布鲁氏菌对RAW264.7细胞内质网应激与细胞因子分泌的影响

【目的】布鲁氏菌与宿主相互作用的分子机制是目前的研究热点之一,布鲁氏菌通过形成来自于内质网的布氏小体而在巨噬细胞内生存和增殖,其机制目前尚不清楚,宿主细胞内质网应激反应对病原感染和炎症的调控密切相关。揭示内质网应激反应在布鲁氏菌感染巨噬细胞中的作用以及布鲁氏菌感染对巨噬细胞分泌免疫因子的影响。【方法】构建布鲁氏菌感染RAW264.7模型,在感染后不同时间收集细胞,通过实时荧光定量PCR检测细胞内质网应激反应标志分子GRP78和CHOP,以及TNF-α、IL-1β和IL-6在m RNA水平的变化;通过Western blot和ELISA分别检测其蛋白水平的变化。【结果】布鲁氏菌感染RAW264.7细胞的最佳感染复数MOI为100?1;证明在布鲁氏菌感染4-6 h,巨噬细胞可杀伤侵入的布鲁氏菌,之后存活的细菌可在细胞内增殖;感染后24 h出现细胞凋亡,48 h出现大量细胞坏死。布鲁氏菌感染可激活RAW264.7细胞的内质网应激反应,促进GRP78的表达,同时,抑制免疫因子的分泌。【结论】内质网应激反应参与了RAW264.7对布鲁氏菌感染的调节。     

可视化和实时荧光环介导恒温扩增技术快速检测原料乳中的沙门氏菌

【背景】原料乳质量控制是乳制品生产流程中的关键环节,沙门氏菌是污染原料乳的主要致病菌之一。随着生物检测技术的不断发展,建立用于快速检测原料乳中沙门氏菌的实用型方法具有重要意义。【目的】评价可视化环介导恒温扩增技术(visual loop-mediated isothermal amplification,V-LAMP)和实时荧光环介导恒温扩增技术(real-time fluorescence loop-mediated isothermal amplification,RF-LAMP)方法快速检测原料乳中沙门氏菌的实效性。【方法】建立沙门氏菌LAMP反应体系和反应条件,对比V-LAMP和RF-LAMP两种方法的特异性、灵敏度、稳定性及其应用于实际样品检测的效用。【结果】采用V-LAMP和RF-LAMP方法检测沙门氏菌标准菌株,其结果均为阳性,检测非沙门氏菌标准菌株其结果均为阴性;该两种方法的检出限为13 CFU/mL,检测重复率均为100%;经检测10份人工污染样品,该两种方法的检测结果与实际结果高度一致;经检测73份实际样品,相对于标准方法,该两种方法其相对特异性分别为94.12%和92.65%,相对敏感度分别为100%和100%,相对准确率分别为94.52%和93.15%,一致性χ2值分别为2.25和3.20,与标准方法无明显差异(P>0.05)。【结论】V-LAMP和RF-LAMP方法检测特异性好、灵敏度高、稳定性好,适用于原料乳中沙门氏菌的快速检测。     

钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白SNAT2的研究进展

钠离子依赖的中性氨基酸转运蛋白2 (sodium-coupled neutral amino acid transporter 2,SNAT2)是SLC38基因编码家族中转运系统A (SystemA)的重要成员。SNAT2广泛表达于哺乳动物各组织中。其表达受高渗、pH值、激素、炎症因子等因素的影响。SNAT2可以通过改变细胞内氨基酸的水平来调控哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1(mammalian target of rapamycin complex 1,mTORC1)的下游通路,从而影响细胞蛋白质合成。SNAT2在肥胖、糖尿病、关节炎、癌症等多种病理生理过程中发挥着重要的作用。本文对SNAT2的研究进展进行综述。     

伊犁特克斯河河岸带镰叶锦鸡儿灌丛分株结荚特征

以伊犁特克斯河河岸带阶地和河漫滩两种生境镰叶锦鸡儿(Caragana aurantiaca)灌丛为对象,研究了结荚数量、重量、荚果大小与灌丛分株高度、分枝数量、丛径等指标的关系,探讨了荚果生产过程在种群更新中的作用.结果 表明,阶地中的镰叶锦鸡儿荚果数量、荚果长度和荚果生物量显著高于河漫滩,而有性繁殖分配和单个荚果重显...     

