应用基因芯片筛选伊马替尼和尼洛替尼处理K562 细胞表达差异基因

目的:探讨两种酪氨酸激酶抑制剂(TKIs)处理K562细胞的基因表达谱变化,为认识慢性粒细胞白血病(CML)的发病机制、耐药机制提供新的思路,同时也为治疗寻找潜在重要靶标分子。方法:利用GEO数据库下载慢性粒细胞细胞系(K562)基因表达芯片数据,通过差异基因的筛选,趋势分析、GO分析,信号通路分析,最后获得的重要差异表达核心基因,并建立相互作用网络。结果:获得显著表达差异基因1000,通过趋势分析、功能富集分析及信号通路分析提示主要涉及到代谢途径、细胞凋亡、癌症的途径、细胞周期、p53信号通路。相互作用网络分析及同表达相互作用网络分析,得到重要的核心节点基因:AK2、ADSL、PKLR、PKM、SHMT2、ATIC、LDHA、ENO1、CTH、GOT1;YARS、CYP3A5、CTH、GYPA、ALAS2、MTHFD2、BLVRB、GUK1、CTSH、LMO2。结论:利用生物信息学的方法,分析慢性粒细胞白血病细胞基因芯片得到参与不同TKIs处理K562细胞的重要的细胞功能及信号通路主要涉及代谢通路及增殖凋亡信号途径,并且寻找到核心节点基因,为认识K562的耐药机制及治疗靶点提供新的思路。     

辣椒CaWRKY8基因克隆及胁迫下的表达分析

为了揭示辣椒WRKY基因功能,以辣椒PI201234为实验材料,克隆得到WRKY基因全长1 647bp的cDNA序列,命名为CaWRKY8。生物信息学分析表明,该基因含有一个1 647bp完整开放阅读框(ORF),编码548个氨基酸残基。氨基酸序列分析显示,CaWRKY8编码的蛋白含有2个WRKY结构域,属于Group I。氨基酸序列比对结果表明,CaWRKY8与辣椒WRKY25、马铃薯WRKY、番茄基因组中预测的WRKY26、烟草基因组中预测的WRKY33和猕猴桃WRKY的氨基酸序列之间均具有高度的保守性。实时荧光定量分析表明,CaWRKY8受盐、高温、干旱和辣椒疫霉菌诱导表达;其中CaWRKY8的表达量在盐和干旱处理下3h达到峰值,分别是对照的2.38倍和121.10倍,在高温和疫霉菌处理下12h达到峰值,分别是对照的6.12和6.81倍。以上研究结果表明,CaWRKY8基因在辣椒响应胁迫进程中发挥着重要作用。     

两株致病性哈维氏弧菌胞外产物的特性分析

采用硫酸铵分级盐析从哈维氏弧菌EcGY020401株和SpGY020601株培养物中提取其胞外产物,并对胞外产物的一些特性进行了分析。结果表明,两株哈维氏弧菌的胞外产物均具有较强的毒力,对鲫鱼的半致死剂量LJ50为7．1g蛋白／g鱼体重;均具有淀粉酶、酪蛋白酶、脂肪酶活性,而无脲酶和明胶酶活性;除EcGY020401株胞外产物对斜带石斑（Epinephelus coioides）红细胞有较强溶血作用外,对小鼠、鲫、人O型血等红细胞的溶血性都较弱或无;对草鱼吻端成纤维细胞（PSF）都具有细胞毒性。此外,经聚丙烯酰胺葡聚糖凝胶柱层析和离子交换柱层析,对SpGY020601株的胞外产物中蛋白酶进行了初步提纯,SDS-PAGE分析得一分子量约为38Kda的蛋白酶,该蛋白酶对鲫鱼有致死毒性,半致死剂量为3．3g蛋白／g鱼体重。     

