微生态制剂对肉鸡肌肉品质影响的研究

目的 研究微生态制剂（昌健素）对肉鸡肌肉化学成分的影响。方法 选取1日龄健康AA肉鸡180只,随机分为3个处理,每个处理3个重复,每个重复20只。处理1为空白对照,自由饮用清水;处理2在饮水中按0.1%添加10%氟苯尼考,处理3在饮水中按0.1%添加昌健素。结果 昌健素可增加肉鸡肌肉的滴水损失和熟肉率（P<0.05）;增加肌肉中粗蛋白和粗脂肪的含量、降低水分的含量（P<0.05）;提高41日龄肉鸡肌肉中铁和锌的含量,降低钙和锰的含量（P<0.05）;降低肉鸡胸肌中饱和脂肪酸的含量（P<0.05）;提高肌肉中总氨基酸、必需氨基酸和鲜味氨基酸的含量（P<0.05）;增加肉鸡肌肉中丙二醛（MDA）的含量（P<0.05）。结论 微生态制剂昌健素的添加能改善肉鸡的肌肉品质。     

体感皮层神经元放电间隔的均值与变异系数的相关分析

放电间隔(inter-spike interval,ISI)均值与平均放电率互为倒数,反映放电的平均统计特性,但前者可用变异系数(coefficient of variance,CV)或方差等反映样本变异程度,所含信息量较后者更多。分析ISI均值及其CV将有助于了解中枢神经机制。根     

杭州市区土生苔藓植物分布与生态因子的关系

在杭州市区设立的21个样点中,记录到土生苔藓植物22科31属47种.基于样点中苔藓植物种类的生态重要值和样点生态因子数据进行典范对应分析.结果表明:人为干扰和土壤pH是影响杭州市区土生苔藓植物分布的主要生态因子.在市区平原地势的公园和绿地,人为干扰较大,土壤呈碱性,苔藓植物种类以小羽藓属、真藓属和丛藓科为主;而在海拔较高的丘陵地区,人为干扰较小,土壤呈酸性,苔藓植物种类相对丰富,侧蒴藓类和苔类较多.对47种土生苔藓植物进行生态位宽度计测,多数苔藓植物的生态位宽度较窄.其中,东亚拟鳞叶藓的生态位宽度最大(0.3510),广泛分布在西湖西南的丘陵地区;平叶毛口藓和细叶小羽藓的生态位宽度次之,分别为0.2239和0.2185,是市区平原地势的公园和绿地中的常见种.     

精子介导转基因动物的制备

采用直接注射的方法,将脂质体包裹的含人乳铁蛋白基因的重组质粒pLNCXHLF注入兔睾丸组织和羊输精管中,一个月后分别与正常雌兔及正常的母羊交配。所产仔兔均为活体,经PCR和Southern检测,转基因仔兔阳性率平均为35%(11/31);羔羊经引物F1/R1系统PCR检测阳性率为33.3％（4/12）,F2/R2系统PCR检测阳性率为25%（3/12）。将流产羔羊组织解剖后提取舌、肺、肝脏、肌肉、皮肤、脑、生殖腺、脾脏、小肠、心脏、肾脏共11种组织的总DNA进行PCR检测,发现：F1/R1和F2/R2系统PCR检测出阳性信号存在于不同组织;F2/R2 PCR系统检测阳性信号较F1/R1 PCR系统少;而且各种组织的外源DNA存在的拷贝数不等,造成阳性信号的强弱程度不同。结果表明：1）脂质体包裹外源基因转染精子的方法,可将外源基因导入受精卵,并得到了较高的转基因阳性率;2）精子携带外源DNA的整合过程是随机的,在受精过程和胚胎早期分化过程中可能发生了片段丢失、不完全整合或游离于基因组存在而产生嵌合体。本文的研究结果证明了该方法是一种简捷有效的新途径,为进一步深入探讨精子介导转基因动物制备可行性奠定了基础,给精子载体法制备转基因哺乳动物研究提供了有价值的参考。 Abstract:The recombinant plasmids pLNCXHLF fused with human lactoferritin gene were directly injected into male rabbit's testis and male goat's spermaductus.The transfected males were fertilized with females one month later.Using F1/R1 PCR system and southern blotting,the transgenic positive rate of rabbit offsprings genomic DNA was 35%(11/31).From the PCR results of F1/R1 and F2/R2 system,the transgenic positive rate of genomic DNA of goat offsprings were 33.3% (4/12)and 25%(3/12) respectively.We prepared genomic DNA from 11 kinds of tissues of goat offsprings,which were tongue,lung,liver,muscle,skin,brain,gonad,spleen,intestines,heart,and kidney.The result of F1/R1 PCR system indicated that the abilities to uptake exogenous DNA were various in different tissues;the positive signals of F2/R2 PCR system were feebler than the ones of F1/R1 PCR system,and the density of positive signals attributed to the amount of copies of exogenous DNA in the tissues.In this experiment,spermatozoa-mediated gene transfer can produce the transgenic animals after exogenous DNA being entrapped by liposome.But during the course of fertilization and the early process of embryo proliferation,the exogenous DNA had lost segments,partly integrated,or existed outside of genomic DNA.So the rate of chimera was relatively high.According to this result,this method is not only a simple and effective way to produce transgenic animals but also make references to other researchers to prepare transgenic mammals by this means.     

