小蘖碱抑制游离脂肪酸诱导小鼠肝实质细胞脂肪变性

目的:探讨小蘖碱(Berberine)对游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)诱导的小鼠肝实质细胞脂肪变性的影响。方法:胶原酶灌注分离BALB/c小鼠原代肝实质细胞并体外培养。分对照组,高脂组,高脂加小蘖碱处理组。体外测定细胞内甘油三酯的含量。利用油红染色观察细胞的脂肪样变性。通过Western印迹法检测肝实质细胞内MAPK相关信号通路磷酸化的变化。实时定量PCR检测肝实质细胞中与脂肪化密切相关的mi R-122的表达和相关靶基因的表达改变。结果:与高脂组比较,小蘖碱处理组肝实质细胞内甘油三酯含量降低,脂肪颗粒减少,脂肪变性明显改善,并具有明显的剂量效应,小蘖碱能够抑制FFAs诱导的JNK通路磷酸化。Q-PCR结果表明小蘖碱能够促进肝实质细胞内mi R-122的表达,并降低脂肪化相关基因Dgat2的表达。结论:小蘖碱能够显著改善高脂诱发的肝脂肪变性,抑制JNK通路磷酸化,其机制可能同mi R-122通路相关。     

以Neprilysin蛋白酶为靶标的药物筛选模型的建立及应用

目的:建立以蛋白酶Neprilysin(NEP)为靶点的高通量药物筛选模型,应用该模型筛选抑制剂。方法:利用毕赤酵母表达系统。构建重组质粒p PICZα-A-NEP,表达载体通过与酵母菌X-33基因组染色体发生同源重组,将外源基因整合于染色体后实现目的蛋白的表达。应用荧光共振能量转移法(FRET)检测蛋白酶活性,优化反应条件,建立药物筛选体系,筛选抑制剂。结果:成功构建表达载体p PICZα-A-NEP;建立了以NEP为靶标的药物筛选模型,获得模型反应动力学参数Vmax=3.6μM/s,Kcat/Km=4.5×105M-1s-1,测定模型Z-因子为0.89,说明体系稳定可用于以NEP为靶标的药物的高通量筛选;并用该模型对天然产物组分库进行筛选,在0.5mg/ml的药物浓度下,得到抑制率较高的药物为4种,并测得半数抑制浓度IC50值,其中MDCNCL01000242的IC50值最低,为(8.31±0.03)μg/ml。结论:建立的药物筛选模型较为理想,适用于NEP抑制剂的筛选,可促进药物的研发。     

HgCl2对泥鳅精子运动的影响

为了检测不同浓度的HgCl2对泥鳅Misgurnus anguillicaudatus精子运动的影响,以泥鳅精子为实验材料,用含终浓度分别为0(对照)、1、5、10、15和20 μmoL/L的HgCl2待测液分别孵育0、2、4和6 h后激活,激活后立即在显微镜(Olympus IX81)下观察精子运动参数.为进一步探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的机制,用终浓度为20μmol/L的HgCl2保存液孵育泥鳅精子10 min,以含终浓度分别为0、0.1、1、10 mmol/L的2-巯基乙醇和20μmol/LHgCl2混合液为激活液激活.激活后立即在显微镜下观察精子运动,发现2-巯基乙醇町逆转HgCl2对泥鳅精子的抑制作用,为探讨HgCl2对泥鳅精子运动影响的可能机制提供参考.     

黄颡鱼HSC70基因及其组织表达分析

热休克蛋白70（HSP70）与生物体的抗胁迫能力密切相关。本文采用RACE (Rapid amplification of cDNA ends) 技术,从黄颡鱼Pelteobagrus fulvidraco克隆到一种组成型热休克蛋白（HSC70）基因及其cDNA。该cDNA全长2245bp,包括5′非编码区82bp,3′非编码区225bp,开放阅读框(ORF) 1938bp,编码645个氨基酸组成的蛋白质。黄颡鱼HSC70基因含有8个内含子,与人、鼠、虹鳟和花斑溪鳉的HSC70基因内含子数目相同,位置相似。其中,最长内含子（873bp）位于5′端非编码区,其余内含子（长度在80－251bp之间不等）均在编码区以内。黄颡鱼HSC70基因编码的氨基酸序列与南方鲶的相似度最高,达96.13%,与欧洲银鲫和团头鲂的相似度分别为94.45%和94.14%。RT-PCR检测显示,正常情况下黄颡鱼HSC70在血细胞、心脏、肝、头肾、脾、鳃、肌肉和脑中均有表达,但表达量在鳃中最高,肌肉中最低;统计结果显示,热激后HSC70在血细胞、肝、头肾和脑中的表达量显著上升(p<0.05),而在其余组织中热激前后的表达差异不显著(p>0.05)。     