荧光原位杂交及其应用

荧光原位杂交(FISH)法是直接从组织或细胞中检测特定DNA或RNA的最有效方法。整个操作过程为:1)制备探针;2)细胞或组织显微镜标本的制作;3)原位分子杂交;4)荧光免疫检测;5)显微镜下观察。其中以1),2)步最为关键。FISH法的最大特点是灵敏度高,并可以进行定量分析。FISH法可应用于染色体上的基因定位,基因表达的检测,病毒感染的检查,特定核酸序列在细胞内的空间分布分析以及核酸复制过程中的定量分析等许多领域的实验中。     

Chromosome Transfer from Pink Salmon (Oncorhynchus gorbuscha) to Masu Salmon (O. masou)

Sperms from Pink salmon were subjected to incomplete irradiation by γ-ray to cause partial breakageof their chromosome. Normal eggs from masu salmon were fertilized by these damaged sperms andput under hydrostatic pressure to suppress the release of second polar bodies. The resultant eggscontained complete sets of genome from masu salmon and some chromosomes and chromosomefragments from pink salmon. Karyotype and isozyme of the embryos were analyzed. The resultsdemonstrate that the chromosomes from pink salmon showed genetic activities. Variations in hatchedindividuals were observed.     

昆明市售辣椒面中真菌污染调查

真菌毒素是真菌的次生代谢产物,对生物有毒害作用。材料证明,低剂量长期接触会致癌,摄入量大会引起急性中毒,甚至死亡。早在1931年,Raistrick就从桔青霉中分离到桔青毒素,但直至1960年英国发生火鸡中毒事件,发现了黄曲霉毒素,并进一步证明其对动物具有强烈致癌作用以后,真菌毒素才逐渐引起各国的注意。在我国,花生、大米、大豆等粮食作物上的真菌分布,已有人进行过大量研究。但对调味品,尤其是辣椒面中的真菌污染情况研究甚少。作者对昆明市售辣椒面中真菌分布的种类、数量及其毒素进行调查,报导如下。回材料和方法：1996年11…     

经超声弹性成像技术初诊后确认的乳腺恶性肿块患者 感染病原菌分布分析及耐药性研究

目的本研究对本院超声弹性成像初诊后确认的乳腺恶性肿块患者感染病原菌分布及耐药性进行分析,为临床治疗提供参考。方法回顾性分析本院2012年4月至2016年4月期间诊治的170例超声弹性成像技术诊断的乳腺恶性肿块患者临床资料,BD公司全自动微生物鉴定仪(PhoenixTM)分析病原菌类型,采用药敏试验进行病原菌耐药性分析,酶联免疫吸附测定法分析患者体内雌激素受体和孕激素受体水平。结果超声弹性成像技术确定的乳腺恶性肿块患者中共分离出病原菌170株,其中:革兰阳性菌79株,占46.5%;革兰阴性菌91株,占53.5%。分离的病原菌对抗菌药物均具有较强的耐药性,但革兰阳性菌对万古霉素和林可霉素较敏感,革兰阴性菌均对亚胺培南和头孢西林较敏感;感染患者血清中雌激素受体和孕激素受体水平明显高于对照组和未感染组受试者,差异具有统计学意义(P0.05)。结论超声弹性成像技术鉴别乳腺恶性肿块患者感染病原菌以革兰阴性菌为主且均具有较强的耐药性,感染患者血清中雌激素受体和孕激素受体水平明显高于对照组和未感染组受试者。     

mRNA差异显示技术在动物早期胚胎发育相关基因研究中的应用

动物从卵裂开始的早期胚胎发育始终伴随着ｍＲＮＡ不断的合成与降解。最初受着受精卵内母体ｍＲＮＡ的控制。当这些ｍＲＮＡ在发育过程中逐渐被降解时,有些动物（如小鼠）在比较早的时期已有新基因的转录;而有些动物（如鱼类、两栖类）迟到囊胚中期以后,合子核的基因才开始转录新的ｍＲＮＡ。ｍＲＮＡ这种有规律的代谢活动控制着细胞的分化、胚层的形成以及模式形成（ｐａｔｅｒｎｆｏｒｍａｔｉｏｎ）。所有这些ｍＲＮＡ水平上的变化都可以用ｍＲＮＡ差异显示法（ｍＲＮＡｄｉｆｅｒｅｎｔｉａｌｄｉｓｐｌａｙ）检测出来并进而获得与早期胚胎发育有关的基因。ｍＲＮＡ差异显示法是由Ｌｉａｎｇ和Ｐａｒｄｅｅ于１９９２年建立起来的,用于显示两种不同组织之间ｍＲＮＡ差异的方法。基于绝大多数ｍＲＮＡ有一个ｐｏｌｙ（Ａ）尾巴,选用一个较特殊的３’端引物─５’Ｔ１１ＭＮ３’,其中Ｍ可以是ｄＡＴＰ,ｄＣＴＰ,ｄＧＴＰ之一,而Ｎ可以是ｄＡＴＰ,ｄＴＴＰ,ｄＣＴＰ,ｄＧＴＰ之一,进行逆转录时,１／１２的ｍＲＮＡ可被逆转录为ｃＤＮＡ。这种ｃＤＮＡ第一链被用来ＰＣＲ扩增,所使用的３’端引物与逆转录引物相同,而５’端引物为１０个碱基的一段寡核苷酸,这类任意（ａｒｂｉｔｒａｒ