鹊肾树心材的化学成分及体外抗菌活性研究

本文研究鹊肾树Streblus asper心材的乙酸乙酯部分化学成分及体外抗菌活性.运用正相硅胶柱色谱层析,反相C-18柱色谱层析和Sephadex LH-20分高、纯化,最终得到8个化合物,经波谱解析并结合理化鉴定确定化合物结构为:银杏双黄酮(1)、异黄酮-4′-甲氧基-7-α-L-鼠李糖-(1→6)-β-D-葡萄糖(2)、鼠李柠檬素-3-O-β-D-半乳糖苷(3)、β-香树脂酮(4)、β-谷甾醇(5)、香革酸(6)、山俞酸(7)、二十六烷酸(8).除化合物5外,均为首次从该植物中提取到.此外研究了化合物1-4的抗菌活性,实验表明化合物2具有一定的抑菌活性.     

β3肾上腺素受体介导多巴胺对大鼠远端结肠运动的抑制作用

目的研究多巴胺（DA）对大鼠结肠运动影响的机制。方法采用离体组织灌流方法记录大鼠远端结肠自发性节律运动,观察DA的作用以及阻断剂的影响,再用反转录实时多聚酶链反应（real time RT-PCR）检测受体基因的表达。结果DA（≥1.0×10-5mol/L）对结肠远端（紧接肛门淋巴结近端）离体纵行肌条（2.0 mm×10 mm）的运动具有抑制作用,多巴胺受体阻断剂（D1受体阻断剂SCH23390,1.0×10-7mol/L,D2受体阻断剂Sulpide,1.0×10-7mol/L）不能阻断多巴胺的抑制效应,但加入β3受体抑制剂cyanopindolol（7.5×10-7mol/L）,DA的抑制作用显著减弱。real time RT-PCR检测发现β1、β2、β3受体mRNA在远端结肠均有表达。结论DA可通过β3受体发挥对远端结肠运动的抑制作用。     

制备肺炎衣原体抗原片检测血清抗体

目的:探索肺炎衣原体抗原片检测血清抗体法在诊断Cpn感染中的实际应用前景。方法:应用进口肺炎衣原体(Cpn)毒株感染Hep-2细胞,分别以瑞氏-姬母萨染色、吖啶橙染色和直接免疫荧光染色等3种方法鉴定Cpn感染细胞。纯化获取大量Cpn抗原,用于制备斑点抗原片。建立微量免疫荧光染色法(MIF)检测血清抗体,诊断Cpn感染。结果:Cpn感染Hep-2细胞的最适条件是用含1μg/mL放线菌酮的维持液,在35℃、5%CO2孵箱中培养7d,并在培养的第0、3、4、5天以2600r/min离心1h,感染成功率极高。染色反应显示,瑞氏-姬母萨染色可将Cpn包涵体染成蓝紫色或红紫色;吖啶橙染色则使Cpn感染的Hep-2细胞呈现鲜明的橘红色;免疫荧光抗体染色后,在Cpn感染细胞内可见亮苹果绿色包涵体。通过斑点抗原荧光抗体染色的方法抽样检测了100份病人血清中的Cpn抗体,其中抗Cpn-IgG抗体的阳性血清共61份,阳性率为61%。与Cpn-外周血单核细胞(Cpn-PBMC)抗原片比较,阳性检出率无明显差别。结论:用Cpn感染细胞制作的Cpn斑点抗原片可用于临床检测血清Cpn-IgG抗体,且具有特异性、敏感性高的特点,但要求检测人员有一定的经验。     

汞对玉米、小麦幼苗生长及过氧化物酶同工酶的影响

7ppm Hg ++对玉米,小麦幼苗生长具一定的刺激作用,而10PPm Hg++则抑制幼苗生长。Hg++对两种作物根系生长有不同的生理效应,而对玉米、小麦根系过氧化物酶影响表现为谱带减少或活性减弱。     

血清样本双向电泳操作条件的优化

为建立分辨率高、重复性好的血清样品双向电泳技术,本文从血清样品的水化、等电聚焦、胶条的平衡、胶条的染色等几个方面对双向电泳操作条件进行了分析。结果表明采用以下的操作过程可以获得分辨率高、重复性好的双向电泳结果：样品水化2小时（25℃);胶条泡涨12-16小时(25℃);17cm胶条的等点聚焦程序采用 250V线性1小时/1000V线性1小时/4000V线性2小时/8000V线性3小时/8000V线性10小时/500V快速0.5小时/,11cm的胶条的等点聚焦程序采用250V慢速4小时/1000V快速2小时/4000V快速1小时/8000V快速2.5小时/8000V快速7小时/500V快速30分钟;两次平衡各15-20分钟;银染条件为固定两小时或过夜,敏化50-60分钟,定影30-40分钟,显影10分钟左右,终止10分钟）。这一研究对利用双向电泳分析血清蛋白具有很好的参考价值。     

