镉通过引发氧化应激和线粒体损伤诱导PK-15细胞凋亡

镉（cadmium,Cd）是一种生物累积性的有毒重金属元素,能够在肾组织大量蓄积并引起肾发生病变和功能损伤。前期研究证实,Cd处理能够引起猪肾PK-15细胞的活性氧（reactive oxygen species,ROS）水平升高和细胞死亡,但详细机制有待进一步研究。本研究以PK-15细胞为研究对象,通过CCK-8检测、透射电镜观察、DCFH-DA标记、JC-1染色、彗星实验和流式细胞术等研究手段,分别检测Cd处理后的细胞活性、形态变化、ROS生成、线粒体膜电位Δψm、DNA损伤及细胞凋亡情况。CCK-8实验结果显示,CdCl2处理后PK-15细胞活性下降,且呈时间和剂量依赖性;形态学观察发现,CdCl2处理引起PK-15细胞皱缩、变圆,细胞核固缩、染色质凝聚,线粒体肿胀、线粒体嵴减少或消失;荧光染色和流式细胞术检测结果显示,CdCl2处理引起PK-15细胞内ROS水平升高、线粒体膜电位Δψm下降和DNA损伤,最终导致细胞凋亡。Western印迹结果显示,CdCl2处理组中促凋亡蛋白质Bax表达量上调,抑凋亡蛋白质Bcl-2表达量下调,并且CdCl2处理组检测到了活化状态的裂解胱天蛋白酶3(cleaved caspase 3)。此外,ROS清除剂N-乙酰基-L-半胱氨酸（N-acetyl-L-cysteine,NAC）缓解了CdCl2引起的线粒体损伤、DNA损伤和细胞凋亡。综上所述,Cd通过引发氧化应激和线粒体损伤诱导PK-15细胞凋亡。     

南茜文心兰软腐病病原分离鉴定及致病性分析

针对南茜文心兰Oncidium‘Gower Ramsey’软腐病进行病原菌分离、鉴定及致病性分析。形态学鉴定结果表明,病原菌菌株外观乳白、边缘不规则扩散;显微观察结果表明,该菌为革兰氏阴性菌,短棒状;16S rDNA测序结果与已知菌Dickeya dadantii 3937相似度最高,确定病原物Onc1~Onc7为Dickeya dadantii。致病性分析表明,病原菌Onc5可侵染所参试的全部5种文心兰属及其属间杂交种植物,还可侵染蝴蝶兰、金线兰及铁皮石斛,其中铁皮石斛对该菌表现较强抗性。卡那霉素对Onc5菌有较强抑制作用。     

有效霉素A对棘孢木霉的影响及协同防治玉米纹枯病作用

【背景】玉米纹枯病逐渐发展为制约我国玉米持续增产的主要病害,有效霉素A与生防菌木霉均对纹枯病菌具有抗性,但二者各有优缺点。【目的】研究有效霉素A与木霉菌协同作用的可行性,提高对玉米纹枯病的防治水平,实现抗生素类化学农药的减量使用,提高生态环境安全性。【方法】测定有效霉素A处理后的棘孢木霉GDSF1009的细胞壁降解酶及防御反应相关酶活性,烟草叶片验证活性氧及过敏性反应。利用转录组及气相色谱-飞行时间质谱联用分析有效霉素A对GDSF1009基因表达差异及生长代谢的影响,并进行叶片及平皿协同抑菌实验。【结果】有效霉素A对棘孢木霉GDSF1009的几丁质酶、纤维素酶及木聚糖酶的活性无影响,有效霉素A未进入到棘孢木霉菌细胞内。在转录组水平,有效霉素A处理木霉24h和48 h后,与对照相比,差异基因所占比例分别为8.932%和6.779%,有效霉素A对GDSF1009相关的糖类及脂类代谢没有显著影响,仅对氨基酸代谢相关的基因有一些影响,这些基因并不会造成氨基酸代谢的大量变化。同时验证了在二者联合使用时,可以显著地提高玉米纹枯病的防治效果。【结论】有效霉素A对棘孢木霉菌的初生代谢系统是比较安全的,二者协同作用的抗病效果显著高于单因子作用。     

废弃塑料生物法高值化合成聚羟基脂肪酸酯(PHA)研究进展

石油基合成塑料因成本低、易便携、化学稳定性好等优点,使用量逐年增加,但其在自然条件下难以被生物降解,在环境中不断累积,造成了严重的“白色污染”问题。聚羟基脂肪酸酯(PHA)是微生物合成的可降解材料,因为其种类及性能多样,所以应用前景广阔,被视作石油基塑料的优质替代品,然而生产成本是导致其应用受限最重要的问题,特别是底物成本占主要部分。利用废弃塑料重新生物合成可降解塑料PHA,既有助于解决塑料污染,又能够降低PHA生产成本,是推动建立塑料循环经济的有效举措。本文综述了目前废弃塑料降解处理的方法以及不同微生物利用塑料降解物为碳源合成PHA的研究进展。在此基础上,针对己二酸、乙二醇、1,4-丁二醇、对苯二甲酸、苯酚、苯乙烯以及脂肪烃等主要的塑料降解产物进行中心代谢分析,并通过对转化率、吉布斯自由能变化和反应步骤等分析,了解塑料单体与PHA种类的适配性,以期为不同塑料单体用于PHA合成提供理论基础和指导。     

