磷酸化酶mRNA在水稻雌蕊中表达的时空动态

利用RNA原位杂交技术, 对水稻受精前后雌蕊组织切片进行磷酸化酶基因表达的定位。结果显示, 磷酸化酶mRNA在柱头、花柱、子房壁以及维管束中大量表达, 而胚珠中除合点部位外表达很弱。受精前后的胚囊中各细胞磷酸化酶mRNA表达也很弱, 并且没有明显的时空变化。在积累淀粉的胚乳细胞中磷酸化酶mRNA大量分布。原胚中的磷酸化酶mRNA表达较弱, 到分化胚积累过渡性淀粉时才显著增加。本文首次对磷酸化酶mRNA在植物雌性器官发育过程中的时空分布动态作了初步研究。 Abstract:Phosphorylase gene expression was localized in tissue sections of rice pistils before and after fertilization byin situRNA hybridization. Phosphorylase mRNA was substantially expressed in the stigma, style, ovary wall and vascular bundle, but weakly in ovular tissues except chalazal portion. It was weakly expressed and did not show temporal and spatial changes in embryo sacs before and after fertilization. A great quantity of phosphorylase mRNA was distributed in endosperm cells accumulating starch grains. Phosphorylase mRNA was less in proembryos, but significantly increased in differentiation embryos accumulating transition starch. This report is, for the first time, a tentative investigation on the temporal and spatial expression patterns of phosphorylase mRNA in plant female organ development.     

温敏失绿突变体水稻1103s在失绿过程中全叶蛋白的变化

从全叶蛋白比较入手,研究了温敏失绿突变体水稻（ＯｒｙｚａｓａｔｉｖａＬ．）１１０３ｓ失绿前、后的变化,并结合该突变体在不同温度处理和遗传背景下叶片全蛋白的变化特征分析了变温诱导与失绿的关系。结果表明,诱导后１１０３ｓ的叶片上,失绿部分的组织中没有出现冷胁迫的迹象,其Ｒｕｂｉｓｃｏ的大、小亚基表现正常。一个５１ｋＤ（ＰＩ＝４．５）的特异蛋白Ｐ１在失绿部分的组织中消失,而在叶片绿色部分的组织中检测到了Ｐ１蛋白,不过量有所减少,说明在失绿叶片上突变基因的表达存在组织差异性。Ｐ１蛋白在常温下生长的１１０３ｓ叶片中为一大量蛋白,此蛋白在“８９０２ｓ”、“窄叶青８号”等品种中均可检测到;并且持续低温处理的１１０３ｓ植株和１１０３ｓ×８９０２ｓ杂交一代的叶片中Ｐ１蛋白的表达未受影响。由此推测,Ｐ１蛋白是水稻叶片中的一个与叶绿素的代谢过程密切相关的重要功能蛋白。在１１０３ｓ中,Ｐ１蛋白的变化不是温度诱导的直接后果,而是受突变所导致的温敏过程调控的下游变化。     

利用degQ基因提高枯草芽孢杆菌纤溶酶表达*

从枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis)中通过PCR扩增得到degQ基因,将其克隆到含有枯草杆菌纤溶酶基因的蔗糖诱导表达载体pUBS中,并转化至B.subtillisDB403受体菌,得到基因工程菌DB403(pUBSD)。通过发酵表达证实degQ基因能增强枯草杆菌纤溶酶的表达,酶活提高了2.2倍。同时还对不同种类的糖、不同浓度蔗糖、不同诱导时间等发酵条件进行优化和比较研究。     

抗病品种中小麦条锈菌细胞的超微结构变化过程

本文就寄主抗病性表达过程中,小麦条锈菌细胞的超微结构变化进行了系统地观察研究。结果表明:胞间菌丝的细胞壁染色逐渐加深,厚度加宽,结构疏松,形成小空洞,并逐渐解体;细胞质逐渐凝聚、脂肪粒的数量增多、有黑色颗粒状沉积物积累;细胞质中小囊泡数目增多并逐渐融合成大液泡,线粒体数目增多,并逐渐肿胀和解体。次生吸器畸形,初生吸器体呈圆球形。吸器壁加厚,染色加深;在吸器的中央,细胞质逐渐分解而形成空泡;线粒体数目增多,并逐渐肿胀和解体;吸器外质膜呈皱褶状,吸器外间质加宽,其中有大量的丝状或颗粒状内含物形成;吸器形态结构的变化均早于其胞间菌丝。     

