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目的:检测PC-1基因在前列腺癌细胞周期中各时间点的表达变化。方法:用200 ng/mL诺可唑(nocoda-zole)处理前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2,16 h后使细胞处于G2/M期,在不同时间点收获细胞,分别进行流式分析和Western印迹,检测PC-1基因的表达。结果:流式分析和Western印迹结果显示,在G2/M期,LNCaP和C4-2前列腺癌细胞系中PC-1基因高表达。结论:PC-1基因的表达与前列腺癌细胞的细胞周期有关,提示PC-1可能在细胞周期调控中发挥作用。 相似文献
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目的: 观察快速减压对血脑屏障及MMP-9 mRNA表达的影响及其可能机制,为防治快速减压脑损伤提供理论依据。方法: SD大鼠48只随机分为4组(n=12):正常对照组(不进行减压),快速减压(大鼠置于减压舱舱内2 min内压力降至20 KPa)6 h组(减压6 h)、24 h组(减压24 h)和48 h组(减压48 h),后取样4只测脑半球及海马含水量、4只测伊文蓝(EB)含量以及4只应用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)观察MMP-9 mRNA表达量的变化。结果: 快速减压后6 h、24 h、48 h半球和海马含水量、EB以及MMP-9 mRNA与正常对照组比较均增加(P<0.05, P<0.01), 海马均高于半球(P<0.05, P<0.01)。快速减压后48 h组海马的含水量、EB以及MMP-9 mRNA较24 h组均减少(P<0.05)。快速减压后海马、半球含水量与EB(r=0.514, P<0.05)及MMP-9 mRNA的表达(r=0.575, P<0.05)呈正相关,EB与MMP-9 mRNA的表达(r=0.796, P<0.01)呈正相关。结论: 快速减压引起脑半球、海马组织血脑屏障的破坏,发生脑水肿,这可能与MMP-9 mRNA的过表达有关。 相似文献
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目的:通过建立过表达PC-1的前列腺癌LNCaP细胞系及敲低PC-1表达的C4-2细胞系,探究PC-1激活AKT信号通路的分子机制。方法:将PC-1基因及针对PC-1的siRNA序列,分别克隆至慢病毒表达载体pCDH-EF1-Myc-MCS-T2A-Puro及干扰载体pSIH1-H1-Puro,包装成慢病毒后分别感染前列腺癌LNCaP及C4-2细胞,通过Western印迹鉴定PC-1过表达及敲低效果,并检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白S6K、AKT的磷酸化水平。结果:PC-1过表达时,S6K磷酸化水平下降,而AKT的磷酸化水平上升。结论:PC-1可以通过抑制S6K激酶活性,解除其对AKT的负反馈抑制作用,从而激活AKT激酶的活性。 相似文献
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应用Red重组工程技术建立asd基因缺失的大肠杆菌DH108菌株 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:建立一株新遗传表型的大肠杆菌DH10BAasd菌株。方法:应用pKD46介导的重组系统、kan/kil选择反选择系统、双链线性DNA重组技术和重叠引物介导的DNA重组技术,在菌株DH10B体内,对其染色体上的asd基因进行了基因敲除。结果:建立了一株二氨基庚二酸(DAP)营养缺陷型重组大肠杆菌DH10BAasd。结论:为进一步建立以大肠杆菌DH10B为载体的DNA疫苗或基因治疗载体奠定了基础。 相似文献
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目的:检测癌基因D52家族新基因船一,在细胞周期各时相的表达变化。方法:用1mmol/L羟基脲处理前列腺癌细胞系LNCaP和C4-2B 40h,使细胞同步化于G1/S期,在药物撤除后0-16h不同时间点收获细胞,分别进行流式分析和Westernblot检测。结果:流式分析和Westernblot检测在LNCaP和C4-2B细胞系中得到了趋势一致的结果,印PC-1基因在GVM期高表达。结论:PC-1基因的表达与前列腺癌细胞的细胞周期有关,表明PC-1蛋白可能在G2/M期发挥作用。 相似文献
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双报道基因系统的构建以及在N蛋白生物功能研究中的应用 总被引:2,自引:0,他引:2
为研究 λ噬菌体调控因子 N 蛋白的生物功能,应用 λ噬菌体感染、 P1 噬菌体转导、体内、体外重组方法,通过对遗传标记的筛选,将 lac Z 和 gal K 报道基因、λ噬菌体 p L 操纵子负责调控转录、翻译的 D N A 序列以及转录终止子装配到大肠杆菌染色体上,构建成菌株 Z H1041、 Z H1042 和 Z H1142.应用 Z H1142 菌株模拟 λ噬菌体的自然状态对其调控蛋白 N 的生物功能进行了研究.研究证明, N 蛋白不仅在转录水平上正向调控基因表达,还具有一种新的在翻译水平上负向调节自身基因表达的生物功能. 相似文献