属特异性T-RFLP技术用于乳酸杆菌的群落分析

【目的】设计乳酸杆菌属特异性T-RFLP技术(末端限制性片段长度多态性分析)对14株乳酸杆菌进行分型。【方法】采用源于16S-23S rRNA基因间隔区序列的乳酸杆菌属特异性引物LAB-rev,乳酸杆菌的属特异性引物,6-FAM荧光标记后结合16S上游通用引物7f用于乳酸杆菌的PCR扩增。【结果】选取HaeⅢ和HhaⅠ进行限制性酶切,最后对酶切后的产物末端测序得到T-RFLP峰谱图,该图谱能够快速准确地对不同种的乳酸杆菌进行定性、定量的分析。【结论】实验成功搭建T-RFLP技术用于微生态环境中乳酸杆菌检测的平台,对于在功能性食品、乳酸饮料和药物对肠道微生态的影响及菌种鉴定等领域有重大意义。     

痢疾杆菌福氏2a sf301DsbA/virG双突变减毒活候选疫苗构建和初步鉴定

为预防细菌性痢疾的爆发和流行,构建志贺氏福氏2a减毒活疫苗。 选用中国痢疾杆菌主要流行株sf301为受体菌,通过基因重组交换技术,突变细菌 DsbA和virG基因, 并以Serney试验和HeLa细胞侵袭实验鉴定突变菌株sf301：△virG：DsbA33G毒力和侵袭力,采用豚鼠结膜囊接种免疫动物,检测突变菌株免疫原性,了解候选疫苗对免疫动物的保护能力。 与野生亲本比较sf301: △virG：DsbA33G已完全丧失毒力,但保留了一定的侵袭力。与未接受免疫的对照组相比,通过粘膜途径免疫的豚鼠,无论是单次免疫,还是双次免疫策略都可以诱发血清和胃肠道粘膜部位产生特异性抗sf301 LPS IgG和IgA;面部、胃肠道引流淋巴结和脾脏中IgG和IgA 抗体分泌细胞（Antibody secret cells ASCs）数目显著性增高;两种免疫方案都可给免疫动物提供100%抵抗野生亲本毒株攻击的能力。初步动物实验结果提示构建的福氏2a活疫苗sf301: △virG：DsbA33G是一种潜在的候选痢疾疫苗。     

抗黄矮病小麦-中间偃麦草易位系基因组可转化人工染色体文库的构建及初步筛选

利用抗黄矮病小麦 -中间偃麦草易位系HW6 4 2的细胞核DNA构建了一个可转化人工染色体 (transformation competentartificialchromosome,TAC)文库 ,文库由 2 .3× 10 6 克隆构成 ,重组率为 90 .4 8% ,平均插入片段大小为 2 2kb左右 ,约覆盖普通小麦单倍体基因组 2 .5倍 ,在该文库中分离得到单拷贝DNA序列的几率约是 95 .77%。文库保存在 2 4块 96孔板中 ,每个孔中约含有 10 0 0个不同的重组克隆 ,可以采用PooledPCR的方法对文库进行筛选。用来源于小麦的简单重复序列 (simplesequencerepeat,SSR)引物wms37扩增中间偃麦草、抗病易位系及感病材料 ,得到一条与抗性共分离的特异条带 ,约 4 5 0bp。将此特异标记条带转化为SCAR(sequencecharacterizedamplifiedregion)标记 ,用于筛选HW6 4 2基因组TAC文库 ,得到 12个阳性克隆。对阳性克隆进行了PCR Southern验证 ,以中间偃麦草基因组总DNA为探针与限制酶HindⅢ消化后的阳性克隆杂交 ,其中 10个阳性克隆分别有 1～ 6条杂交带 ,结果表明 ,这 10个阳性克隆可作为抗黄矮病相关基因筛选的候选克隆     

关于昆虫抗癌物质的研究概况

自六十年代开始,科学工作者着手从水生生物(尤其海洋生物)和节肢动物(昆虫纲)研究抗癌药物,并已取得令人高兴的进展。本文着重谈谈从昆虫中研究抗癌药物的现状。 在自然界里,各种各样的昆虫得以生存和遗传下来,它们经受多种细菌、病毒的侵害,本身必有抗御的化学物质存在,这是一种天赋的保护机制,而使种群世代发展。这就给人们一     

新型杀螨剂—桔螨灵

<正> 桔螨灵是我们近来研制出的一种新型杀螨剂。该杀螨剂对三氯杀螨醇、乐果、苯螨特产生抗性的柑桔全爪螨及苹果红蜘蛛具有优越的防治效果,尤其是对卵、若螨、幼螨具有很高的毒杀作用,并有降低雌成螨产卵及孵化率之功效。一般使用浓度100—200ppm,残效期3—4周。     