利用CRISPR/Cas9系统构建FGF21基因敲除小鼠模型

成纤维细胞生长因子(fibroblast growth factors, FGFs)是细胞间的多功能信号分子,调节生物体的多种生理功能。FGF21作为一种重要的调控因子,对毛囊发育及生长周期具有重要作用。为研究FGF21基因对毛囊发育及生长周期的影响及作用机制,本研究通过构建靶向敲除FGF21基因的载体,体外将Cas9 mRNA和gRNA显微注射到FVB小鼠受精卵中,在小鼠FGF21基因的第1外显子上造成移码突变,从而获得FGF21基因敲除(knock out, KO)小鼠。通过测序鉴定F₀代小鼠基因型,共获得3只FGF21等位基因敲除小鼠(Fgf21 ^-/-);qRT-PCR和Western blotting结果表明,在Fgf21 ^-/-小鼠中未检测到FGF21 mRNA表达和FGF21蛋白表达;经脱毛再生及皮肤组织H&E染色发现,与野生型(wild type, WT)小鼠相比,Fgf21 ^-/-小鼠体重降低、器官组织未出现异常变化、毛发生长速度减慢、毛囊的直径和毛发的密度均减小。本研究利用CRISPR/Cas9技术成功构建了Fgf21 ^-/-小鼠模型,为后续研究FGF21基因在毛囊发育及生长周期中的功能提供了更好的动物模型。     

迷你玫瑰组织培养中细菌污染的防止

迷你玫瑰组织快繁体系连续继代过程中,插入培养基的试管苗切口处有云雾状污染菌生长,其中2种为革兰氏阴性杆菌,1种为革兰氏阳性杆菌.培养基中加入氨苄青霉素(50～150 mg·L-1)抑制污染菌生长,不影响试管苗不定芽分化率,50 mg·L-1的氨苄青霉素明显促进染菌苗的生根.加入硫酸丁胺卡那霉素(25～100mg·L-1)有杀灭污染菌的作用,但对试管苗则有不同程度的毒害(叶片、叶柄和茎段出现黄化现象),对不定芽分化和生根也有明显的抑制.     

木霉肽类代谢产物对豇豆土著根瘤菌遗传性状的影响

利用RAPD与ISSR分子标记检测手段,分析了哈茨木霉T2-16肽类代谢产物处理豇豆土著根瘤菌,对其遗传性状的影响,同时,比较了RAPD和ISSR两种不同分子标记在检测根瘤菌种间的遗传相似性以及遗传变异性的分辨力.实验中,从100条引物中筛选到具有多态性的ISSR引物5条,从80条引物中筛选到具有多态性的RAPD引物6条,用5条ISSR引物扩增出54条带,多态性条带比率为75.93 %;6条RAPD引物扩增出61条带,多态性条带比率为68.85 %.两种分子标记均能揭示出处理前后根瘤菌间的遗传差异,但ISSR标记比RAPD标记可检测到更大的遗传变异.根据两种标记的结果,对供试的根瘤菌进行聚类分析,结果表明,土著根瘤菌经木霉肽类代谢产物处理后,与出发菌株相比,表现出一定程度的遗传分化和遗传差异性.     

森林与空旷地空气温湿度及土壤温度的长期对比研究

森林对温湿度的影响是其生态功能的基础,为了探讨森林的这种小气候效应,本文采用小气候对比观测的方法,根据2005 -2007年观测资料,对长白山阔叶红松林与附近空旷地温度、湿度等小气候要素进行了差异性研究.结果表明,林内近地表层空气温度白天低于林外空旷地,晚间高于林外空旷地,因而具有较低的日较差.非生长季二者的月平均值差异不显著,但生长季差异明显,月平均气温最高差值出现季节与森林叶面积指数最大值出现时间一致.气温年较差的平均值林内小于空旷地,差值可达6.3℃.年均森林与空旷地土壤温度全年均表现出明显差异,以0℃为界,0℃以上,林内土壤温度低于空旷地,0℃以下高于空旷地,其中2005年1月5 cm深处土壤温度差值达到了5.3℃.空气相对湿度生长季差异较大,其中以7、8月份差异最为明显,2006年7月差值最大,达7.0％.     

浙皖粗筒苣苔的组织培养和快速繁殖

1植物名称浙皖粗筒苣苔（Briggsia chienii Chun）。2材料类别种子及无菌苗叶片。3培养条件MS为基本培养基。诱导种子发芽培养基：（1）MS＋6-BA 1.0 mg·L-（-1）（单位下同）＋NAA 0.5;诱导叶片分化培养基：（2）MS＋6-BA 2.0＋NAA 0.5;增殖继代培养基：同（1）;壮苗培养基：（3）MS＋6-BA0.1＋NAA 0.05;生根培养基：（4）1/2MS＋0.1%活性炭。以上培养基均含30 g·L-（-1）蔗糖和7.0 g·L-（-1）琼脂,pH 5.8。培养温度为（25±2）℃;