早期原发性高血压患者血管内皮功能与颈动脉弹性功能、颈动脉内-中膜厚度的相关性研究

目的:研究早期原发性高血压患者血管内皮功能与颈动脉弹性功能、颈动脉内-中膜厚度(IMT)的相关性。方法:选取2017年4月至2018年5月福建医科大学附属宁德市医院收治的早期原发性高血压患者80例为研究对象,记为研究组,另选取同期于我院进行体检的健康志愿者69例记为对照组,采用彩色超声诊断仪分别检测并比较两组受试者血管内皮功能、颈动脉弹性功能和IMT,并采用Pearson相关性分析早期原发性高血压患者血管内皮功能与颈动脉弹性功能参数和颈动脉IMT的相关性。结果:与对照组比较,研究组基础内径明显增厚,内皮依赖性血管扩张值(FMD)明显降低(P0.05),而两组内皮非依赖性血管扩张值(NMD)比较差异无统计学意义(P0.05)。与对照组比较,研究组顺应性(AC)均明显降低,而硬度指数、压力应变弹性系数(Ep)、IMT明显升高,差异有统计学意义(P0.05)。经Pearson相关性分析显示,早期原发性高血压患者FMD与AC呈正相关,与硬度指数、Ep、IMT呈负相关(P0.05),而NMD与硬度指数、Ep、AC、IMT无相关性(P0.05)。结论:早期原发性高血压患者血管内皮功能明显受损、颈动脉弹性功能下降、IMT增厚,同时,患者血管内皮功能受损与颈动脉弹性功能下降、IMT增厚密切相关。     

巴西橡胶树HbCRK1的克隆及表达分析

钙离子依赖蛋白激酶相关激酶(CDPK-related kinase, CRK)在植物对生物和非生物胁迫抗性中具有重要作用。为了揭示CRK家族成员在橡胶树抗逆机制中的作用,本研究从巴西橡胶树品种热研7-33-97叶片中克隆了一个CRK基因,其推导氨基酸含有特征性STKc_CAMK结构域,命名为HbCRK1。该基因在树皮、花、叶片和胶乳中均有表达,在叶片中的表达量最高;在干旱、机械伤害、白粉菌侵染和激素处理下均显著上调。本研究结果表明HbCRK1受逆境反应诱导,参与橡胶树抗逆响应的生理和分子机制,为揭示HbCRK1基因的功能和橡胶树抗逆响应的研究提供理论指导。     

毛竹bHLH转录因子的鉴定及其在干旱和盐胁迫条件下的表达分析北大核心CSCD

以毛竹( Phyllostachys edulis (Carr.) Lehaie)为材料,利用生物信息学方法,在基因组水平上对其bHLH基因家族成员进行鉴定和分析,并对不同组织中该基因的表达模式以及部分基因在干旱和高盐胁迫条件下的表达情况进行研究。结果显示:在毛竹中共鉴定出153个具有完整保守结构域的bHLH基因家族成员( PebHLH001 ~ PebHLH153 ),这些基因内含子数量为0 ~ 14,其中137个基因的启动子均含有与干旱、盐胁迫相关的顺式作用元件;PebHLHs 编码的蛋白长度为134 ~ 1401 aa;bHLH家族成员的系统进化分析结果表明,153个PebHLHs可被分为17个亚类,其中C亚类的成员数量最多,为42个;基于转录组数据的表达谱分析结果发现,有151个 PebHLHs 在毛竹不同组织和不同生长发育时期有不同程度的表达量;实时荧光定量PCR实验结果显示,在干旱和盐胁迫处理后,分别有14和13个 PebHLHs 基因的表达量上调,分别有2和3个表达量下调,但表达模式存在一定差异,说明他们在应答干旱和盐胁迫过程中可能发挥不同的作用。     