放线菌果胶酶产酶条件及酶促反应条件的研究

从埋麻土壤中分离到放线菌２９８株,经初筛和复筛得到产酶活性较高的一株放线菌５－７１。最适产酶条件是：果胶０．５％,葡萄糖０．５％,蛋白胨０．５％,酵母粉０．１％,Ｋ２ＨＰＯ４ ０．１％,ＫＨ２ＰＯ４ ０．１％,ＮａＣｌ０．１％,ＭｇＳＯ４·７Ｈ２Ｏ０．０５％,ｐＨ８．０。２５℃培养３天达产酶高峰。通气量对产酶影响不大。酶促反应最适条件是：ｐＨ９．６,４５℃,底物果胶浓度０．７５％,作用时间９０ｍｉ     

蛴螬肽提取物对铅致小鼠肾中毒的解毒保护作用机制研究

目的 本实验通过构建醋酸铅致小鼠肾中毒模型,探讨蛴螬肽提取物对小鼠的解毒保护作用机制,为机体铅性肾病的防治提供试验依据。方法 随机取小鼠分为对照组、模型组、阳性药组以及不同剂量蛴螬肽组(80、160、320 mg/kg),除对照组外所有组小鼠隔天腹腔注射醋酸铅20 mg/kg,连续15 d。此时对照组和模型组小鼠同时灌服生理盐水而阳性药组小鼠灌服二巯基丁二酸(DMSA 70 mg/kg)混悬液,蛴螬肽组小鼠灌服不同剂量蛴螬肽提取物,每天1次连续15 d,采用HE染色显微镜观察肾组织状态;检测肾功能指标(BUN、Cr)和肾组织中抗氧化酶水平(SOD、GSH-Px)及过氧化物(MDA)含量;RT-PCR、Western Blot技术检测分析Ⅱ相解毒酶(NQO1)、抗氧化酶(HO-1)和信号分子(Nrf2)基因和蛋白表达水平。结果 蛴螬肽组与模型组小鼠相比,体重增加但低于对照组,肾组织形态显著改善,血清中BUN、Cr水平显著降低(P<0.05),肾组织中抗氧化酶(SOD、GSH-Px)水平显著提高(P<0.05),MDA含量显著减少,Ⅱ相解毒酶基因(NQO1)、抗氧化酶(HO-1...     

重组嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila 4AK4中3-羟基丁酸3-羟基己酸共聚酯PHBHHx的发酵生产

3-羟基丁酸和3-羟基己酸共聚酯（PHBHHx）是一种性能优良的新型生物可降解材料,其机械和加工性能与3-羟基己酸（3HHx）在共聚物中的含量密切相关。在嗜水气单孢菌Aeromonas hydrophila 4AK4中引入了编码β酮基硫解酶 (β-ketothiolase)的phbA基因和编码乙酰乙酰辅酶A还原酶(AcetoacetylCoA reductase)的phbB基因,使重组菌增加了一条利用乙酰辅酶A合成3羟基丁酸-CoA的代谢途径,这使得利用非相关性碳源调控PHBHHx的单体组成比例成为可能。利用葡萄糖酸钠和月桂酸作为碳源,对重组Aeromonas hydrophila 4AK4进行了摇瓶培养及5 L发酵罐培养的研究。在摇瓶实验中,通过改变碳源中两种组分的比例,可以使A. hydrophila 4AK4合成的PHBHHx中的3HHx摩尔含量由原来的15%左右降低到3%～12 %,成功地实现了对PHBHHx单体组成的调控;当以月桂酸为唯一碳源时,在5 L发酵罐中,经过56 h的培养,获得了51.5 g/L的细胞干重（CDW）,其中62 %为PHBHHx,3HHx在PHBHHx中的摩尔含量为9.7 %;当以1:1的葡萄糖酸钠和月桂酸为碳源时,48 h的5 L发酵罐培养获得了32.8 g/L的CDW和52 %的PHBHHx含量,其中3HHx在PHBHHx中的摩尔含量为6.7 %。结果证明了该重组菌在大规模生产单体组成可控PHBHHx方面具有很大的应用潜力。     

乳链球菌肽高产菌株发酵条件的研究

对乳链球菌肽（Ｎｉｓｉｎ）高产菌株９７０６的发酵条件进行了研究,在Ｍ１７培养其中,效价远远低于ＣＭ１,正交实验法得出最适碳源、氨源、生长因子分别为蔗糖、鱼蛋白胨、酵母粉,并用正交实验优化了发酵培养基各组成的浓度。Ｎｉｓｉｎ的产生显示了初级代谢动力学特征,发酵的最适温度是３５℃,培养基最适初始ＰＨ为７．０－７．５,最适接种量５％－６％,振荡培养效价稍高于静止培养。     

去纤酶治疗脑血栓90例临床分析（摘要）

去纤酶治疗脑血栓９０例临床分析（摘要）辽宁阜新市第二人民医院神经内科刘新范,曹宝欣医务科王辉辽宁阜新市中心医院吴琼本文对资料完整的９０例脑血栓以去纤酶治疗。男６１例,女２９例,平均年龄５８．５岁。静点去纤酶一个疗程（少数者二个疗程）后,血液流变学各项...     

黄浦江浮游植物群落结构及其对水环境的指示作用

2004年4月至2005年2月共6次对黄浦江的浮游植物进行了调查,共设5个采样点。每2个月在各样点进行定性、定量采集浮游植物,同时测定了水体部分理化指标。采用生物指示法、香农(Shannon-Wiener)多样性指数法和Margalef多样性指数法等对水质进行了评价。结果表明,黄浦江在夏季为V类水,其它时期为IV类;所受的有机污染较为严重,属于中度-乙型(β-中污)阶段。其指示浮游植物为颗粒直链藻(Melosira granulata)及其变种和四尾栅藻(Scenedesmus quadricauda (Turp.) Br啨b.)等。