基因工程蛋白下游纯化技术研究进展

基因工程蛋白下游纯化技术研究进展范清林桂向东吴清发魏跃武宋礼华（安徽省生物研究所,合肥２３００３１）自从１９７２年首次发现核酸内切酶,并在同年完成了世界上第一次成功的ＤＮＡ体外重组实验以来,基因工程技术在二十多年的历程中经历了飞速的发展。我国在八十年...     

猪肾酰化酶作用机制的研究——Ⅰ.金属离子与酶活力的关系

(1)大多数金属絡合剂除EDTA和迭氮化鈉外都能抑制酰化酶的活力,在可逆抑制情况下加入不同金属离子能部分或全部恢复酶活力。在固定絡合剂的浓度下酶活力的恢复程度与所加的金属离子浓度有关,每一金属离子都有一最适浓度。从以上結果推测酰化酶中的金属离子可能是Co~( )或Mn~( )离子。(2)在温和的条件下并有底物存在时,邻二氮菲和巯基乙酸对酰化酶的抑制是属于竞爭性,K_i值分別为1.28×10~(-4)M和1.74×10~(-3)M;一分子酶是与二分子抑制剂相結合。推測酰化酶可能是以二聚体形式存在。当抑制剂的浓度增大或使反应温度升高时都将引起不可逆的抑制。若酶与抑制剂預先一起保温亦得到类似的結果。(3)用电透析或在不同pH緩冲液下透析以除去酰化酶中的金属离子,都将导致酶的不可逆失活,因此酶中金属离子除起与底物結合的作用外,尚与維持蛋白貭的构型有关。     

黄曲条跳甲综合防治技术的研究与示范

为了实现对黄曲条跳甲的绿色防控,通过综合各种对黄曲条跳甲有良好防治效果的单项防治措施,科学地组建了一套高效安全的综合防治技术体系。2次田间试验结果表明,处理21 d时,综合防治试验田的黄曲条跳甲虫口密度与对照田相比分别降低了71.75%和73.64%;综合防治试验田收获期的小白菜单株孔洞数分别为7.22个/株和7.90个/株,显著低于对照田的26.34个/株和30.46个/株,且综合防治试验田小白菜的产量比对照田分别增加了13.36%和19.95%。该研究结果为黄曲条跳甲的绿色防控和蔬菜的安全生产提供了技术支持。     

培养条件对齿瓣延胡索愈伤组织生长及延胡索乙素含量的影响

研究了不同培养条件对齿瓣延胡索(Corydalis remota)愈伤组织生长及延胡索乙素(THP)含量的影响。结果表明, 2, 4-D较NAA更有利于提高培养物鲜重,加速细胞增殖。培养基添加2.0 mg/L 2, 4-D和1.0 mg/L BA不仅有利于干物质积累,而且显著提高THP水平。蔗糖不仅可提高培养物鲜重,而且与半乳糖组合可显著促进干物质积累和THP水平的提高。水解酪蛋白和水解乳蛋白均有利于愈伤组织生长和THP含量的提高, 450mg/L的水解乳蛋白处理组THP含量最高。光照可提高培养物鲜重和THP含量。     

中国板栗EST-SSR信息分析及其通用性

从已公布的壳斗科(Fagaceae)基因组数据库中获得48501条中国板栗(Castanea mollissima)EST序列,其中8479条EST含有12116个长度大于10 bp的SSR,EST-SSR的出现频率为24.98%。二核苷酸重复和三核苷酸重复是中国板栗EST-SSR最主要的重复类型,分别占总数的38.05%和42.20%。对中国板栗EST-SSR标记在茅栗(C.seguinii)和锥栗(C.henryi)上的通用性检测表明,677对中国板栗EST-SSR引物皆能扩增,证实这些引物在栗属中国特有种间具有很高的通用性。115个位点的多态性分析表明,中国板栗、茅栗和锥栗分别有106、108和101个位点表现出多态性。在575个等位基因中,有260个(45.22%)是3物种的共有等位基因,各物种都有各自特有的等位基因。这项研究为中国栗属植物EST-SSR标记的建立及应用奠定了基础。     

验证钠离子的主动运输需要能量

为了加深学生对人教版教材主动运输部分相关内容的理解,针对"主动运输"过程需要能量进行实验设计,通过抑制细胞呼吸进而抑制能量供应,以细胞内天然指示剂花青素的颜色变化反映细胞主动运输的速率,并对不同的细胞呼吸抑制剂进行了优化和筛选,确定丙二酸钠是最适合在高中生物学实验中进行推广的细胞呼吸抑制剂。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中烷基间苯二酚

