VISTA-Ig融合蛋白的表达及其包涵体复性研究

[目的]构建VISTA-Ig融合蛋白表达载体,进行诱导表达获得VISTA-Ig融合蛋白。[方法]以C57BL/6小鼠脾脏细胞c DNA为模板,扩增小鼠VISTA胞外段基因,利用重叠延伸PCR的方法合成VISTA-Ig融合基因,构建重组质粒p ET-22b-VISTA-Ig,在大肠杆菌表达菌株E.coli BL21(DE3)中诱导表达。[结果]VISTA-Ig融合蛋白主要以包涵体的形式存在。变性后,利用镍柱纯化,通过采用氧化型/还原型谷胱甘肽(GSH/GSSG)复性体系,复性效率达到80%以上,提高了复性效率。利用r Protein A柱对目标蛋白进一步纯化,Western Blot鉴定结果显示,能与Ig G Fc(HRP)抗体特异性结合。[结论]成功构建了重组质粒p ET-22b-VISTA-Ig,纯化的VISTA-Ig包涵体蛋白复性效率得到明显提高,为后续VISTA-Ig免疫学功能的研究奠定了基础。     

新型喜树碱类抗癌药物的研究进展

喜树碱是1966年由喜树中分离而来的一种五环结构的生物碱,早期对其抗肿瘤活性的发现更是引发了科学家们对此类化合物极大的研究兴趣,现在已经证实喜树碱类化合物主要是通过抑制在DNA代谢过程中发挥重要作用的I型拓扑异构酶。但其自身因水溶性差、毒副作用强,在临床应用上易出现不良反应。半个世纪以来,国内外研究者在对其作用机制及构效关系的研究基础上,开发出了数以百计的喜树碱类衍生物,很多已经进入临床或临床前研究。但目前仅有两种喜树碱类的化合物拓扑替康和依立替康被美国FDA批准应用于临床上肿瘤的治疗。本文就已上市的喜树碱类化合物以及喜树碱类抗肿瘤药物开发的挑战进行了综述。     

高等真核生物RNA聚合酶B免疫方法研究

在真核生物中,关于依赖于DNA的RNA 聚合酶（依赖于DNA的RNA聚合酶A, B,C,以 下统简称为A酶、B酶、C酶）免疫特性的研究 对于了解酶的结构、功能、在细胞中的分布以及 在生物进化过程中的变化都具有重要意义。在 A酶、C酶以及低等真核生物的B酶的研究中 都有不少成功的报道^[4-10]。然而,也有许多作 者报道,用高等真核生物的B酶免疫兔子、豚鼠 都未获得B酶的抗血清^[4,7-10].     

土壤杆菌Ti质粒遗传工程的一项新技术

本文叙述了一种新技术,可以容易地把外源遗传成分引入根癌土壤杆菌DNA的特定区段。所用的质粒(1)可以进入根癌土壤杆菌但不能在其中保持,(2)它和受体菌基因组有一段同源区,(3)有适当的标记。选择标记就可以选到外来质粒与寄主基因组发生重组的转移接合子。     

我国洪涝灾害受灾及成灾面积的预测分析

运用ＳＡＳ软件的非线性回归,并结合马尔可夫链方法建立了因洪涝灾害造成的我国农田受灾及成灾面积的２个预测模型,结果表明本文所作的预测效果较好,为我国的灾害预测提供了一种方便实用的方法。     

昆仑—阿尔金山地区下二叠统始复通道(竹蜓)动物群

1971年,新疆地质局区测大队在昆仑山东段及阿尔金山的西部开展1:100万区域地质调查中,从三个地区采获下二叠统上部始复通道(竹蜓)动物群:1)且末县阿羌东北部大古恰两侧叶桑岗组;2)且末县阿羌西部包四堂一带叶桑岗组;3)昆仑山东段于田县     

特异性抗体致敏SPA菌体协同凝集反应的研究

金黄色葡萄球菌 A 蛋白能够与许多哺乳动物 IgG 的 FC 段发生非特异的结合,这一特性已广泛应用于免疫研究中。作者等用含 A 蛋白葡萄球菌(简称 SPA 菌体),以细菌、钩体和流感病毒的抗体制成致敏试剂,对 SPA 菌体协同凝集反应进行了实验和应用研究。现将所得结果报道如下。     

黄牛皮肤内圈形盘尾丝虫微丝蚴的昼夜规律及季节变化的观察

外周血液中的微丝蚴一般都有一定的昼夜周期和季节周期,然而皮肤组织中微丝蚴的周期性都不明显。在盘尾丝虫属中,据Mellor对马皮肤中(Onchocerca cervicalis)微丝蚴观察和Eichler对牛皮组织中(Onchocerca gutturosa)微丝蚴测定以及Marroquin(1974);Auderso(1975)对人体皮肤中(Onchocerca volvulus)微丝蚴的研究,都表明无周期节律,本丝虫的周期性尚无详细了解,特别是在中国还缺乏详细研究。我们于1984年2月至1985年     

“华星一号”菌株(BF839)微生物饲料添加剂对肉鸡促生长作用的研究

本文从微生态观点出发,用“华星一号”菌株(BF839)作为饲料添加剂,对688羽的“AA”肉鸡分成5组进行56天的饲喂试验,对照组(Ⅰ)添加上霉素,试验组(Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ)添加“华星一号”。试验结果表明,试验各组平均活重均高于对照组(P<0.05),分别比对照组提高16.89%,10.85%,19.33%,15.19%,饲料/增重分别降低:16.35%,11.03%,16.35%,12.93%,死亡率分别下降38.97%,62.80%,63.12%,50.40%,经济效益每羽肉鸡分别提高1.52元,1.06元,1.94元,1.47元。试验结果证明:“华星一号”菌株(BF839)作为肉鸡饲料添加剂比土霉素促进生长,防治疾病,提高饲料利用率和经济效益有明显效果。     

树下丘脑视交叉上核突触超微结构的电镜观察

本研究借助免疫电镜和溃变纤维电镜追踪等技术,探索我国南方特产,昼行动物“灵长类原宗”树鼠句（ＴＢＣ）下丘脑视交叉上核（ＳＣＮ）的突触,特别是ＳＣＮ中５－羟色胺（５－ＨＴ）能和视纤维传入的突触联系的超微结构特征,结果表明：ＴＢＣ的ＳＣＮ主要包含不对称性ＧｒａｙⅠ型（ＧＴⅠ）和对称性ＧｒａｙⅡ型（ＧＴⅡ）两种突触类型。其中ＧＴⅠ突触的后膜下颇多呈现“三体一线”的节下小体。５－ＨＴ能末梢在ＴＢＣ的ＳＣＮ（主要在其腹侧）中形成丰富的ＧＴⅠ和ＧＴⅡ突触。还观察到ＳＣＮ中５－ＨＴ能末梢和非５－ＨＴ能轴突构成颇多的轴－轴突触,５－ＨＴ能末梢既可为突触前也可为突触后成分。这在大鼠ＳＣＮ中未见报道,而视纤维传入在ＳＣＮ腹外侧区主要形成ＧＴⅠ突触