鸭源致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因的原核表达及重组蛋白对强毒攻击的免疫保护作用

根据GenBank中人源大肠杆菌pilA基因序列,用OLIGO6.0设计PCR引物,从鸭源致病性大肠杆菌GH1.2中扩增到pilA基因并将其克隆至pMD18-T载体,经PCR、酶切和DNA测序鉴定后,将鸭源致病性大肠杆菌pilA基因正向插入原核表达载体pET-32a（+）的BamHⅠ和HindⅢ位点间,成功构建了重组表达质粒pET-32a-pilA。重组表达质粒pET-32a-pilA转化表达宿主菌BL21（DE3）,用IPTG诱导,表达出了大小约为36kD的pilA重组蛋白。表达产物用镍柱亲和层析纯化,与等量弗氏佐剂混合制备pilA重组蛋白疫苗,分别在1日龄、8日龄时两次对雏鸭进行免疫,二免后2周测定鸭血清中的ELISA抗体效价,并以10⁹PFU同源菌株GH1.2攻毒,根据攻毒后鸭的死亡率、E.coli分离率和各组织器官的病变等级来判定pilA重组蛋白的免疫保护效果。结果pilA重组蛋白免疫鸭的血清中ELISA抗体效价为1∶12800,全菌灭活苗免疫组的血清ELISA抗体效价为1∶200;同源菌株攻毒后,pilA重组蛋白免疫保护组鸭的死亡率、E.coli分离率和各组织器官的病变程度均比攻毒对照组下降且差异显著或极显著,与全菌灭活苗免组比较差异不显著。表明pilA重组蛋白对同源菌株GH1.2的感染具有一定的保护效果     

噬菌体展示文库筛选技术的研究进展

噬菌体展示技术是将编码外源蛋白或多肽的基因片段定向插入到噬菌体的外壳蛋白基因区,使外源蛋白或多肽通过与噬菌体外壳蛋白融合而表达并展示于噬菌体表面,进而筛选表达特异蛋白或多肽的噬菌体,已发展成为生物学后基因组时代一个强有力的实验技术.噬菌体展示文库的筛选是其关键环节.为了提高筛选效率,许多研究者对传统的筛选技术进行了改进,如选择性感染噬菌体、迟延感染性噬菌体、以DNA为基础的筛选方法、亲合力捕获和反复筛选和封闭筛选法等,用于筛选的靶标也越来越具有多样性,使得这一技术有了更加广阔的发展前景.     

坦克作业对乘员肾脏功能的影响

目的：观察坦克作业对乘员肾脏功能的影响。方法：在我军某坦克部队随机选取152名坦克乘员为观察组,在同一部队选取非坦克作业战士37名为对照组。留取24h尿和晨尿,检测尿中α1-微球蛋白（α1-MG）、β2-微球蛋白（β2-MG）、IgG、N-乙酰-β-葡萄糖苷酶（NAG）和尿微量白蛋白（UAE）排泄率。结果：与对照组比较,观察组尿α1-．MG、β2-MG、尿NAG、尿UAE均明显升高,且平均值均超过临床检验正常值,尿IgG无明显升高。其中从事坦克作业50摩托小时以上的坦克乘员尿中β2-MG、NAG、UAE均高于对照组（P〈0．05）,从事坦克作业51～100摩托小时的尿中α1-MG虽有升高,但未有统计学差异且平均值在正常范围内,从事坦克作业大于301摩托小时的坦克乘员尿中α1-MG显著高于对照组。脱离坦克作业3年后乘员尿中β2-MG、NAG、UAE降低至正常水平,但大于10年者尿中β2-MG再度出现升高,与6—10年组比较有显著差异（P〈0．05）。脱离坦克作业后坦克乘员尿中α1-MG虽有下降,但始终未降至正常水平。结论：坦克作业对乘员肾脏功能有一定影响,脱离坦克作业后乘员肾功能可得到较好的恢复,但远期仍遗留一定程度的肾小管重吸收功能障碍。     

天目山野生春兰根中可培养内生细菌多样性研究

为了解春兰植物内生细菌的多样性,采用稀释涂布法对表面灭菌的天目山野生春兰根内生细菌进行分离培养。通过R2A和TSA两种培养基共分离获得63株内生细菌。对16S rDNA序列测定结果进行系统发育分析可知,63株细菌分属于β-变形菌纲(31.74%)、γ-变形菌纲(7.94%)及厚壁菌门(60.32%)。其中厚壁菌门为最优势类群,芽孢杆菌属为最优势菌属,占分离总菌数的50.79%。天目山野生春兰根内生细菌多样性指数为1.56。结果表明,初春季节天目山野生春兰根内生细菌多样性较低。     

