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401.
402.
目的 探究使用重组胰酶(recombinant trypsin, RT)替代N-(对甲苯磺酰基)-L-苯基乙基氯甲基酮(N-p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone, TPCK)处理的牛源胰蛋白酶(TPCK-trypsin, TT),在基于无血清悬浮细胞培养的四价流感病毒裂解疫苗制备中的可行性。方法 用不同浓度的RT处理无血清悬浮培养的犬肾细胞(madin-darby canine kidney cell,简称MDCK细胞),检测其对细胞密度和细胞活力的影响。在流感病毒感染环节添加不同浓度的RT,在不同时间细胞收获病毒液,检测病毒滴度,确定适合的RT浓度。在2μg/mL RT的条件下,接种不同(亚)型流感病毒毒株,以检测不同时间病毒滴度及细胞密度,并在3 L生物反应器中验证RT对流感病毒扩增的影响。结果 当RT浓度<5μg/mL时,对无血清悬浮培养的MDCK细胞生长密度和细胞活力均无显著影响;在病毒感染与扩增过程中,添加终浓度为2μg/mL RT可保证不同(亚)型流感病毒疫苗株的有效扩增。其中,H1N1、H3N2、B/Vic、B/Ya... 相似文献
403.
用瓦氏检压技术测定呼吸时,怎样正确计算CO_2的释放量和呼吸商?《植物生理学实验》(薛应龙主编,第96页)一书中是这样写的:“不加碱的反应瓶,压力计上的读数变化是呼吸作用放出的CO_2和吸收的O_2的总结果。若以油料种子为例,放出的CO_2量比吸收的O_2量要少,所以反应瓶中的压力减少,压力计上的△h为 相似文献
404.
呼吸作用是活细胞中有机底物通过某些代谢途径的氧化过程,这个过程在所有活细胞中不断地进行着。呼吸作用是代谢的中心、有机物转化的枢纽,它提供生命活动所需要的能量,为其他化合物合成提供原料。植物体由于自己的特殊性,它的呼吸既有普遍性的类型,也有独到之处,现总结如下。 相似文献
405.
近日拜读“异质性体细胞杂种育性及其生物学性状研究”一文(《中国农业科学》1993,26(4):21~28),该文将“iodoacetamide-treated”误译为“吲哚乙酸处理”(该文中“iodoacetamide”又误为“iodacetamide”,这可能是印刷校对疏漏),而“iodoacetamide”译成中文的化学名称为“碘乙酰胺”。碘乙酰胺或碘乙酸(iodoacetic acid)为常见的呼吸抑制剂,能抑制糖酵解途径中的3-磷酸-甘油醛脱氢酶的活性,亦常用于处理原生质体,以钝化细胞质基因,进而用于不对称的细胞融合。另一方面,“吲哚乙酸”的英文名称为“indole acetic acid”(简称IAA),为常见的一种生长素植物激素。根据文献资料,未见关于吲哚乙酸有钝化细胞质基因的报道。 相似文献
406.
肝活素(hepassocin, HPS)是一种由肝合成和分泌的活性因子,参与肝再生与物质代谢,重组肝活素可以救治小鼠化学性肝损伤和非酒精性脂肪性肝炎,但其具体的分子机制仍需深入研究。前期采用RNA测序技术(RNA-seq)分析发现,HPS敲除小鼠肝中叉头框蛋白A2(forkhead box A2,FOXA2)的表达显著降低。FOXA2是肝内富集表达的重要转录因子,我们推测FOXA2可能是HPS调节肝多种生物学功能的关键靶点。本研究首先通过Western印迹和Real-time PCR证明FOXA2在HPS敲除小鼠肝组织中的表达显著降低(P<0.01),随后在细胞水平证明,重组HPS能显著增加FOXA2的表达(P<0.01)。通过克隆侧翼序列构建FOXA2启动子报告基因,在此基础上通过大片段截断、精细缺失发现FOXA2响应HPS信号的顺式作用元件位于转录起始位点上游-814~-797 bp,为肝细胞核因子6(hepatocyte nuclear factor 6, HNF6)的结合序列。通过凝胶迁移实验(electrophoretic mobility shift assay... 相似文献
407.
由橡胶树白粉菌引起的橡胶树白粉病是橡胶树的重要的叶部病害之一,严重影响橡胶的产量。然而目前对橡胶树白粉菌的致病机理研究匮乏。分支酸变位酶是莽草酸途径的关键酶,能够将分支酸转化为预苯酸,为植物提供氨基酸及大量代谢产物,在植物抗病中起到非常重要的作用。而植物病原物在致病过程当中能够分泌分支酸变位酶影响植物莽草酸途径,从而抑制植物的防卫反应。因此研究橡胶树白粉菌分支酸变位酶在其致病过程中的功能具有一定的意义。试验利用同源比对分析在橡胶树白粉菌基因组中获得一个分支酸变位酶同源蛋白,并用PCR克隆获得橡胶树白粉菌分支酸变位酶基因,命名为OHCmu。后续构建GST-OHCmu融合原核表达载体,筛选最优诱导条件,并利用GST亲和层析柱对蛋白进行纯化。结果表明橡胶树白粉菌OHCmu基因大小843 bp,具有1个内含子,编码263个氨基酸;具有d5csma_结构域,属于Chorismate mutaseⅡ蛋白家族;GST-OHCmu融合蛋白外源诱导表达在供试条件下(IPTG:0.8 mmol/L, 16℃)可以有较好的表达,获得融合蛋白大小约为56 kD。经过GST亲和层析柱纯化、切割GST标签后,顺利获得浓度较高、较纯的橡胶树白粉菌OHCmu蛋白。研究结果为后续OHCmu蛋白的特性及致病机理研究提供参考。 相似文献