基于纳米金和辣根过氧化物酶双标记抗体的黄曲霉毒素B1高灵敏检测方法的建立及应用

黄曲霉毒素B₁（aflatoxin B₁,AFB₁）在自然界普遍存在,可污染多种粮食作物和饲料,给动物和人类健康造成严重威胁。为建立AFB₁高灵敏度的快速检测方法,本研究通过采用纳米金颗粒（Au nanoparticles,AuNPs）和辣根过氧化物酶（horseradish peroxidase,HRP）双标记AFB₁单克隆抗体,建立新型酶联免疫检测方法（HRP-AuNPs IC-ELISA）,检测下限（IC₁₀）为0.017ng/mL,检测区间（IC₂₀-IC₈₀）为0.026-0.376ng/mL,半数抑制率（IC₅₀）为0.099ng/mL,与黄曲霉毒素B₂、G₁、G₂ 和M₁ 的交叉反应率分别为2.7%、9.3%、2.1%和5.3%,与赭曲霉毒素A、伏马毒素B₁、桔青霉素、展青霉毒素和玉米赤霉烯酮几乎不存在交叉反应。在玉米和面粉样本中的加标回收率可达88.93-103.55%,与LC-MS/MS同时对天然样本中AFB₁ 含量进行检测,结果表明,两种方法相关性良好。本研究建立的HRP-AuNPs IC-ELISA耗时短且灵敏度高,可用于实际样本中AFB₁ 的快速定量检测与分析,也为其他霉菌毒素的精准检测技术开发提供参考。     

温度对蝇蛹俑小蜂寄生瓜实蝇蛹功能反应的影响

【目的】蝇蛹俑小蜂是很多双翅目害虫的蛹寄生蜂。了解温度对寄生蜂寄生效能的影响是利用寄生蜂控制害虫的重要前提。【方法】实验室条件下设置温度为21、24、27、30、33℃,测定温度对蝇蛹俑小蜂雌蜂寄生瓜实蝇蛹功能反应的影响。蝇蛹俑小蜂对瓜实蝇蛹的功能反应用Michaelis-Menten-Ⅱ型功能反应模型N_a=AN/(F+N)进行拟合。【结果】不同温度下蝇蛹俑小蜂的寄生潜能(A)和寄主半饱和密度(F)不同。当温度在27℃时,其寄生潜能最大;而寄主半饱和密度随着温度升高而降低。【结论】瓜实蝇在瓜地盛发期的栖境温度适宜蝇蛹俑小蜂的寄生。     

35S标记DNA探针检测真核单拷贝基因

本室采用国产[α-³⁵S]dATP制备DNA探针,用于检测真核单拷贝基因并初步获得了满意结果。本文还叙述了 ³⁵S取代 ³²P中标记DNA探针和Southern吸印杂交时,适宜的反应条件,优点及其意义。     

排斥区研究综述

排斥区是指溶质分子在亲水界面附近被排斥而形成的一个几百微米区域,与普通的自由水相比,更加有序化,具有很多独特的理化特性,被认为是一种液晶态,即水的液态、固态、气态之外第四态。在生物学领域,如血管内皮细胞、植物根和肌肉等膜的亲水界面,也发现了排斥区。由于细胞膜的磷脂双分子层等亲水界面在生物体中广泛存在,生物体内细胞膜附近的区域很可能也是有序化的水,因此研究排斥区的各种物化性质对于理解和探索生命科学的本质具有重大意义,本身具有十分广阔的应用前景。在本文中,我们主要对排斥区的发现和发展历程进行综述,并从理化性质、结构特点和成因、受到光和电磁照射的影响以及在生物和医学领域的应用这几个方面做了详细描述和讨论,并对排斥区的特性进行了总结,对研究其的必要性进行了阐述,展望了它在生命科学研究中的应用前景。     

