草莓中诺如病毒不同洗脱和富集方法的评估

评估一种快速和敏感富集草莓中诺如病毒的方法,为病毒性食源性疾病的防控提供支持。以鼠诺如病毒-1(MNV-1)为模式病毒,考察Tralk洗脱液、TGBE洗脱液和NaOH洗脱液对MNV-1的洗脱效果,检测5%、10%和15%PEG6000/0.3M NaCl对MNV-1的富集效果,评估优化后方法对草莓中诺如病毒的富集效果和超滤二次浓缩对诺如病毒富集效果影响。结果表明TGBE缓冲液洗脱效果优于Tralk洗脱液和NaOH洗脱液;10%PEG6000/0.3M NaCl与15%PEG6000/0.3M NaCl对MNV-1的富集效果相同,且二者的富集效果均高于5%PEG6000/0.3M NaCl;该优化方法可在7h内完成草莓中诺如病毒的富集,诺如病毒的回收率最高可达44.04%,超滤二次浓缩后,诺如病毒的检测限达到102基因拷贝数/10g草莓。     

中药复方“生发灵”药效学初步研究

目的：研究中药复方”生发灵215”的两种提取方法和生发作用。方法：参考该中药复方的传统临床应用,考察了该复方的两种提取方法：一是用油提取直接涂抹的传统方法,一是用醇提法并制成软膏剂。然后用两种提取物对试验兔进行皮肤刺激性实验和促毛发生长作用的初步探讨。结果：软膏剂在外观、手感以及使用舒适度方面均大大优于传统的油提取物。皮肤刺激实验表明油提物对完整皮肤和破损皮肤均有刺激性,而通过醇提物制备的软膏制剂作用温和,没有发现明显的刺激性。毛发生长实验表明,醇提物制备的软膏制剂在促毛发生长效果方面和油提物没有明显差异。结论：醇提物制成的软膏荆具有良好的临床应用价值。     

脑啡肽-干扰素融合蛋白具有外周镇痛作用

研究干扰素-脑啡肽融合蛋白的外周镇痛作用和机制.对小鼠进行热损伤诱导,采用经典热板法测定小鼠后肢脚趾外周涂抹干扰素、脑啡肽融合蛋白的痛阈变化,并用阿片选择性拮抗剂纳曲酮、纳络酮及干扰素单抗进行阻断试验.与干扰素母体相比,融合蛋白具有较强的外周镇痛作用,这种作用可被纳络酮、干扰素单抗逆转或阻断.融合蛋白具有较强镇痛功能,可作为外用镇痛候选药物,其作用机理与干扰素受体、阿片μ受体有关.     

伪狂犬病病毒鄂A株TK－／gG－／LacZ＋突变株的构建

为了以国内地方分离株鄂A株为亲本构建伪狂犬病病毒双基因缺失株,采用外切酶Ⅲ和绿豆核酸酶酶切,构建了缺失主要毒力基因TK基因部分编码区的重组质粒pSTK1-4,进一步改造成为转移质粒pUCPB4。用HindⅢ将质粒pUCPB4线性化,然后与用EcoRI消化的伪狂犬病病毒鄂A株TK^-/LacZ^ 突变株基因组DNA共转染PK－15细胞,等完全病变后,收毒作空斑试验,PCR筛选TK缺失的重组病毒。重组病毒空斑纯化3次,随机挑取空斑进行PCR扩增,证实所获得的病毒为均一的无TK^-/LacZ^ 突变株污染的TK缺失的重组病毒,分别以TK缺失株病毒与鄂A野毒株为模板对TK基因进行PCR扩增,扩增产物经酶切分析和测序后发现：TK缺失重组病毒的TK基因缺失了205个碱基,XhoⅠ和SalⅠ位点消失,SmaⅠ酶切片段发生变化,两种病毒在PK－15细胞上形成空斑的大小和增殖 滴度无明显的差别。进一步提取TK缺失突变株基因组DNA,与含gG-LacZ的转移质粒pUSKZ通过磷酸钙法共转染PK－15细胞,待完全病变后,在X-gal存在下筛选蓝斑,将桃取的蓝斑纯化3次后,对纯化的重组病毒进行TK、LacZ扩增,结果既能扩增出较以鄂A野毒株为模板扩增的要小的TK基因片段,同时又能扩增出LacZ基因,证实所得到的重组病毒为TK^-/gG^-/LacZ^ 突变株。此双缺失突变株的构建成功,为在我国最终根除伪狂犬病提供了有用的工具。     

人角质化细胞生长因子-2基因的克隆、表达及产物的纯化、鉴定

用高表达菌株BL21codon plus compentent cells表达重组人角质化细胞生长因子(Hkgf-2)蛋白并初步纯化和检测其活性。通过RTPCR从流产胎儿肺组织中钓取hKGF-2cDNA,将其克隆入pBV220载体质粒。在大肠杆菌BL-21codon plus compent cells中表达hKGF-2蛋白。采用亲和层析和离子交换层析分离纯化,以细胞增殖实验测定表达蛋白的生物活性。结果显示,hKGF-2蛋白在BL21中得到高效表达;hKGF-2蛋白能刺激NIH3T3细胞的增殖,具有显著的促有丝分裂活性。     

