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水稻重复序列RRD3在CHO和3T3细胞中的启动子活性 总被引:3,自引:0,他引:3
RRD3是通过变性 -复性动力学从水稻基因组中克隆到的一个中度重复序列 .将 RRD3作为启动子亚克隆到氯霉素乙酰基转移酶基因为报告基因的 p CAT载体上 ,转染 5种动物细胞 .结果表明在 CHO、3T3细胞中能够启动 CAT基因的表达 .利用核酸外切酶 和 PCR构建了 RRD3的系列缺失体 ,经转染后的 CAT活性分析表明 ,该序列中存在多个与哺乳动物细胞中启动基因表达有关的调控元件 .结合 RRD3在大肠杆菌和高等植物烟草中启动报告基因表达的活性 ,对重复序列与生物进化的关系进行了讨论 . 相似文献
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胡萝卜体细胞胚胎发生培养物cDNA的分子克隆和选择 总被引:1,自引:0,他引:1
从13日龄的胡萝卜Woolc细胞株培养物分离PolyA+mRNA,按Leonard程序合成双链cDNA,将cDNA甲基化、末端变平,并与EcoR I接头连接之后再与λgtll DNA连接构成重组DNA分子,经离体包装,构建得到一个复杂度为1.5×106的cDNA文库。组织特异的cDNA克隆用与胚胎组织抗原特异反应的多克隆抗体进行筛选得到。 相似文献
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甜樱桃胚胎离体培养 总被引:4,自引:0,他引:4
甜樱桃(Cerasusavium)果实采收后贮藏在40℃下30~40d。除去果肉,将内果皮撬开后,取出胚放在无菌水中浸泡30min,70%乙醇中30s,再用0.2%HgCl2或2%~4%NaOCI表面灭菌20min,最后用无菌水冲洗4次。将胚切成两部分,一部分带有胚珠(大小为整个胚的2/3),另一部分为子叶。将带有胚珠的外植体接种在诱导培养基(MS+0.5ms·*-‘6-BA+2%蔗糖十0.8%琼脂)上,20d后观察统计胚胎发育类型。然后,将外植体发育成的植株切除或保留主根转入增殖培养基(MS+0.5mg·L-‘6-BA+2%蔗糖十0.8%琼脂)。切除主根的试管苗培… 相似文献
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应用随机引物PCR(RandomPrimerPCR)技术分别在水稻广亲和基因(WCG)的近等基因系和色素原基因(C)的分离群体库中寻找与WCG和C基因连锁的分子标记。对于WCG近等基因系,在226个随机引物中初筛到22个显示多态性片段的引物。根据理论值计算,在22个多态性片段中预期有20个与WCG连锁。在这些连锁标记中距WCG最近的可达0.5cM。同样在分离群体库的筛选中有10个扩增产物与C基因连锁。 相似文献
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从水稻细胞核中制备分子量达到Mb级的DNA 总被引:1,自引:0,他引:1
用水稻黄化苗作实验材料,经蔗糖不连续梯度纯化细胞核、琼脂糖包埋、蛋白酶消化释放DNA,脉冲交变电泳显示所得DNA样品分子量在200kb至3Mb之间,其中大量集中在2.2Mb处.所得DNA容易被多种内切酶消化和连接,可用于构建水稻YAC文库和大尺度物理图的研究. 相似文献
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珍稀香辛植物山葵的生物学特性及栽培技术 总被引:2,自引:0,他引:2
山葵(EutremawasabiMaxim)又名山嵛菜,为十字花科多年生草本半阴生植物,原产中国和日本,其根状茎磨成粉,会产生特殊芳香的辛辣味,具有强烈的杀菌和助消化功能,还能促进淀粉性食物的消化及稳定肠胃中维生素C的功能,在日本及东南亚,山葵是鲜食... 相似文献
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该文报道强诱变剂丝裂霉素C(MMC)和化学溶剂二甲基亚砜(DMSO)在家蚕蛹体内对家蚕核型多角体病毒(BmNPV)的诱变结果。MMC对BmNPV具有诱变效应: (1)导致蚕蛹发病时间延迟,发病死亡率下降,有显著的剂量效应;(2)部分病蛹体内发生异常形态多角体,继代试验证实具有遗传稳定性。其中具对角线裂痕的四角形超大多角体(15.0-30.0, um)尚属首次发 现;(3)诱变的BmNPV多角体内部结构发生变化;(4)诱变的BmNPV-DNA经EcoRI、Bgl II和 Bam HI酶切消化,其电泳图谱出现某些DNA泳带的增加或丢失。以上结果说明,MMC可能诱导BmNPV基因组发生了多处位点的突变。DMSO处理剂量在9.0 μL/蛹及其以下各剂量组,对BmNPV无诱变效应。 相似文献
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分别以G200及其旁侧区的Y2587L、Y4073L和L688片段为探针筛选水稻基因组YAC文库,共得到4个阳性克隆,均与G200、Y2587L和Y4073L座位重叠,插入片段的大小为240~650kb。用反向PCR法分离YAC克隆插入片段的末端序列,并利用这些末端序列确定克隆的方向以及进行染色体步查,共筛选到7个YAC克隆,建立了一个8厘摩(cM)的G200 YAC重叠群。 相似文献