BaP通过AhR抑制BMP2诱导的间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化

该文主要研究苯并芘(benzoapyrene,Ba P)对骨形态发生蛋白2(bone morphogenetic protein 2,BMP2)介导的间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化的影响,并探究这种作用的调控机制。用腺病毒Ad-BMP2感染C3H10T1/2细胞,RT-PCR检测到BMP2的表达水平显著增高(P0.001),芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,Ah R)的表达则无显著差异。随后加入不同浓度Ba P处理,检测Ba P对BMP2诱导的C3H10T1/2细胞成骨分化的影响,处理7天检测碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)的染色和活性,14天检测茜素红S染色。结果显示,Ba P可以剂量依赖的方式抑制BMP2介导的ALP和钙盐沉积(P0.001);Western blot检测结果显示,Ba P可以剂量依赖的方式抑制BMP2诱导的p-Smad1/5/8(p-drosophila mothers against de-capentaplegic 1/5/8)及Runx2的表达(P0.01,P0.001)。应用Ah R拮抗剂CH223191后,测定结果显示,其可部分逆转Ba P对BMP2诱导的C3H10T1/2细胞早晚期成骨分化及BMP2/Smad信号通路的抑制作用(P0.05,P0.001)。该研究结果提示,Ba P可通过Ah R抑制BMP2介导的促进间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化,这一过程与BMP2/Smad信号通路受到抑制有关。     

秋水仙碱（COM）诱发小鼠骨髓细胞C—有丝分裂效应的研究

本文以101/E1和C3H/E1的杂种第一代小鼠为材料,一次性腹腔注射秋水仙碱(COM)后,于不同时间取材,观察分析了小鼠骨髓细胞有丝分裂指数(MI)和C-有丝分裂的变化。结果表明:COM处理后2小时,MI和C-有丝分裂均已达到最高;并随处理时间延长而降低;至18小时,MI已降到(1mg/kg)或显著低于(3mg/kg)对照水平,而C-有丝分裂仍显著高于对照组。并对COM影响MI的可能机制以及C-有丝分裂效应与非整倍体诱导活性之间的关系进行了讨论。     

沙蚕移植在对是养殖中的应用及生态效益

日本刺沙蚕属广盐性种,在我国３～４月生殖,生死时亲体群;其幼虫在６刚节之前营浮游生活以后随海流漂至河口卤区开始下沉营底栖生活对虾养殖可利用这一生活习性选择有利的海区和潮汐时间纳苗或亲体,使沙蚕在虾池中大量栖居,既为对虾提供动物性活铒,带动对虾生产过程;又争化底质,保持虾池良好的物质特征和水质。     

不同条件下建立自身免疫性甲状腺炎小鼠模型的比较研究

目的 观察和比较不同性别、抗原剂量、注射频次结合造模时长对猪甲状腺球蛋白(porcine thyroglobulin, pTg)诱导的小鼠实验性自身免疫性甲状腺炎(experimental autoimmune thyroiditis, EAT)模型建立的影响。方法 SPF级80只CBA/J小鼠,在不同性别(雌性60只,雄性20只),不同抗原剂量(pTg 50、100、200μg),不同注射频次结合造模时长(28 d内注射2次,28 d内注射3次及35 d内注射3次)条件下构建EAT小鼠模型。通过甲状腺病理评分、血清抗甲状腺球蛋白抗体TgAb滴度、血清总甲状腺素TT4水平、脾Treg及Th17细胞比例及相关转录因子水平比较造模的效果。结果 (1)相同造模条件下雄性小鼠甲状腺淋巴细胞浸润程度及EAT评分均低于雌鼠,TgAb滴度、Th17细胞比例及IL-17A表达水平均较雌鼠显著降低;(2)50μg造模组TgAb滴度、TT4水平、Th17细胞比例、转录因子RORγt及IL-17A的表达量均显著低于100μg造模组;200μg造模组Foxp3表达量显著高于100μg造模组;(3)28 d 3...     

水稻成熟花药和花粉的结构和组织化学研究

用乙二醇甲基丙烯酸脂(简称GMA)和环氧树脂Epon812包埋的薄切片方法对水稻成熟花药和花粉的结构进行了观察,并对各种结构的性质和细胞中的后含物做了细胞化学的分析.对成熟花药的绒毡层膜及乌氏体的研究采用了分离技术,做了显微和超微观察.证明水稻成熟花药壁和花粉除具一般禾本科植物特征外,还揭示了花药壁表皮上可能有硅质,药壁表皮细胞内含有脂类颗粒,药室内壁具纤维素质的纤维状加厚;发现花粉粒中除了贮存有大量淀粉颗粒外,还含有脂类,成熟花粉中营养核与两个精细胞及两个精细胞间联系紧密;并讨论了薄切片的优越性,绒毡层膜的意义及其上细胞印迹的来源.