目的：建立超高效液相色谱-串联质谱法测定血浆中2种全麦食品生物标志物烷基间苯二酚（ARs）的方法。方法：血浆加入内标,经丙酮提取,离心取上清液过滤,滤液吹干异丙醇定容,使用实心核色谱柱（2.1mm×100mm,1.6μm）为分离柱,以异丙醇∶乙腈=30∶70为流动相,等度洗脱,质谱采用电喷雾负离子模式,多反应监测模式进行检测,用内标法定量。结果：2种ARs在2~200ng/mL浓度范围内线性良好,r2>0.998 0。方法检出限为0.1ng/mL,定量限为0.3ng/mL,加标回收率为88.2%~110%,相对标准偏差为2.48%~13.2%（n=6）。结论：该方法快速准确、灵敏度高、前处理简单,能够有效测定血浆中2种ARs的含量。     

冬季火如何影响川西亚高山草地植物群落?

虽然火后土壤理化性质、微生物特性与植物群落结构之间的关系已经被大量报道, 但迄今为止, 火影响植物群落结构的具体途径依然存在较大争议。该文以可持续管理草地生态系统为目的, 试图揭示冬季火影响川西亚高山草地生态系统的植物群落结构的具体途径, 提出了“火通过改造土壤环境来影响植物群落结构和多样性”的假设。在对比火烧区域和未火烧区域土壤的理化性质、微生物特性和植物群落结构的基础上, 联合非度量多维尺度分析和结构方程模型, 模拟了5种可能改变植物群落的主要途径。结果表明, 相对于冬季火的直接作用而言, 川西亚高山草地火后植物群落结构的塑造主要依赖于火对土壤微生物特性的改变, 且该假设途径具有最佳的模拟效果。这暗示了土壤微生物的死亡和繁殖是改变火后土壤理化性质和植物群落结构的重要途径。土壤作为一个整体环境, 其微生物生命代谢活动在调控火后土壤生物化学循环(特别是氮循环过程)中所扮演的角色有待进一步的研究。     

分枝杆菌非典型错配修复及其在抗生素耐药中的研究进展

错配修复(mismatch repair, MMR)是生物体DNA复制后的一种常见修复系统,对于维持基因组稳定性至关重要,其关键步骤由MutS和MutL蛋白家族的成员执行,尽管这种修复途径十分重要,但在许多古菌和放线菌基因组中并不存在MutS或MutL的同源蛋白。这类细菌(例如分枝杆菌等)采用另一种非典型的MMR途径,由核酸内切酶EndoMS/NucS发挥关键作用,与典型MMR蛋白(MutS/MutL)相比没有结构同源性。EndoMS/NucS介导的非典型错配修复在分枝杆菌DNA修复、突变和同源重组以及抗生素耐药等方面发挥重要作用。本文通过对比典型MMR途径和非典型MMR途径,深入阐述了分枝杆菌EndoMS/NucS介导的非典型MMR途径及其最新进展,以期为分枝杆菌错配修复分子机制带来新见解以及对分枝杆菌抗生素治疗提供研究线索。     

大亚湾夏季和冬季超微型浮游生物的时空分布及环境调控

通过流式细胞法, 于2015 年夏季(7 月)和冬季(12 月)对大亚湾超微型浮游生物(聚球藻、超微型真核藻类和异养细菌)的时空变化及环境调控进行了比较研究。结果表明, 夏季聚球藻、超微型真核藻类和异养细菌的丰度分别为(44.56±46.26)×103 cells·mL^–1、(3.00±4.50)×103 cells·mL^–1 和(12.31±7.54)×105 cells·mL^–1, 冬季的丰度分别为(12.48±3.96)×103 cells·mL^–1、(0.78±0.71)×103 cells·mL^–1和(3.83±1.39)×105 cells·mL^–1。超微型浮游生物的丰度呈现为夏季高于冬季, 受到温度、溶解无机氮组成和透明度的影响。夏季表层丰度明显高于底层, 但冬季表底层无明显差异。在水平分布上, 夏季湾内高营养盐基本对应高丰度, 但石化区附近(S3 站)营养盐高丰度却较低, 范和港(S1 站)低营养盐丰度却较高; 湾口和湾外区主要受到外海水的影响, 超微型浮游生物的3 个类群丰度均较低。在沿岸流、海水垂直混合、外源营养盐输入等多个因素共同影响下, 冬季湾中部和大鹏澳附近的聚球藻丰度较高, 超微型真核藻类在湾口和范和港丰度较高, 异养细菌在湾内和湾西部丰度较高。两个季节超微型真核藻类和异养细菌呈显著正相关。