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961.
962.
重组腺病毒介导人肝细胞生长因子在病理性瘢痕基因治疗研究中的应用 总被引:5,自引:0,他引:5
采用细胞内质粒DNA同源重组方法, 将人肝细胞生长因子基因构建于E1, E3区缺失的复制缺陷型5型腺病毒载体上, 获得携带人肝细胞生长因子基因(HGF)的重组腺病毒Ad-HGF. 在293细胞中扩增后用氯化铯密度梯度离心法扩增制备Ad-HGF和Ad-GFP(携带绿色荧光蛋白报告基因的重组腺病毒), 然后, 用Ad-GFP和Ad-HGF体外分别转染原代培养的兔耳瘢痕成纤维细胞, 观察体外转染效率及表达, 并以新西兰兔耳瘢痕为体内模型, 观察局部瘢痕组织中一次性注射Ad-HGF后对已形成瘢痕的治疗作用. 结果显示: (ⅰ) Ad-GFP感染原代培养兔瘢痕成纤维细胞后, 3 d时转染效率为(36.8 ± 14.1)%, 并持续表达20 d以上. (ⅱ) 用ELISA方法检测Ad-HGF感染原代培养兔瘢痕成纤维细胞后HGF的表达, 结果感染后3 d表达量约为76 ng/4.0 ´ 105细胞. (ⅲ)用兔耳瘢痕模型观察在瘢痕内注射不同剂量(8.6 ´ 109, 8.6 ´ 108, 8.6 ´ 107, 8.6 ´ 106 pfu)的Ad-HGF, 于注射后第32天肉眼可见Ad-HGF治疗组瘢痕较治疗前明显缩小、变薄, 甚至与周围皮肤在同一水平. 这一效应呈剂量依赖性: 大、中剂量组(8.6 ´ 109, 8.6 ´ 108 pfu)治疗前后瘢痕肥大指数的减少有统计学意义(P<0.05), 尚可见不同程度再生的丛状新生毛, 低剂量组(8.6 ´ 107, 8.6 ´ 106 pfu)治疗后瘢痕肥大指数有减小但无统计学意义, 对照组多数瘢痕大小无明显变化. 光学显微镜观察组织切片显示, 治疗组真皮中纤维组织明显少于对照组, 并可见毛囊及皮脂腺的存在; 天狼猩红染色显示大剂量组创口中胶原纤维薄且稀少, 而低剂量组和对照组创口中仍有丰富的大而粗的Ⅰ型胶原. (ⅳ)治疗兔体内未检测到抗HGF抗体的存在. (ⅴ) 局部应用Ad-HGF所介导的基因只在局部表达, 不累及远隔的器官和组织, 也未见任何毒副作用. 结果提示, 以腺病毒介导人肝细胞生长因子基因治疗病理性瘢痕在整形外科中具有一定的应用前景. 相似文献
963.
水稻小穗分化调控基因fzp(t)的遗传分析和分子标记定位 总被引:8,自引:0,他引:8
从V20B/花1B杂交后代中发现了水稻小穗分化受阻的突变体fzp. fzp株叶形态正常, 但植株分蘖数明显减少, 最显著的变异是fzp植株的小穗分化完全被阻断, 在正常植株枝梗分化为小穗的部位, fzp植株却形成一团枝梗. 遗传分析表明,fzp受一对隐性基因控制, 其相应基因拟名为fzp(t). 显然fzp(t)是控制小穗分化的关键基因. 在一些F2群体中, 因遗传背景发生改变, 部分突变型植株表现为“中间类型”, 推测可能是冗余基因或其他修饰基因、互作基因的作用. 采用微卫星标记技术和BSA分析方法, 将突变基因fzp(t)定位于第7染色体上的长臂末端, 其中RM172和RM248位于fzp(t)一侧, 它们与fzp(t)的遗传图距分别为3.3和6.4 cM; RM18和RM234位于fzp(t)的另一侧, 与fzp(t)的遗传距离分别为23.1和25.3 cM. 研究结果为进一步对该基因的克隆和功能研究奠定了基础. 相似文献
964.
965.
966.
967.
嗜酸热硫化叶菌麦芽寡粉基海藻糖合酶基因的克隆和表达 总被引:5,自引:0,他引:5
The gene of MTSase (maltooligosyltrehalose synthase) from Sulfolobus acidocaldarius ATCC49426 was amplified by PCR. The primers were designed according to the published sequence of homologous gene from Sulfolobus acidocaldarius ATCC33909. This gene was inserted into the plasmid pBV220 and the resultant recombinant plasmid pBV220-GT was transformed to E. coli DH5 alpha. The activity of recombinant enzyme was about 10 u/g(wet cell). In order to improve the expression level of target protein, some nucleotides in the 3' and 5' of the gene were modified to optimize the second structure of mRNA by PCR amplification using the new primers devised according to the biosoftware GOLDKEY2.0. As a result, the activity of recombinant enzyme increase to 19.8 u/g(wet cell). Then, the helping plasmid pUBS520 which carried the gene encoding the tRNA of rare codons AGG and AGA was transformed to the recombinant strain. But it took little effect. 相似文献
968.
松乳菇中氨基酸及其它营养素含量的测定 总被引:2,自引:0,他引:2
以秦巴山区野生松乳菇子实体为材料 ,分别对其菌盖和菌柄样品中氨基酸、粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、灰分及微量元素的含量进行了测定。结果表明 :在所测定的 1 7种氨基酸中 ,菌盖含有 1 7种 ,菌柄含 1 6种 ,氨基酸总含量分别为 1 9.89%和 1 3 .79% ;必需氨基酸分别占氨基酸总量的 3 6.75 %和 3 5 .95 %。菌盖和菌柄中粗蛋白、粗脂肪、粗纤维、总糖、灰分含量分别为 2 4 .2 7% ,1 9.0 3 % ;6.84 % ,5 .0 2 % ;1 1 .5 2 % ,1 5 .2 6% ;3 7.4 1 % ,2 3 .89%和 7.4 2 % ,5 .2 8%。钙、铁、锌、铜、锰 5种微量元素中 ,铁含量最高 ,在菌盖和菌柄样品中分别为 0 .1 68% ,0 .1 2 % 相似文献
969.
黑米皮花青苷色素测定方法的研究 总被引:15,自引:2,他引:13
以五种黑米皮为实验材料 ,采用优化方法 ,确定了黑米花青苷类色素测定实验条件。结果表明 :黑米皮脱脂后 ,80℃、酸性乙醇 ( 1 .5mol/LHCl-95 %乙醇 =1 5 /85 )、6 0min重复提取两次 ,可实现 95 %以上的色素溶出。提取液选取 1cm比色皿、与 5 35nm波长下测定ABS值 ,计算色价 (E 1%1cm ,λ=53 5nm ) ,作为一种黑米花青苷类色素含量测定方法 ,可用于黑米品质分析 相似文献
970.
钼蓝比色法测定不同产地合子草中总磷脂的含量 总被引:3,自引:0,他引:3
本文采用钼蓝比色法测定了合子草中总磷脂的含量,结果以产江都县的合子草总磷脂含量最高为0.839%(g/g),其次是南通产种子的癖碗脂含量为0.753%(g/g). 相似文献