妊娠期糖尿病患者血清NRG4、FGF-23、PGRN水平及其临床意义

摘要 目的：探讨妊娠期糖尿病患者血清神经调节蛋白4(NRG4)、成纤维细胞生长因子-23(FGF-23)、前颗粒体蛋白(PGRN)水平及其临床意义。方法：选择2018年4月至2019年11月我院诊治的90例妊娠期糖尿病患者作为糖尿病组,选择同期在我院进行健康体检的90名健康孕妇作为对照组。检测两组血清NRG4、FGF-23、PGRN水平,血脂指标[高密度脂蛋白（HDL）、总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白（LDL）]水平,肝功能指标[谷草转氨酶（AST）、谷丙转氨酶(ALT)]水平,血糖和胰岛素指标[空腹血糖（FPG）、空腹胰岛素(FINS)]水平,并计算抗胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、胰岛素敏感性指数（ISI）和胰岛?茁细胞功能指数(HOMA-β)。分析各临床指标间的关系。结果：与对照组相比,糖尿病组体质量指数（BMI）、TG、TC、FPG、FINS、HOMA-IR、NRG4、FGF-23、PGRN明显升高（P<0.05）,ISI和HOMA-β明显下降（P<0.05）。血清NRG4、FGF-23、PGRN与ISI和HOMA-β均呈负相关（P<0.05）,与BMI、TG、TC、FPG、FINS、HOMA-IR均呈正相关（P<0.05）。TG与NRG4表达联系密切（β=0.007,P<0.05）,ISI和HOMA-IR与FGF-23表达联系密切（β=-6.674、0.048,P<0.05）,FPG和TC与PGRN表达联系密切（β=22.308、0.507,P<0.05）。结论：妊娠期糖尿病患者血清NRG4、FGF-23、PGRN水平异常升高,并参与妊娠期糖尿病患者的糖脂代谢和胰岛素抵抗,检测其水平有助于评估妊娠期糖尿病的糖脂代谢异常情况。     

荞麦及其野生种遗传多样性分析

荞麦起源于我国西南地区,该地区分布有大量荞麦地方品种和野生近缘种。本研究利用SSR分子标记,对从我国西南地区收集的81份荞麦及其野生资源进行遗传多样性分析。结果显示,利用19对SSR引物共检测出84个等位基因,每对SSR引物平均扩增出4.421个等位基因,19对SSR引物的平均Shannon's信息指数为0.985,平均PIC为0.478。81份荞麦及其野生资源的相似系数范围为0.500~1.000,分析发现大粒组荞麦种(甜荞及其近缘种、苦荞及小米荞、金荞)与小粒组硬枝万年荞亲缘关系比较近。通过聚类分析在遗传相似系数为0.732时,可将81份荞麦种质分为4个类群,第Ⅰ类由小粒组齿翅野荞、细柄野荞、小野荞麦、疏穗小野荞麦和硬枝万年荞组成;第Ⅱ类由甜荞和甜荞近缘种组成;第Ⅲ类都是由金荞组成;第Ⅳ类是由苦荞和小米荞组成。在遗传系数为0.920时,小粒组荞麦种可以明显区分出疏穗小野荞麦、硬枝万年荞、齿翅野荞及其细柄野荞。研究表明,19对SSR引物多态性较高,能较好反应荞麦及其野生种质的遗传多样性,本研究的结果为荞麦属种之间的亲缘关系分析和荞麦起源进化研究提供科学依据。     

裸燕麦EMS突变体库筛选与分析

燕麦是重要的粮饲兼用作物,构建燕麦EMS突变体库对燕麦功能基因组学研究和遗传改良有重要意义。本试验利用化学诱变剂甲基磺酸乙酯(EMS,ethyl methane sulfonate)处理燕麦品种花早2号,获得了4083株M1材料;对其中2000个单株种植了M2株行,进行全生育期调查,鉴定其表型变化;对2份黄化苗突变材料种植了M3家系,进行相关突变性状的稳定性验证。结果表明,燕麦经EMS处理后代变异巨大,在M2发现表型突变材料196份,变异率为9.8%,变异类型非常丰富,包括幼苗习性、叶片性状、分蘖、株高、穗部形态及成熟期等突变株系。M3证实突变的黄化苗特性可以稳定遗传。本研究建立了燕麦EMS诱变体系,获得的燕麦变异类型丰富,为燕麦功能基因组学研究和燕麦遗传改良奠定了材料基础。     

轮状病毒与人类组织血型抗原相关性的研究进展

轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的重要病原体,该病毒颗粒的VP4在病毒颗粒吸附和侵入宿主细胞过程中发挥着重要作用。最近研究发现VP4刺突蛋白远端的VP8*与人类组织血型抗原结合,是轮状病毒新的受体,并发表在Nature,Journal of Virology等杂志。本文对人类组织血型抗原与轮状病毒之间的研究进展进行简要概述,总结已有的研究结果,阐明组织血型抗原与轮状病毒研究的重要意义。     

伊曲康唑治疗胃部真菌感染1例

患者因患陈旧性心肌梗死、脑梗塞,长期服药致胃黏膜损伤,同时合并糖尿病,引发胃部真菌感染,经口服伊曲康唑200mg,2次／d,治疗3周后痊愈。