不同倍性西瓜基因组DNA甲基化水平与模式的MSAP分析

DNA甲基化是表观遗传修饰的主要方式之一,在基因表达调控中发挥重要作用。本研究以不同倍性（2x、3x、4x）西瓜为试材,采用基于DNA甲基化敏感酶的扩增多态性分析（Methylation-Sensitive Ampliftcation Polymorphism,MSAP）方法,在全基因组水平上探究西瓜同源多倍化过程中DNA序列中CCGG位点的甲基化水平及模式变化特征。研究中选用23对选扩引物,共检测到1883个基因位点。二倍体、三倍体、四倍体中检测到的位点数分别为647、655和581;其中发生甲基化的位点数分别为181、150和159。相应的扩增总甲基化率分别为28．0％、22．9％和27．4％：全甲基化位点数分别为121、80和82,相应的全甲基化率分别为18．7％、12．2％和14．1％。进一步对不同倍性西瓜DNA甲基化模式的变化特征进行分析,结果显示：四倍体西瓜与二倍体西瓜相比有超过半数的位点（54．4％）DNA甲基化模式发生了变化,其与三倍体西瓜相比也有近一半的位点（45．4％）DNA甲基化模式发生了变化,并且变化趋势都以四倍体西瓜甲基化程度升高为主：而三倍体西瓜与二倍体西瓜相比．虽然也有41．6％的位点DNA甲基化模式发生了改变,但变化趋势以三倍体西瓜甲基化程度降低略占优势：与之相似,三倍体西瓜与四倍体相比较。甲基化的变化趋势也是以三倍体西瓜甲基化程度降低为主。以上结果表明：不同倍性西瓜中DNA甲基化事件虽均有发生．但不论是从总甲基化率还是全甲基化率来看,DNA甲基化水平与倍性高低关系不大．三倍体西瓜表现出较为显著的低甲基化水平特征。DNA甲基化模式的分析也表明。与二倍体及四倍体西瓜相比．三倍体西瓜DNA甲基化模式的调整主要以去甲基化为主。显示出三倍体西瓜基因组独特的DNA甲基化特征。本研究为进一步从表观遗传学的角度探讨西瓜的三倍体优?     

膀胱再生技术改进及并发症预防和处理的临床分析(附161例报告)

目的:改进膀胱再生方法,预防并发症产生,提高膀胱再生临床治疗效果.方法:膀胱全切除行膀胱再生术66例,大部切除膀胱再生术70例,结核性挛缩膀胱再生扩大术25例.结果:不全随访膀胱全切除者其中1例无瘤生存16年,另1例现已无瘤生存10年.膀胱大部切除无瘤生存10年以上者12例.结核性挛缩膀胱再生扩大术6例死于其它疾病,19例生存.结论:膀胱再生术,可应用于治疗膀胱各种疾病.对膀胱肿瘤切除部位和范围不受限,对病人打击小,年老体弱者可接受.     

野桂花化学成分研究

从野桂花（Osmanthus yunnanensis）地上部分95％乙醇提取物中首次分离得到18个化合物,应用波谱方法及与已知品对照的手段鉴定它们为：E-阿魏酸二十烷基酯（1）、β-谷甾醇（2）、羽扇豆醇（3）、齐墩果酸（4）、7-oxo-β—sitosterol（5）、乙酰齐墩果酸（6）、（6＇-O－palmitoyl）－sitosterol-3-O-β—D—glucoside（7）、rotundioic acid（8）、地榆糖甙II（9）、3β-hydroxy－27-p－（E）－eoumaroyloxyolean－12－en-28－oicacid（10）、3β—laydroxy-27-p－（Z）－coumaroyloxy－olean－12－en-28-oicacid（11）、hycandinic acid ester（12）、绿原酸丁酯（13）、4,5-二咖啡酰奎尼酸丁酯（14）、28-O-β-D—glueopyranosyl rottmdioic acid（16）以及三个半萜类化合物：4,5-dihydroxyprenyl caffeate（15）、4-（6-O-caffeoyl -β-D—glucopyranosyloxy）-5-hydroxyprenyl caffeate（17）、4-β-D—glucopyranosyloxy5-hydroxyprenyl caffeate（18）。     

半抗原与载体的最佳分子结合比

中国鲎血蓝蛋白、破伤风类毒素、白喉类毒素和牛血清白蛋白与对氧磷偶合为人工抗原时最佳分子结合比分别为300,21-35,19和11mol/mol(10,32-53,30和17mol/15~5daltons)。结合比达6—10mol/10~5daltons以上,都有一定的免疫效果。