农杆菌介导的苏云金杆菌抗虫基因cryIA(b)和cryIA(c)在水稻中的遗传转化及蛋白表达

通过农杆菌介导法用含有抗潮霉素和 Ｇ Ｕ Ｓ 基因的双元载体将杀虫结晶蛋白基因ｃｒｙ Ｉ Ａ（ ｂ） 和ｃｒｙ Ｉ Ａ（ｃ） 导入到籼、粳稻幼穗愈伤组织中,然后经过在含有不同浓度潮霉素的培养基上进行数次筛选,获得一批 Ｂｔ 转基因株。经 Ｐ Ｃ Ｒ、 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交及 Ｗｅｓｔｅｒｎ 印迹分析证实此二基因已整合进水稻中,饲虫试验结果表明,转基因株具有１００ ％ 杀虫率。     

寄主植物影响害虫药剂敏感性的研究进展

害虫取食不同寄主植物后,对杀虫剂的反应可归为3类：敏感性降低、增高和无明显变化。害虫对药剂的敏感性变化与不同植物中次生物质诱导激活/抑制昆虫体内相关解毒酶活性有关。这种诱导作用可受到植物营养、次生物质种类及其含量分布、害虫种类与发育阶段、以及环境温度等多种因素影响。经诱导的昆虫解毒酶对不同类型杀虫剂的代谢能力并不相同,进而导致对不同药剂的敏感性变化有明显差异。解毒酶系的诱导激活在害虫抗药性形成早期被认为有利于提高隐性抗性基因频率,从而可促进害虫抗药性的发展。最后,就寄主植物影响害虫对药剂敏感性在害虫治理中的应用作了探讨。     

膜翅目昆虫杜氏腺形态结构、内分泌物与功能的研究进展

杜氏腺为膜翅目雌性昆虫生殖器官中的一外分泌腺体,外形呈囊腔状,内含丰富的油状分泌物。其内分泌物主要为饱和与不饱和烃类化合物,有着辅助产卵、释放信息素及作幼虫食物等多方面的功能。本文对杜氏腺的形态结构、内分泌物合成途径、化学组分及其生理和生态学功能进行了综述。     

菜粉蝶蛹血细胞体外细胞免疫反应及蝶蛹金小蜂毒液的影响

为探明蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum毒液对其寄主菜粉蝶Pieris rapae蛹颗粒血细胞和浆血细胞的包囊与吞噬能力的影响, 本研究分别采用Na₂-EDTA处理和尼龙毛法对菜粉蝶蛹颗粒血细胞与浆血细胞进行分离纯化; 再采用离体细胞培养方法, 研究了菜粉蝶蛹颗粒血细胞、 浆血细胞各自在包囊和吞噬反应中的作用, 以及蝶蛹金小蜂毒液对其所产生的影响。结果表明： 颗粒血细胞和浆血细胞均参与了包囊反应, 其中前者包囊作用明显, 后者作用微弱, 但两者同时存在时包囊作用最为明显; 血淋巴浆质对颗粒血细胞和浆血细胞包囊反应均无显著影响。毒液对颗粒血细胞和浆血细胞的包囊能力均存在显著的抑制作用, 且抑制作用具有明显的剂量效应特征。此外, 菜粉蝶蛹颗粒血细胞和浆血细胞均具吞噬能力, 其中前者吞噬能力显著强于后者; 毒液对颗粒血细胞与浆血细胞的吞噬能力亦均存在显著的抑制作用, 且该抑制作用亦具有显著的剂量效应特征。结果说明, 菜粉蝶蛹颗粒血细胞及浆血细胞均参与寄主的细胞免疫反应, 蝶蛹金小蜂毒液对其寄主颗粒血细胞和浆血细胞的包囊与吞噬能力均存在显著的抑制作用。     

鳞翅目昆虫血细胞鉴定与分离纯化的几种方法

昆虫的细胞免疫包括吞噬作用和包囊作用,要分析哪些血细胞参与其中的作用,就必须能准确鉴定血细胞的种类并将其予以分离、纯化.本文就鳞翅目Lepidoptera昆虫血细胞的鉴定与分离纯化的几种方法进行了简单的介绍.     