骨骼肌特异表达载体的构建与验证

目的:构建肌肉特异性表达线虫ω-3脂肪酸去饱和酶的肌肉特异性载体,证明其表达的有效性.方法:化学合成292bp的带有肌肉特异性转录因子结合位点的DNA序列,然后与线虫ω-3脂肪酸去饱和酶基因cDNA、去除CMV启动子的表达载体pcDNA3.1连接构成肌肉特异性表达载体pcDNA3.1 - SF,4w龄C57BL/6小鼠肌肉注射该重组载体,RT - PCR检测证明其表达有效性.结果:DNA测序结果证明合成的292 bp片段带有肌肉特异性表达元件;PCR鉴定显示启动子片段正确地插入到目的基因上游;RT - PCR鉴定显示肌肉内ω-3脂肪酸去饱和酶基因得到有效转录.结论:该试验为在转基因动物的肌肉中表达外源基因奠定了基础.     

跨膜型TNF-alpha单克隆抗体腺病毒表达载体的构建和鉴

目的：应用AdEasy-1 系统构建包含tmTNF-alpha单克隆抗体轻、重链序列的重组腺病毒表达载体。方法：首先PCR 合成抗体 轻、重链序列,分别将轻、重链序列插入经过改造的含有双启动子的穿梭质粒pShuttle-2CMV,将穿梭载体电转化转化AdEasy 系 统BJ5183 感受态,挑取单克隆扩增质粒后酶切鉴定。结果：成功构建重组腺病毒表达载体pAdEasy-tmTNF-alpha,抗体重链、轻链序 列酶切后经1%琼脂糖凝胶电泳证实条带片段大小正确,电转化BJ5183 后挑选重组克隆提取质粒,PacI酶切后重组片段位于4.5 kb及3 kb位置,证明重组腺病毒质粒pAdeasy-1-tmTNF-alpha构建成功。结论：将腺病毒系统与单克隆抗体技术相结合,利用AdEasy-1 系统成功构建腺病毒重组tmTNF-alpha单克隆抗体表达载体,为进一步开展肿瘤基因治疗的研究提供基础。     

蜕皮激素与其受体EcR-USP的转录调控机制

蜕皮激素20-羟基蜕皮酮(20-hydroxyecdysone, 20E)是一种典型的类固醇激素, 主导调控昆虫的蜕皮、变态、生殖等重要生理过程。20E受体EcR-USP已被鉴定近20年, 20E与其受体复合物的转录调控机制也有了许多重要突破。已有研究表明： （1）20E受体由核受体EcR和USP形成; （2）EcR-USP异源二聚体在分子伴侣蛋白复合物的协助下获得DNA结合活性; （3）20E通过解除共阻遏因子和募集共激活因子来激活EcR USP异源二聚体并启动下游基因的转录; (4）20E-EcR-USP配体-受体复合物引发20E初级应答基因的表达, 由20E初级反应基因编码的转录因子诱导表达的20E次级应答基因级联放大20E信号, 从而调控昆虫蜕皮、变态、生殖等生理过程。     

焦化厂地肤根内解芘细菌的筛选及促生潜力

从多环芳烃耐受植物根内分离具多环芳烃降解功能的内生细菌并研究其促生特性,为内生菌协同宿主植物修复多环芳烃污染土壤提供基础.以长期受多环芳烃污染的焦化厂区生长的地肤为材料,从其根内分离出以芘和1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)为唯一碳源和氮源的内生细菌8株.通过芘降解试验,筛选得到3株高效芘降解内生细菌KSE4、KSE7和KSE8,经鉴定分别为芽孢杆菌属、假单胞菌属和鞘氨醇菌属.通过液体培养试验,研究了3株菌在芘胁迫下产ACC脱氨酶的能力和对地肤种子萌发的影响.结果表明: 随着芘浓度(0~15 mg·L^-1)的升高,ACC脱氨酶活性降低,其中KSE7的效果最好,在芘浓度为15 mg·L^-1时,地肤发芽率和芽长分别比对照提高了44.8%和61.1%,在地肤-微生物修复焦化厂污染土壤的修复中具有一定的应用潜力.     

鲸类低氧耐受的分子机制初探:基于HIF1α和TSC1基因的生物信息学分析

鲸类(Cetacea)具有超强潜水能力,长时间潜水造成的体内低氧是其适应完全水生生活面临的挑战之一.为了克服体内低氧环境,鲸类产生了一系列低氧耐受相关的解剖和生理等方面的适应特征,然而这一适应的分子机制仍不清楚.本研究选择在细胞感知和适应内环境氧分压变化的过程中发挥重要作用的低氧诱导因子(Hy-poxia-induci...