急性期蛋白的研究进展

急性期蛋白(如珠蛋白、血清淀粉样蛋白A、C-反应蛋白)是指机体受感染、创伤、炎症等应激原刺激下所产生变化的蛋白,又叫急性期反应物或应激敏感蛋白质.近年来研究表明:血清中急性期蛋白的浓度变化可为疾病的诊断、预防提供可靠的依据.已应用到被屠宰动物的疾病控制及目前亚临床动物疾病导致的畜禽出生率低等问题的监控上.本文就急性期蛋白的研究进展、临床应用及将来的发展趋势做一综述,为医学临床、科研、肉品安全等诸多方面的研究提供新的思路.     

杨树叶锈病研究

松杨栅锈菌（Melampsora larici-populina）导致的杨树叶锈病是杨树病害中分布最广、危害最大的一种病害,它造成杨树林的材积损失和材质下降,严重制约着杨树商品林和生态林的发展。该文从病原菌的分布和寄主种类、病原菌生理分化、寄主抗锈性及分子标记、防治措施等几方面介绍了杨树叶锈病的研究。     

应用无创通气治疗56例COPD患者呼吸衰竭的临床分析

目的探讨无创通气在慢性阻塞性肺疾病（COPD）呼吸衰竭的应用价值。方法将急性加重期COPD患者56例分为无创通气组26例和有创通气组30例,观察患者上机前、上机后30min、上机后2天的血气变化,机械通气天数,住院天数。费用及并发感染等指标。结果有创通气组上机30min后PaO2升高、PaCO2下降、pH的恢复幅度明显快于无创通气组（P〈0．01）.但2天后两组PaO2、PaCO2、pH差异无显著性（P〉0．05）。无创通气组机械通气天数、住院天数、费用以及院内感染的发病率明显低于有创通气组（P〈0．01）。无创通气组明显嗜睡者12例．占27．3％,其中10例经无创通气治疗后清醒,无需有创通气。结论无创通气治疗急性加重期COPD患者呼吸衰竭是一种方便有效的方法。     

“龙麦15”2＋12与5＋10亚基近等基因系面粉品质差异的研究

通过对小麦栽培品种龙麦１５中的同形小种进行ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ａ－ＰＡＧＥ的分析,在国内首次获得了一对Ｇｌｕ－Ｄ１位点高分子量麦谷蛋白亚基分别为２＋１２和５＋１０的近等基因系。对该近等基因系面粉品质的分析表明,带有５＋１０亚基的龙麦１５比事有２＋１２亚基的龙麦１５的Ｚｅｌｅｎｙ沉淀值高１２％,沉淀值／湿面筋的比值由１．０３提高到１．３２。该实验结果证明,５＋１０亚基对面粉品质贡献确实优于２＋１２亚基     

早寒武世节头虫(Arthricocephalus)属

节头虫一属的标本是M.Chauveau采自贵州铜仁县以北的页岩地层内,其时代不详。采集者把这些化石带回法国交Bergeron(1899)研究。Bergeron认为这一三叶虫是一新属,并把模式种以采集者的名字来命名,并认为这是一个古老的三叶虫,可能属于寒武纪。寒武纪地层在贵州东北部分布很广,寒武系整合于震旦系之上、奥陶系之下,出露完整(插图1)。这一地区的寒武系经林焕令、王俊     

厄贝沙坦对链脲佐菌素和过氧化氢诱导的β细胞氧化损伤保护作用

目的 探讨厄贝沙坦对链脲佐菌素(STZ)和过氧化氢(H₂O₂)诱导的β细胞损伤影响。方法 (1)将NIT-1细胞分为对照组及1、2、5 mmol/L STZ和300、500μmol/L H₂O₂组,处理30 min后,采用Hoechst 33342法检测各组细胞凋亡形态变化,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-qPCR检测Caspase3 mRNA水平。(2)将NIT-1细胞分为STZ及0.001、0.01、0.1 mmol/L厄贝沙坦组,作用24、48和72 h。(3)将NIT-1细胞分为H₂O₂及0.001、0.01、0.1 mmol/L厄贝沙坦组,作用24、48和72 h。采用流式细胞术检测细胞凋亡率和活性氧(ROS)含量,RT-qPCR检测血管紧张素II型1受体(AT1R)mRNA表达。结果 Hoechst 33342染色显示,5 mmol/L STZ组相较于1、2 mmol/L STZ组,500μmol/L H₂O_2<...