麦蛾柔茧蜂幼虫唾液腺的显微与超微形态观察

本文采用解剖学观察、显微摄影、透射电镜等方法对麦蛾柔茧蜂Habrobracon hebetor幼虫唾液腺的显微形态、超微结构以及发育特性进行了观察和分析。麦蛾柔茧蜂幼虫唾液腺为一对无色透明至乳白色的管状腺体,自口腔沿中肠两侧向后延伸,单侧腺体在中部先分支、后合并成一不规则环状,端部呈单盲管状。唾液腺管道长度随幼虫龄期增加而呈线性增长。对唾液腺切片进行超微结构观察,发现腺管由两类差异明显的单层细胞组成,I型细胞微绒毛层较厚,胞内除有丰富的内质网和线粒体之外,还含有大量囊泡,并观察到囊泡运输分泌颗粒的现象;II型细胞微绒毛短,胞内的内质网和线粒体数量丰富。本文研究为深入探究寄生蜂幼虫的消化生理以及寄生蜂-寄主互作机制奠定了基础。     

蝶蛹金小蜂卵黄蛋白单克隆抗体的制备及其应用方法的建立

为深入研究寄生蜂卵黄发生及其内分泌调控,特采用杂交瘤细胞技术,制备4株能稳定分泌抗蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum卵黄蛋白（vitellin, Vt）的单克隆抗体（mAb）,即PpVt mAb1,PpVt mAb2,PpVt mAb3和PpVt mAb4。这4株单克隆抗体的重链和轻链的亚类均分别为IgG1和κ类型,不仅特异性识别Vt,而且识别雌蜂血淋巴中卵黄原蛋白（vitellogenin,Vg）,但与雄蜂体液无反应。通过比较4种不同的ELISA方法,确定了微量检测蝶蛹金小蜂体内Vg/Vt的最适ELISA法,即双夹心ELISA法。该方法可用于单头雌蜂体内Vg/Vt的检测,其检测灵敏度为20 ng/mL。用Western 免疫印迹的方法证实了该蜂Vg的合成始于刚羽化的成虫,并在羽化后12～36 h内含量达到高峰。     

高温条件下茶尺蠖核型多角体病毒对茶尺蠖繁殖的影响

本文报告了高温季节茶尺蠖核型多角体病毒对其宿主繁殖的影响。结果表明,免于病死的雌性蛹、成虫的卵巢发育进度与对照相比,无显著性差异;3龄末和4、5龄初饲毒后,化蛹率与羽化率极显著下降,交配率一股明显下降,而羽化成虫的产卵前期、寿命、产卵量、总怀卵量及卵孵化率与对照相比并无显著差异。成虫饲毒后,繁殖力不受影响。     

珍贵绢丝昆虫——天蚕蚕蛾翅振行为观察

本文较系统地观察和测定了天蚕蚕蛾的翅振时间节律和翅振频率。结果表明,雄蚕蛾不论独处还是与雌蚕蛾共存,其翅振行为均出现于18：00至次日6：00之间,其中以22：00至次日4：00为主;雌蚕蛾独处时未见翅振行为,只有与雄蛾共存时方有此行为,出现于22：00至次日6：00。雌雄蚕蛾翅振行为参数,包括日翅振次数、翅振总时间、一次翅振持续时间、两次翅振间间隔时间等,因蚕蛾日龄和存在方式(独处或与异性共存)而异;雌雄蚕蛾相比,除两次翅振间隔时间外,雄蛾均明显高些。雌雄蚕蛾翅振频率一般为7-12Hz,不同日龄闯,雄蛾以羽化第2天为高,平均10.9741Hz;雌蛾以羽化第1天为高,平均10．7071Hz。同一日龄不同时刻间翅振频率有一定差异,但未达显著水平。此外,尚观察了雄蛾触角对其翅振行为表现的作用,最后讨论了制种中拟注意的有关问题。     

蝶蛹金小蜂热激蛋白家族基因表达与热保护功能

作为分子伴侣, 热激蛋白可起修复变性蛋白与阻止其他蛋白质聚集的作用。为进一步理解蝶蛹金小蜂Pteromalus puparum热激蛋白家族的分子伴侣功能, 本研究对来自该寄生蜂的热激蛋白Pphsp90, Pphsp70, Pphsc70, Pphsp60, Pphsp40和Pphsp20的基因在大肠杆菌Escherichia coli BL21菌株中进行了过表达。结果表明： 除Pphsp40外, 其余5个基因均得到高效表达, 且表达的重组热激蛋白在高温下（80℃）具可溶性与热稳定性。其中, Pphsp20与Pphsp90在大肠杆菌中的表达显著提高了高温下（50℃, 1 h）细胞的存活率。离体活性实验证实, 利用纯化的融合蛋白Pphsp20可减少高温下荧光素酶的聚集现象。据此认为, Pphsp20与Pphsp90均具有大肠杆菌细胞的热保护功能, 但Pphsp20可以单独发挥作用, 而Pphsp90可能需其他因子协同作用才有保护活性。