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931.
郭欣欣邓巧亭王刚吴涵韬李坤吴英松刘天才 《生物技术》2017,(1):29-33
[目的]构建含人白介素2受体β(IL-2RB)基因的真核表达质粒p ENTER-IL-2RB-His,并在293T中进行真核表达,并用免疫共沉淀检测JAK1与IL-2RB在细胞内的相互作用。[方法]在Hela细胞中提取人总RNA,通过RT-PCR获得人IL-2RB的基因全长,并将其克隆至真核表达载体p ENTER-His中。经PCR克隆,双酶切、测序鉴定后,将重组质粒p ENTER-IL-2RB-His转染至293T细胞中。免疫印迹法检测不同时间点的IL2RΒ蛋白(24 h、36 h、48 h)在293T细胞中的表达,用免疫共沉淀检测JAK1和IL-2RB蛋白之间的相互作用。[结果]经PCR克隆、双酶切、测序鉴定质粒克隆正确。免疫印迹可见61 k Da的目的蛋白。共同转染JAK1和IL-2RB的质粒,免疫印迹可见分别为133 k Da和61 k Da的目的条带。[结论]成功获得IL-2RB基因全长,成功构建p ENTER-IL-2RB-His真核表达质粒,并在293T细胞中成功表达,随着时间的推移其表达量增高。免疫共沉淀可以检测到JAK1和IL-2RB两者的蛋白相互作用,这为下一步研究JAK1和IL-2RB这一对蛋白的相互作用的作用方式及作用机制奠定了基础。 相似文献
932.
目的:探讨miR-24对心脏成纤维细胞的生长和迁移的影响及机制。方法:采用RT-PCR检测心肌细胞和心脏成纤维细胞中mi R-24的表达水平。在心脏成纤维细胞中转染mi R-24 mimics、mimics control、mi R-24 inhibitors、inhibitors control后,通过Western blot检测细胞中Col-1、α-SMA的表达,MTT检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡情况,Transwell小室检测细胞迁移能力。通过靶基因预测库预测mi R-24的靶基因,荧光素酶鉴定靶基因的正确性,并通过RT-PCR和Western blot检测转染后细胞中Furin的表达。结果:心脏成纤维细胞HEH2中mi R-24的表达水平与心肌细胞H9C2相比差异显著(P0.01),心脏成纤维细胞中mi R-24表达上调。mi R-24 mimics组中Col-1、α-SMA的表达水平明显低于mimics control组(P0.01)。mi R-24 mimics组中细胞OD值较mimics control组显著降低(P0.01),mi R-24 inhibitors组中细胞OD值较inhibitors control组显著升高(P0.01)。mi R-24 mimics组、mimics control组、mi R-24 inhibitors组、inhibitors control组细胞凋亡无显著性差异(P0.05)。mi R-24 mimics组细胞迁移数目明显低于mimics control组,差异显著(P0.01),mi R-24 inhibitors组细胞迁移数目高于inhibitors control组,差异显著(P0.05)。mi R-24 mimics组细胞中Furin蛋白和m RNA水平明显降低,野生型Furin和mi R-24 mimics共转染的细胞中荧光素酶活性最低。结论:mi R-24在心脏成纤维细胞中高表达,通过靶基因Furin抑制心脏成纤维细胞合成Col-1、α-SMA,抑制心脏成纤维细胞增殖和迁移。 相似文献
933.
目的:通过实验探讨透明质酸钠预防微波消融术后局部组织粘连的效果。方法:120只健康SD大鼠随机分为三组,每组40只,分别为微波消融组(A组,对照组)、微波消融加透明质酸钠组(B组)、微波消融加生理盐水组(C组)。通过对大鼠背部肌肉进行微波消融建立术后局部粘连模型,并在该模型基础上应用透明质酸钠,术后3 d、1 w、2 w、4 w分别对背部组织进行粘连分级、HE染色及免疫组化观察和分析。结果:消融术后3 d、1 w、2 w,B组在粘连分级方面A、B及C 3组间水平差异具有统计学意义P0.05);4 w时A、B、C组间的差异无统计学意义(P=0.458)。两两比较,A、C两组在四个时间点水平差异无统计学差异(P均0.05),而B组在消融术后3 d、1 w和2 w时,粘连分级明显优于A、C组,P=0.029(3 d)、P=0.011(1W)、P=0.004(2W),水平差异显著,有统计学意义;4 w时,P=0.391,无统计学意义。消融术后A、C组HE染色及免疫组化染色光镜下观察,淋巴细胞、巨噬细胞等炎症浸润情况及成纤维细胞数目均较B组多,且A、C组胶原纤维沉积明显多于B组。结论:透明质酸钠能够有效减轻微波消融术后发生的局部组织粘连。 相似文献
934.
设置22个20m×20m的样地,对大别山五针松群落的物种多样性和区系成分进行了研究。结果显示,8800m2的样地内共有维管植物71科152属209种。其中,蕨类植物4科5属6种,裸子植物3科3属4种,被子植物64科144属199种。蔷薇科、樟科、菊科、杜鹃花科、豆科和禾本科等为优势科,所含物种较多。分析结果表明,大别山五针松群落种子植物区系起源古老,地理成分复杂,67个科中,世界分布、热带和温带分布的科分别有21、31和15个,显示出由热带向温带过渡的特性。147个属中,热带成分共43属,占总属数(不包括15个世界广布属)的32.58%;温带成分共有89属,占总属数的67.42%,并以北温带为主。群落垂直结构分为乔木层、灌木层和草本层,其中,Margalef指数、Simpson和Shannon-Wiener指数均以灌木层最大,其次为乔木层,草本层最低。灌木层与草本层的Pielou指数相近,且均大于乔木层。 相似文献
935.
