深圳市金黄色葡萄球菌耐药性分析及分子分型

目的 了解深圳市金黄色葡萄球菌的耐药性特点及分子分型特征。方法 收集2012年来自深圳市7所医院的428株金黄色葡萄球菌,以琼脂稀释法测定其对12种抗菌药物的最低抑菌浓度（MIC）,采用聚合酶链式反应（PCR）检测杀白细胞毒素（PVL）,并对携带PVL基因的菌株进行多位点基因序列分型（MLST）。结果 428株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）116株（26.2%）,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌（MSSA）312株（73.8%）。12种抗菌药物中,该菌对青霉素和红霉素的耐药率最高,分别为88.8%和44.2%;未发现替考拉宁、利奈唑胺和万古霉素的耐药株。MRSA对青霉素和环丙沙星的耐药率显著高于MSSA。428株金黄色葡萄球菌中,60株（14.02%）携带PVL基因。MLST分型结果显示共有14种已知序列型和4种新的序列型,其中ST59和ST338最多,分别为16株和12株。结论 深圳地区金黄色葡萄球菌MRSA检出率以及对多种抗菌药物的耐药率均低于全国平均水平,PVL基因阳性率处于中等水平;存在多种ST分型,以ST59和ST338多见,具有遗传多样性和独特的遗传背景。     

利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因的HCT-116细胞株北大核心CSCD

为更好地研究靶向硫氧还蛋白还原酶1的小分子化合物的细胞内靶点选择性,利用CRISPR/Cas9系统构建稳定敲除TrxR1基因(编码硫氧还蛋白还原酶1)的HCT-116细胞株。首先根据TrxR1基因序列和CRISPR/Cas9靶点设计原则,设计并选择合适的敲除位点,再根据敲除位点序列设计敲除TrxR1基因的sgRNA干扰序列,以pCasCMV-Puro-U6空质粒载体为骨架构建能表达该sgRNA干扰序列的重组质粒。质粒共转染至HCT-116细胞后,利用嘌呤霉素筛选TrxR1敲除的HCT-116细胞,通过DNA测序、免疫蛋白印迹、TRFS-green荧光探针和细胞内TrxR1酶活力检测等方法鉴定和验证HCT-116细胞的TrxR1基因敲除效果。进一步通过CCK-8实验初步研究靶向TrxR1小分子化合物对细胞内TrxR1酶活力和细胞增殖力抑制的相关性。结果显示,表达sgRNA干扰序列的重组质粒可以敲除HCT-116细胞中TrxR1基因,筛选获得的稳定敲除细胞HCT116-TrxR1-KO中无TrxR1蛋白表达,而靶向TrxR1小分子抑制剂对该细胞无TrxR1酶活力和细胞增殖力抑制效果。本研究利用CRISPR/Cas9系统成功构建了HCT-116的TrxR1基因敲除的稳定细胞株,为进一步研究TrxR1在相关疾病的发生机制和治疗中的作用奠定了基础。     

猴头菌和金针菇漆酶对不同染料的降解

利用漆酶(laccase)处理染料废水是近年来研究的热点.本研究以猴头菌Hericium erinaceus和金针菇Flammulina filiformis的发酵液为试验材料,通过硫酸铵沉淀、离子交换层析和超滤等方法,对发酵液中的漆酶进行了初步的分离纯化,然后分别研究了两种初提纯漆酶及其与小分子介体组成的漆酶介体系统...     

胞内钙平衡在培养的牛主动脉内皮细胞低氧和复氧损伤中的作用

本文通过建立培养的牛主动脉内皮细胞体外低氧复氧模型,观察低氧和复氧时胞内钙浓度的改变与存活率的关系。结果显示,随低氧时间延长内皮细胞存活率下降,低氧后再复氧存活率进一步降低。低氧时无钙溶液孵育降低细胞的存活率,但复氧时无钙溶液孵育则增加细胞的存活率。低氧２ｈ胞内钙浓度从９９ｎｍｏｌ／Ｌ降对６９ｎｍｏｌ／Ｌ,无钙时胞内钙进一步降低,低氧４ｈ再复氧４０ｍｉｎ,胞内钙浓度恢复至正常。提示细胞内钙浓度平衡     

