化酶活性提高,促进烟株的碳氮代谢,从而增加烤烟生产的产量和产值。沼肥对烤后烟叶的化学成分影响也较大,总糖、还原糖和钾等成分含量增加,烟碱含量降低。比较4种沼肥处理对烤烟的影响,B2处理效果最明显。     

肠杆菌诱导型AmpC酶对第三代和第四代头孢菌素的影响

目的探讨诱导型AmpC酶对三代、四代头孢菌素的影响及其治疗策略。方法采用药敏纸片扩散法,用FOX药敏纸片作为诱导剂,以CAZ、CTX和FEP作为指示剂,检测肠杆菌的诱导AmpC酶的产生。结果待测的196株菌株中有101株为产诱导型AmpC酶阳性（51．5％）,其中阴沟肠杆菌58株（67．4％）,产气肠杆菌18株（52．9％）,沙雷菌属共8株（40％）,费劳地枸椽酸杆菌6株（42．8％）,聚团肠杆菌6株（33．3％）,奇异变形杆菌5株（20．8％）,其余95株产诱导型AmpC酶为阴性。产诱导型AmpC酶阳性菌株中无一株对FEP纸片的抑菌圈直径有影响,诱导型AmpC酶试验均为阴性。结论对于鉴定确认为诱导型AmpC酶阳性菌株的感染,即使实验报告三代头孢菌素为敏感,也应慎用或避免使用第三代头孢菌素的治疗,以第四代头孢菌素如头孢吡肟为首选药。     

植物非叶绿色器官光合贡献研究进展

植物光合作用是生物界赖以生存的基础.长期以来,叶片被认为是植物进行光合作用的重要器官.然而在逆境条件下,植物非叶绿色器官的光合贡献也具有巨大的潜力.近年来,为了探究植物增产的新途径,科研工作者纷纷把目光投向了植物非叶绿色器官.本文简述了植物非叶绿色器官中能够进行光合作用的器官类型、非叶绿色器官光合贡献率及其光合贡献率的...     

医护合作式疼痛管理在创伤性蛛网膜下腔出血患者中的应用

目的 探讨医护合作式疼痛管理在创伤性蛛网膜下腔出血患者中的应用效果. 方法 选取我院2019年4月～2021年4月收治的856例创伤性蛛网膜下腔出血患者为研究对象,随机分为对照组(n=419)和观察组(n=437).对照组采取常规护理干预模式,观察组在常规护理基础上进行医护合作式疼痛管理干预,观察比较两组患者护理干预前...     

利用ATP扩增反应与生物发光法结合检测微量微生物

摘要:【目的】腺苷酸激酶（adenylate kinase, ADK）和多聚磷酸盐激酶（polyphosphate kinase, PPK）偶联催化的ATP扩增反应结合生物发光检测法能够对微量微生物进行检测。但是PPK当中结合的内源性的ADP会产生背景干扰,影响测定。本文旨在融合表达ADK和PPK,并建立一种方便有效的内源性ADP的去除方法,降低背景,使之与传统生物发光法结合,实现高灵敏生物发光法检测微量ATP及微生物。【方法】PCR扩增得到PPK、ADK基因,插入表达载体pET28a (+)中构建重组表达质粒pET28a (+)-PPKADK,表达PPK-ADK融合蛋白。利用表面包裹聚胺醇（Polyurethane）的磁珠（magnetic beads）,通过化学反应将腺苷酸双磷酸酶（apyrase）固定于磁珠表面,制备固相腺苷酸双磷酸酶（Beads-apyrase）,用于除去与融合蛋白结合的内源性ADP,降低ATP扩增反应的背景,从而使之与生物发光反应相结合,测定微量外源ATP及细菌菌落数。【结果】表达的融合蛋白具有PPK和ADK的活性,利用Beads-apyrase可以方便而有效的去除内源性ADP,显著地降低反应背景,从而实现了利用ATP扩增反应与传统生物发光反应结合,测定了小于1 fmol的外源微量ATP,使生物发光法检测ATP及微生物的灵敏度提高至少100倍。【结论】利用Beads-apyrase能够方便、有效地降低PPK-ADK中的ADP背景,从而使PPK-ADK催化的ATP扩增反应能够与传统生物发光法相结合,极大地提高了生物发光法的灵敏度。     

滑菇原生质体制备研究

通过对滑菇原生质体最佳制备条件的研究表明:利用OS培养基、1.5%溶壁酶将培养13 d的滑菇菌丝在0.6 mol/L甘露醇、pH 6.5、25℃条件下酶解5 h,原生质体产量最高,可达4.85×106个/mL。     

集成干扰素突变体IIFN72C的构建及其聚乙二醇定点修饰

目的：设计构建集成干扰素突变体IIFN72C并进行聚乙二醇定点修饰,以获得高活性的长效干扰素分子。方法：利用蛋白质分子同源模建,选择在集成干扰素分子IIFN的第72位引入半胱氨酸残基构成集成干扰素突变体IIFN72C。诱导表达后经包涵体变复性和层析纯化,与单甲氧基聚乙二醇（mPEGMAL）定点偶联。修饰产物经纯化后,以SDSPAGE考察其纯度,用WISHVSV系统进行生物活性测定。结果：IIFN72C以包涵体形式表达,表达量占菌体总蛋白的30%以上,比活性与突变前相当;修饰产物大多数为单修饰体,纯化后纯度大于98%,比活性保留约为修饰前的8%。结论：成功设计并表达IIFN72C用于PEG定点修饰,修饰产物活性保留得以提高。     

含转人乳铁蛋白奶粉对SD大鼠亚慢性毒性的研究

目的:研究人乳铁蛋白奶粉对SD大鼠营养状况、生理、生化指标等亚慢性毒性的影响.方法:取初断乳SD大鼠140只,雌雄各半按照体重随机分为7组.分别饲喂添加比例为7.5%,15%和30%转基因成分奶粉的饲料、添加比例为7.5%,15%和30%不舍转基因成分奶粉的饲料和基础饲料90天.在实验中期和未期采血检测血液常规指标.实验结束时处死实验动物,计算脏器指数,并对主要脏器进行病理组织学观察.结果:试验期间各组动物生长发育情况良好,给予含转基因成分奶粉实验组动物的血常规与不含转基因成分奶粉组和常规饲料组相比均无显著性差异(P≤0.05),未见各组实验动物的脏器组织出现任何病理形态学改变.结论:未发现含转基因成分的奶粉对实验动物有亚慢性毒性.