<正>青藏高原幅员辽阔,地势高峻,号称"世界屋脊"。高原之上储有巨量的冰川,亚洲众多大型河流也发源于此,与超过全世界40%人口的生存休戚相关,它对现今全球气候、环境乃至人类社会的发展有着巨大的影响。高原特有的环境也孕育了适应高寒极端环境的生物,形成了高原所独有的生物资源和生态系统。这一地区的地质变迁以及与此相关的生命历史一直备受人们的关注。一般认为,新生代时期印度-亚洲板块之间的碰撞(约5千万年前)启动了青藏高原的隆升,然 相似文献
936.
L-半胱氨酸亚砜裂解酶(L-cysteine sulfoxide lyase,C-S lyase)是香菇中含硫风味物质生物合成途径的关键酶之一。本文基于6个不同香菇菌株的全基因组测序数据,挖掘了24个潜在的香菇L-半胱氨酸亚砜裂解酶(Lentinula edodes C-S lyase,Lecsl)同源基因,对其编码蛋白的生理生化特性、信号肽、跨膜结构域、转录活性、分子进化、保守基序和蛋白三级结构等方面进行了分析。结果发现,这24个香菇Lecsl同源蛋白含有相同的蛋白结构域(IPR015424和IPR000192),都属于L-半胱氨酸脱巯基酶家族(PTHR43092:SF2),都不含信号肽和跨膜结构,但它们的蛋白稳定性有所不同。对24个Lecsl同源蛋白进行聚类分析发现,其中的11个组成了新的进化分支,这一分支的Lecsl同源蛋白在香菇的菌丝体或子实体中有转录活性,且含有蒜酶和L-半胱氨酸脱硫酶的保守基序19,推测这一分支的Lecsl同源蛋白在香菇中具有催化产生含硫风味物质和内源性甲醛的活性。进一步分析发现,这一分支又分为两个亚支,其中一支包含已发现的Lecsl/LE01_CSL1,并且在香菇的菌丝体和子实体阶段都有转录活性;另一个亚支上的C-S lyase同源蛋白仅在菌丝体中有转录活性,推测这两个亚支的L-半胱氨酸亚砜裂解酶分别在香菇生长发育的不同阶段发挥催化作用。通过三维结构的解析,阐明了Lecsl中保守基序19亦是使蒜酶产生催化活性的关键结构域,并且利用分子动力学模拟的方法,预测保守基序19中的Asn3、Gln5和Ser6是香菇C-S lyase产生催化活性的关键氨基酸残基。 相似文献
937.
以田间栽培的‘国庆1号’温州蜜柑(Citrus unshiu ‘Guoqing No.1’)/枳(Poncirus trifoliata)和‘国庆4号’温州蜜柑(C.unshiu ‘Guoqing No.4’)/枳为试材观察丛枝菌根的形态结构。结果表明,泡囊、丛枝、侵入点、根内菌丝、根外菌丝、根外厚垣孢子等结构出现在柑橘根系中,说明柑橘属于典型的丛枝菌根植物。丛枝菌根结构中泡囊出现概率较小,丛枝随处可见,侵入点多样化。丛枝菌根的结构主要存在柑橘根段的伸长区和成熟区,首次观察到根冠和分生区也有侵染。 相似文献
938.
939.
保水剂用量对小麦不同生育期根系生理特性的影响 总被引:21,自引:0,他引:21
在河南禹州试验基地进行田间试验,研究了保水剂不同施用量(0、30、60、90 kg·hm-2)对两个冬小麦品种(郑麦9694和矮抗58)根系生理生化特征、生物量及产量的影响,以探明保水剂对不同生育阶段冬小麦根系的作用机理.结果表明:施用保水剂降低了冬小麦根系质膜透性和可溶性糖含量,提高了根系活力.在各生育期,郑麦9694根系质膜透性降低幅度均大于矮抗58;除90 kg·hm-2处理外,矮抗58的根系活力均显著大于郑麦9694.在孕穗期和灌浆期,郑麦9694的可溶性糖含量降低幅度显著大于矮抗58.在各生育期内,60 kg·hm-2处理的两品种质膜透性和可溶性糖含量均最小,90 kg·hm-2与60 kg·hm-2处理差异不显著.随保水剂用量的增加,郑麦9694的根系活力显著提高,而矮抗58 在60 kg·hm-2处理下最高.施用保水剂还提高了小麦根系生物量,在拔节期和孕穗期,矮抗58的根系生物量大于郑麦9694;而在灌浆期,矮抗58在60 kg·hm-2和90 kg·hm-2处理下根系生物量显著低于郑麦9694.郑麦9694和矮抗58产量均以60 kg·hm-2处理增幅最高.综上,保水剂对郑麦9694的作用效果较矮抗58显著,并以60 kg·hm-2施用量为佳. 相似文献
940.