成年去胸腺大鼠和老年大鼠肝微粒体混合功能氧化酶及血浆性激素水平的变化

成年去胸腺(ATx)大鼠和老年大鼠肝微粒体混合功能氧化酶(MFO,包括细胞色素P450、氨基比林-N-脱甲基酶)的活力比成年对照大鼠的低,且降低幅度雄性明显大于雌性。雄性ATx大鼠和老年大鼠血浆睾酮(T)水平降低,雌二醇(E_2)水平增高,E_2/T比值明显增高;雌性ATx大鼠和老年大鼠血浆E_2和T水平均降低,E_2/T比值无明显变化。给雄性ATx大鼠皮下注射丙酸睾丸素可使其肝微粒体MFO活力恢复。提示胸腺对肝脏MFO的影响可能是通过性激素介导的。     

一株高效广谱染料降解细菌的分离鉴定及其脱色特性初探

从土壤样品中分离到一株高效染料脱色菌株N-4,根据形态学特征及16S rDNA基因序列分析,该菌株初步鉴定为Leucobacter sp.。利用表面响应法(RSM)对菌株N-4脱色活性深蓝K-R的主要因素进行优化,实验结果表明,菌株N-4脱色K-R的最优条件为:湿菌量10 g/L,染料浓度222 mg/L,硫酸铵1.5 g/L,果糖3.5 g/L,最佳脱色率为100%。此外,实验证明其对多种染料均具有较高的脱色效率。同时,考察了金属离子对染料脱色效率的影响,其中K+、Ca2+、Mg2+、Ba2+、Mn2+等对脱色具有促进作用,而Ni2+、Cu2+、Hg2+对脱色具有明显的抑制作用。     

山东10种植物的核型分析

对山东１０ 种植物进行了核型分析。茴茴蒜（ Ｒａｎｕｎｃｕｌｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ Ｂｇｅ－） 染色体数目２ｎ ＝１６ , 核型公式Ｋ（２ｎ） ＝ ２ｘ ＝ １６ ＝ ２ Ｍ ＋ ２ｍ ＋ ２ｓｍ ＋ １０ｓｔ, “３Ａ”类型; 五脉地椒（ Ｔｈｙｍｕｓｑｕｉｎｑｕｅｃｏｓｔａｔｕｓ Ｃｅｌａｋ－） 染色体数目２ｎ＝ ２６ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ２ｘ＝ ２６ ＝ ８ Ｍ ＋ １８ｍ , “１Ａ”类型; 蛇床（ Ｃｎｉｄｉｕｍ ｍｏｎｎｉｅｒｉ（Ｌ－） Ｃｕｓｓ－） 染色体数目２ｎ＝ ２０ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ２ｘ＝ ２０ ＝ ２Ｍ＋ １６ｍ ＋ ２ｓｍ , “２Ｂ”类型; 波斯菊（ Ｃｏｓｍｏｓ ｂｉｐｉｎｎａｔｕｓ Ｃａｖ－） 染色体数目２ｎ ＝ ２４ , 核型公式Ｋ（２ｎ） ＝ ２ｘ ＝ ２４ ＝ １６ｍ ＋ ２ｍ （ｓａｔ） ＋ ６ｓｍ , “２Ａ”类型; 白车轴草（ Ｔｒｉｆｏｌｉｕｍ ｒｅｐｅｎｓ Ｌ－） 染色体数目２ｎ＝ ３２ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ４ｘ ＝ ３２ ＝ ３２ｍ , “１Ａ”类型; 铁苋菜（ Ａｃａｌｙｐｈａ ａｕｓｔｒａｌｉｓ Ｌ－）染色体数目２ｎ ＝ ３２ , 核型公式Ｋ （２ｎ） ＝ ２ｘ＝ ３２ ＝ ３２ｍ , “１Ｂ”类型; 地构叶（ Ｓｐｅｒａｎｓｋｉａ ｔ?     

谷氨酸对大鼠海马CA1区神经元的短暂性 外向K+电流的影响

为了在离子通道水平探讨谷氨酸对急性分离海马CA