鼠伤寒沙门氏菌维生素B_2营养缺陷型的分离和初步遗传定位

通过在筛选培养基中补加超高浓度维生素B_2(Riboflavin)的方法(简称B_2),首次成功的诱变分离到21株独立的沙门氏菌'B_2营养缺陷型。B_2基因的转导分析结果表明,21株营养缺陷型可分为彼此不连锁的4个类群,这意味着B_2生物合成至少涉及4个结构基因。初步的遗传定位指出,2个基因位于沙门氏菌染色体遗传图的7'—22'区域,另2个分别位于22'—34'和61.5'—69'区域。     

超声法重组细菌HCG受体的研究

用超声法将嗜麦芽假单胞菌(Pseudomonas maltophilia)HCG受体进行重组,经电镜及结合实验证明该法是可行的,作者对pH及金属离子对重组的影响进行了初步探讨。     

公共空间疏散风险点定量综合评估方法研究

加强对公共空间中人群疏散风险点的空间干预和风险预防，是管控事故易发点、减少公共空间安全事故发生的重要过程。但是，如果人群疏散风险点的选取出现漏洞或偏差，就会对公共空间监控管理造成错误引导，甚至使得干预措施失效。因而，对精准筛选公共空间中风险点的评估方法研究，评估公共空间人群疏散过程中蕴藏的拥挤踩踏风险，就尤为重要。研究基于宏观视角，采用定量综合评估法，通过对网状道路结构类型的公共空间人群游览路径的调查，以及对空间组织关系特征分析，分别对人群聚集度和空间疏散度进行定量评估后，综合叠加2个因子评估结果，对人群疏散风险度进行评估及风险关键点的筛选。并以重庆动物园为例，运用该种定量综合评价法评估人群疏散风险关键点，其结论综合考虑了人群聚集程度及空间疏散能力，对精准反映公共空间的风险点有积极的实证意义。     

浅谈集安市东北林蛙养殖

林蛙养殖具有投资少、风险小、见效快、收益高的特点,随着东北林蛙半人工养殖技术研究成果的不断成熟,我国出现了大规模的林蛙养殖热潮,集安市林蛙养殖业也步入了高速发展时期。但在养殖技术上仍存在许多问题,本文针对存在的问题,提出相应的对策。     

组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶重组大肠杆菌发酵条件研究

目的:对重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)进行了发酵条件研究。方法:在摇瓶和5L发酵罐中研究了(NH4)2SO4和葡萄糖浓度对质粒的分离稳定性及青霉素G酰化酶表达的影响。结果:该工程菌质粒具有分离不稳定性,培养基中无(NH4)2SO4时发酵过程中pH和糊精水解生成葡萄糖的浓度变化较小,细胞前期(0h-12h)的生长速率降低,质粒分离稳定性和青霉素G酰化酶的表达水平提高。发酵过程中维持低葡萄糖水平可以限制细胞的生长速率,提高质粒稳定性和促进青霉素G酰化酶的合成。采用混合碳源发酵,发酵培养基含糊精2g/L,12h后以1g/L.h恒速流加葡萄糖至35h,控制流加过程葡萄糖浓度0.1g/L左右,平均比生长速率为0.06h-1,发酵结束时质粒稳定性为86%,青霉素G酰化酶的表达水平达23 000U/L。结论:重组大肠杆菌组成型表达青霉素G酰化酶的研究对工业生产有一定指导意义。     

染色质转座酶可及性测序研究进展

染色质转座酶可及性测序(assay for transposase-accessible chromatin with high-throughput sequencing,ATAC-seq)诞生于2013年,具有比脱氧核糖核酸酶I超敏感位点测序(deoxyribonuclease I hypersensitive site sequencing, DNase-seq)和微球菌核酸酶敏感位点测序(micrococcal nuclease sequencing, MNase-seq)更快速、灵敏、简便的优点,是目前分析全基因组范围染色质开放区域的热点技术。通过该技术能获得染色质开放区域的相关信息,从而映射出转录因子等调控蛋白的结合区域和核小体定位等信息,对于研究表观遗传分子机制具有重要意义。本文比较了5种获取染色质开放区域技术的优缺点,重点介绍了ATAC-seq的原理和主要流程,描述了利用ATAC-seq技术研究染色质开放区域的发展概况以及ATAC-seq的相关应用,期望对真核生物全基因组水平的染色质开放区域研究、顺式调控元件鉴定以及遗传调控网络的解析等提供借鉴。     