地塞米松对小鼠肠道菌群及脏器的影响

目的 应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCRDGGE)技术及苏木精-伊红染色法(HE染色法)探究地塞米松对小鼠肠道菌群和脏器的影响。 方法 选用SPF级Balb/c小鼠10只,随机分为实验组和对照组,每组5只。实验组每日灌胃1.228 5 mg/kg地塞米松,对照组不做任何处理。观察小鼠体质量、行为、皮毛和粪便等的变化。28 d后,无菌条件下取小鼠粪便提取细菌基因组DNA,应用PCRDGGE技术进行肠道菌群多样性及差异性分析;取小鼠肺、脾、肝、小肠、盲肠等进行HE染色,观察其脏器变化情况。 结果 与对照组相比,实验组小鼠体质量有明显降低,肺指数升高,脾指数下降;PCRDGGE结果表明实验组小鼠肠道菌群的多样性明显增加,优势菌群发生转变;实验组小鼠脏器出现了明显的炎症反应。 结论 服用地塞米松使小鼠肠道菌群的构成和多样性发生了显著改变;引起了小鼠脏器的炎症反应,可能会对小鼠生长发育产生影响。     

肠外营养对早产儿生长激素释放肽的影响

目的：通过测定早产儿出生后不同时间点血清生长激素释放肽（Ghrelin）水平,探讨肠外营养对早产儿血清Ghrelin水平的影响及其与体格发育的关系。方法：选取32～35 w早产儿共200例,随机分为观察组和对照组。对照组给予母乳喂养,根据情况适当补充葡萄糖液及电解质液;观察组在给予母乳喂养的同时,加以肠外营养干预。采集患儿脐血、第72小时和第7天时股静脉血,测量患儿身高、体重及头围,利用ELISA法测定血清Ghrelin浓度。观察两组患儿血清Ghrelin浓度变化和体格发育情况。结果：肠外营养干预前,两组患儿血清Ghrelin浓度和身高、体重、头围均无差异（P>0.05）。肠外营养干预后,72 h［（0.805±0.146） vs（0.673±0.156）ng/mL］和7 d［（1.008±0.146）vs（0.847±0.156）ng/mL］均有观察组患儿血清Ghrelin浓度较对照组增高（P＜0.05）,且在第7天,观察组患儿体重［（2.580±0.278）vs（2.439±0.305）kg］、身高［（45.084±2.896）vs（43.990±2.332）cm］和头围［（30.747±1.065）vs（30.415±0.917）cm］均较对照组高。结论：肠外营养可调节早产儿血清Ghrelin浓度,有效提高患儿体格发育,最终实现追赶性生长,值得临床借鉴。     

不同液体复苏在腹部多发伤导致失血性休克救治中的效果对比研究

目的:比较不同液体复苏在腹部多发伤导致的失血性休克救治中的临床效果及安全性.方法:选取2017年7月至2019年12月我院救治的因高处坠落、交通事故等意外事件导致腹部多发伤且失血性休克的患者83例,根据入院时间分为2组,对照组(于2017年7月至2018年7月入院治疗)和研究组(于2018年8月至2019年12月入院治...     

曼月乐与妇康片治疗单纯性子宫内膜增生的临床疗效比较

目的:比较曼月乐与妇康片治疗单纯性子宫内膜增生(simple endometrial hyperplasia,SHE)的临床疗效.方法:选择SHE患者102例,在患者知情同意自愿的前提下,分为妇康片组(n=46例)和曼月乐组(n=56例),妇康片组给予妇康片治疗,曼月乐组给予曼月乐治疗,比较两组患者治疗3个月后的临床疗效、PBAC评分、子宫内膜厚度、血红蛋白水平,同时记录并比较两组患者在治疗过程中不良反应的发生情况.结果:治疗3个月后,两组患者显效例数与无效例数比较,差异具有统计学意义(P＜0.05);曼月乐组患者PBAC评分、子宫内膜厚度均显著低于妇康片组,而血红蛋白水平显著高于妇康片组,差异均具有统计学意义(P＜0.05);治疗期间出现肝肾功能异常例数比较,差异具有统计学意义(P＜0.05),曼月乐组均优于妇康片组.结论:曼月乐治疗SHE的疗效较妇康片更好,并能减少不良反应.     

谷氨酸脱羧酶结构及催化机制的研究概述

谷氨酸脱羧酶(glutamate decarboxylase,GAD)是一种磷酸吡哆醛(pyridoxal-5′-phosphate,PLP)依赖性酶,广泛存在于自然界的动植物和微生物中,在酸性环境下发生结构变化,不可逆地催化L-谷氨酸或谷氨酸盐α-脱羧生成γ-氨基丁酸(γ-aminobutyric acid,GABA)。γ-氨基丁酸在人体中作为一种抑制性神经递质,具有重要的生理功能,可以被广泛应用于食品和制药工业中。本文就谷氨酸脱羧酶结构及催化机制的研究进展进行概述。     

磷脂酶Dα在拟南芥低温驯化过程中的作用途径分析

本研究对低温驯化和未经低温驯化的磷脂酶α基因敲除突变体与野生型拟南芥植株进行冻害胁迫处理后,通过观测植株表型和膜离子渗漏率的变化,鉴定两种基因型植株的抗冻性.结果发现,低温驯化后,PLDα敲除突变体的抗冻性明显低于野生型,表明PLDα参与植物的低温驯化过程.对其作用途径进行分析发现,PLDα不参与低温驯化过程中ABA信号转导作用,也没有参与SOD、CAT和POD等3种抗氧化酶活性的调节,但是参与低温驯化过程中膜稳定性调节和渗透调节过程.