MiR-199a-5p对肝星状细胞活化增殖的影响

miR-199a-5p是miRNAs家族的一员.为探讨对人肝星状细胞活化增殖和迁移的影响,为临床肝纤维化治疗提供新的思路,本研究构建miR-199a-5p过表达载体、合成miR-199a-5p反义寡聚核苷酸(anti-sense oligonucleotide,ASO)经脂质体转染LX-2细胞.采用CCK-8法和Transwell分别检测细胞增殖和迁移能力;集落形成实验检测LX-2细胞的集落形成能力;实时荧光定量PCR技术检测细胞中转染miR-199a-5p后纤维化相关基因α-SMA和Collagen Ⅰ的mRNA表达水平;Western blot检测各组细胞中α-SMA表达水平.结果 表明miR-199a-5p可以促进LX-2细胞增殖(P＜0.01)、迁移(P＜0.01)和集落形成(P＜0.01);而ASO-199a-5p-5p组细胞增殖(P＜0.01)、迁移能力(P＜0.01)和集落形成能力(P＜0.01)受到抑制.RT-qPCR结果显示miR-199a-5p在受TGF-β1刺激后的LX-2细胞中的miRNA表达水平高于未受刺激组的(P＜0.05),转染miR-199a组细胞中α-SMA的mRNA(P＜0.01)和蛋白(P＜0.05)表达水平升高.以上结论表明miR-199a-5p过表达能促进肝星状细胞活化、增殖.     

非洲：生物科技发展日趋重要

非洲是世界上生物科技最不发达的地区,现代生物科技在许多非洲国家还是新鲜事物。但近年来,非洲国家对生物科技的发展充分重视,不断加强生物人才培养,积极开展国际合作,高度重视生物安全,参与各种UNEP/GEF生物安全计划,并在非盟组织以及国际机构的引导和支持下,成立了生物科技高水平专家组（ABP）,撰写了“非洲生物技术发展报告”提出非洲生物技术发展构想。了解和研究非洲生物科技发展现状及动态对我国生物科技的发展以及开展中非合作有着重要的意义。     

N-甲基-DL-天门冬氨酸对肥育猪血清游离氨基酸水平的影响

选用48头杜长大肥育猪,研究N-甲基-DL-天门冬氨酸(NMA)对猪血清游离氨基酸含量的影响。试验结果表明,添加50mg/kgNMA明显降低了血清游离氨基酸浓度,其中酪氨酸和异亮氨酸水平分别下降了19.53%(P<0.05)和28.90%(P<0.05)。     

葡萄球菌肠毒素B定点突变体的构建

用PCR技术,从分泌葡萄球菌肠毒素B（SEB）标准株动中扩增正常SEB基因。用PCR致变技术,改变引物中某一特定核仔酸,使与SEB起抗原毒性密切相关的23位关键氨基酸一天冬酸胺（N）定点突变为丝氨酸。将正常SBB和突变SEB基因分别与原核表达质粒PT89．ra重组,转化大肠杆菌JM109,提取转化菌质粒,经酶切鉴定,筛选出重组质拉转化菌。提取纯化重组反粒,经DNA测序证实23位天冬阶胺已由公氨酸替代,而其他氨基酸并未改变,表达】E常SEB和突变SEB蛋白的重组细菌裂解波经Sffi—PAG电泳,在28IClll处可见有表达条带,而未重组菌则…     

医学微生物学试题库的组建及其应用

医学微生物学考试,多半采用授课教师命题和阅卷的传统模式,过分重视以分数评论学生而忽视考试在教学反馈上的作用。为了改变以往的考试方式,探索考试在医学教学改革中的作用,自１９９７年开始,我们同医学教育研究室联合,对１９９５～１９９７年三届临床医学专业医学微生物学的试卷及考试成绩进行了分析,了解本课程考试在命题、组题、阅卷、试题分析、考试反馈等方面的问题,尝试建立上海医科大学医学微生物学试题库,以便探讨“教考分离”的考试制度和实行标准化考试的方式。现将我们的做法介绍如下,以供同行参考和交流。１　制定考…