澳洲坚果MtMADS1-like基因的克隆与表达分析

MADS～box家族基因广泛分布于植物中,在植物花发育的整个阶段起着至关重要的作用.为了探索MADS-box基因在澳洲坚果花发育过程中的分子机理,本研究以澳洲坚果'695'为试材,采用RT-PCR及RACE技术克隆获得澳洲坚果MADS-box类转录因子基因cDNA全长,命名MtMADS1-like(GenBank登录号:MK491608).该基因全长967 bp,开放阅读框ORF长672 bp,编码223个氨基酸,5'-UTR和3'-UTR分别为58 bp和237 bp.序列分析表明,MtMADS1-like具有保守的MADS-box结构域(MADS-MEF2-like)和半保守的K-box结构域,属于Type Ⅱ型MADS-box家族基因.进化分析表明,MtMADS1-like与其他植物中MADS-box蛋白具有较高的同源性,且与猴面花(Erythranthe guttata)MADS-box家族中SVP254的同源性高达67.10％,亲缘关系最近.生物信息学分析表明MtMADS1-like属于不稳定的亲水性蛋白,不具备信号肽,属于非分泌蛋白,α-螺旋和无规则卷曲构成了二级结构的主要蛋白框架,三级结构中MADS-box结构域和K-box形成该蛋白的核心结构,并且作为转录因子定位于细胞核.qPCR分析表明,MtMADS1-like基因在不同的澳洲坚果品种中差异表达,在品种'333'中表达量最高,在品种'344'中表达量最低.研究结果为进一步验证MtMADS1-like的功能及阐明澳洲坚果花发育和开花调控的分子机制奠定了基础.     

胃癌中CDC4和cyclin E的表达及临床意义

检测胃癌中CDC4/Fbxw7、cyclin E的表达,分析其与胃癌临床病理特征的关系和临床意义.采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)检测部分胃癌和胃正常组织中CDC4、cyclin E mRNA的表达;免疫组化(SP法)检测60例胃癌组织及对应正常组织中CDC4/FBXW7、cyclin E蛋白的表达,探讨两者的临床病理特征之间的关系.胃癌中CDC4蛋白表达显著低于正常组织(P<0.05),而cyclin E蛋白的表达在胃癌组织中显著增高,阳性率与癌旁正常组织比较,差异有统计学意义(P<0.01).CDC4、cyclin E蛋白和mRNA表达均与胃癌的分化程度、TNM分期、淋巴结转移及浸润深度有关.CDC4、cyclin E在mRNA表达水平上呈负相关.CDC4的表达缺失可能导致cyclin E的过表达.CDC4的低表达可能是胃癌诊疗及预后判断的重要生物学指标.     

胃癌患者术后并发症的危险因素分析

目的:探讨胃癌术后并发症的危险因素及其防治措施.方法:调查117例胃癌患者手术治疗前后的临床资料,并对术后发生并发症可能的危险因素进行评估、分析.结果:胃癌术后并发症包括切口感染、肺部感染或胸腔积液、腹腔感染、肠梗阻、吻合口瘘,发生率为35.04％(41/117),手术方式、手术时间、胃管留置时间、术后生活习惯与手术后并发症相关(P＜0.05).结论:胃癌术后并发症由多种原因综合引起,除患者素质和病变因素外,6个危险因素依次为:行全胃切除、D2清扫、手术时间＞4h、术中出血量≥800mL、胃管留置时间＞3d、长期吸烟,应重视其围手术期处理.     

主动脉球内囊反搏在心脏手术后心功能不全患者中的应用价值

目的:探讨主动脉球内囊反搏置入在心脏手术后心功能不全患者中的临床应用价值。方法:收集我院收治的心脏术后患者60例,随机分为对照组和实验组,每组各30例,患者均给予相应常规对症治疗,包括吸氧、强心、利尿、扩血管治疗,实验组患者在对照组基础上给予主动脉球囊反搏置入。治疗结束后,对两组患者治疗前后的连续心输出量(CCO)、心脏指数(CI)、人氨基末端B型脑钠肽前体(NT-pro BNP)、中心静脉压(CVP)水平以及临床疗效进行检测并比较。结果:治疗后,两组患者的CCO以及CI水平与治疗前相比均升高(P0.05),NT-pro BNP以及CVP水平均下降(P0.05);与对照组相比,实验组患者治疗后CCO以及CI水平较高,NT-pro BNP以及CVP水平较低(P0.05);实验组患者的治疗总有效率与对照组患者相比较高(P0.05)。结论:主动脉球内囊反搏植入能够显著升高心脏手术后心功能不全患者患者的心输出量,降低心脏后负荷,提高心脏功能,具有较好的临床疗效。