免疫核糖核酸传递对人脑胶质瘤碱性蛋白抗原的细胞免疫反应研究

对用人脑胶质瘤碱性蛋白(GBP)免疫的38只豚鼠和23只对照组豚鼠进行了巨噬细胞电泳试验(MEM),其巨噬细胞电泳减缓率免疫组为6.13±1.06%,对照组为0.96±0.90%;经统计学处理,两组间有显著区别,表明GBP能激发豚鼠的细胞免疫反应性。从三批免疫组和三批对照组豚鼠的脾脏和淋巴结组织中分别提取I-RNA和N-RNA。将49人次健康人的淋巴细胞分别与上述RNA温育,则经I-RNA处理的淋巴细胞能对GBP产生7.73±0.97%的巨噬细胞电泳减缓作用,而经N-RNA处理的仅产生1.29±0.81%的减缓作用,经统计学处理,两组间巨噬细胞电泳减缓率有非常显著的区别,说明GBP免疫组的I-RNA能超越种间界限,使人淋巴细胞获得具有对GBP起免疫反应的能力。     

海南烟粉虱田间种群隐种鉴定及对溴氰虫酰胺和氟吡呋喃酮的敏感性检测

【目的】明确海南烟粉虱Bemisia tabaci田间种群对2种新型杀虫剂溴氰虫酰胺和氟吡呋喃酮的敏感水平,为杀虫剂的合理施用与烟粉虱的田间抗性监测提供参考。【方法】以2017年1月采自海南省6个地点烟粉虱田间种群为材料,利用线粒体细胞色素氧化酶Ⅰ基因(mtCOI)测序及mtCOI PCR-RFLP分子标记对采集种群隐种进行鉴定;采用浸叶法测定溴氰虫酰胺和氟吡呋喃酮2种药剂对各地区田间种群的致死中浓度(LC_(50))。【结果】在海南省6个烟粉虱田间种群中,三亚市吉阳区种群为MEAM1隐种,澄迈县永发镇种群和乐东黎族自治县冲坡镇种群以MED隐种为主的MEAM1(10%)与MED隐种(分别为94.6%和92.9%)混合种群,其他3个田间种群均为MED隐种。与溴氰虫酰胺敏感种群相比,除乐东黎族自治县十所种群已处于低水平抗性(RR:5~10倍),其他5个种群均处于敏感水平(RR5倍);所有6个田间种群对氟吡呋喃酮均处于敏感水平(RR3倍)。【结论】溴氰虫酰胺和氟吡呋喃酮可作为烟粉虱防控的新药剂,并可作为其抗性治理的替代药剂,但同时应密切关注烟粉虱对溴氰虫酰胺抗性水平变化情况。     

太湖全新世沉积物有机联同位素的分布及其古气侯意义

通过太湖两个钻孔岩芯有机碳同位素（１３Ｃ／１２Ｃ）的分析,发现δ１３Ｃ的垂直分布与太湖地区１６０００ａＢ．Ｐ．以来古气候波动相关。根据δ１３Ｃ垂直分布曲线可推测,大约在１１０００—６０００ａＢ．Ｐ,太湖地区处于温暖湿润期,气温高于现在平均温度。另一方面,根据太湖两岩芯沉积物的δ１３Ｃ值的对比发现,大约在１１０００—６０００ａＢ．Ｐ,西太湖（Ｗ１Ｂ）岩芯沉积物的δ１３Ｃ平均值明显高于东太湖（Ｅ２Ｂ）。据此可认为,在这一期间西太湖很可能有过海水侵入。     

不同植被类型对土壤水蚀的影响

不同植被类型对土壤水蚀的影响因子是计算土壤水蚀速率以及选择适当土地利用方式的基本参数.本文以土壤侵蚀模型中的植被因子(C因子)为指标,研究不同植被类型对土壤水蚀的影响.根据6个水土保持试验项目33个小区共195个小区年的资料,计算了剌槐、柠条、沙棘、沙棘-杨树,沙棘-油松、沙打旺、红豆草、苜蓿和草木樨等9种林草植被因子值.林地植被因子介于0.004到0.164之间,以刺槐林的C值最低.草地植被因子介于0.071到0.377之间,以第一年的草木樨C值为最高.定量对比说明林草植被的水土保持效益明显优于农作物.本项研究结果可以用于定量比较不同植被类型覆盖下的土壤流失速率,对于北方农牧交错带退耕还林还草政策的实施具有参考价值.