枯草芽孢杆菌抗脯氨酸结构类似物突变株的筛选及突变株proBA基因的克隆和序列分析

利用亚硝基胍对枯草芽孢杆菌93151进行诱变处理,获得了耐NaCl浓度达14％的突变株,同时发现该突变株也是一个抗脯氨酸反馈抑制突变菌株,其胞内自由脯氨酸的含量随着盐浓度的提高显著增加,说明其对渗透压的耐受能力与胞内自由脯氨酸的含量紧密相关。利用PCR方法克隆突变株的proBA基因,得到一个约2.3kb的DNA片段,序列分析表明该片段含有一完整的proB基因和部分proA基因,与野生菌株的proB基因相比,突变株proB基因中有3个碱基发生了改变,其中一个碱基的变化（从起始密码子开始第781位由T→A）导致了一个氨基酸发生改变（Ser→Thr),另外两个碱基变化为沉默位点突变。将该proB基因转入大肠杆菌脯氨酸营养缺陷型菌株,能够与其功能互补。同时对部分proA基因序列分析发现,其与proB基因头尾重叠。在proA基因起始密码子上游第14个碱基处有一个类似于SD的序列,其所编码的氨基酸序列与枯草芽孢杆菌168的同源性为77％。     

渗透压调节基因proBA的融合表达对大肠杆菌耐高渗胁迫能力的影响

枯草芽孢杆菌 9315 1的渗透压调节基因proB和proA以重叠基因的方式组织 ,但是表达两个单独的蛋白质ProB和ProA。通过引物设计 ,在抗脯氨酸反馈抑制耐盐突变菌株 9315 1 14的proBA基因重叠区引入一个限制性酶切位点 ,分别扩增出proB和proA基因 ,并构建融合的proBA基因。SDS PAGE分析显示有一条新的分子质量约为85kD的蛋白带出现。相对于表达未融合的proB和proA ,proBA融合基因的表达明显提高了宿主菌大肠杆菌JM83胞内游离脯氨酸含量和其耐高渗胁迫能力     

多沙唑嗪光学异构体对高血脂家兔血脂水平的影响

目的:观察左旋多沙唑嗪(-)DOX、右旋多沙唑嗪(+)DOX和消旋多沙唑嗪(±)DOX对高血脂家兔血脂水平及动物死亡率的影响。方法:取普通级雄性新西兰大耳白兔,给予高脂饮食4周后,血清TC小于10mmol/L的8只家兔为普通饮食组,饲以标准饲料。血清TC大于10mmol/L的40只家兔随机分为4组(n=10):高脂模型组、高脂模型+(-)DOX组、高脂模型+(+)DOX组以及高脂模型+(±)DOX组。普通饮食组和高脂模型组家兔腹腔注射无菌双蒸水;其他3组家兔分别腹腔注射(-)DOX、(+)DOX和(±)DOX,连续9周。分析药物对兔血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果:饲以高脂饮食13周时模型组家兔死亡率达40%,远远高于普通饮食组家兔(10%),亦明显高于(±)DOX和(-)DOX处理组。模型组家兔随高脂饲养的时间延长,血清LDL-C水平进一步显著升高(P0.05和P0.01);而各药物处理组动物的血清LDL-C水平未显著升高(P0.05)。结论:(-)DOX和(±)DOX可提高高脂饮食家兔的生存率,并对高血脂家兔的血清LDL-C紊乱具有轻度的改善作用;该作用可能不是其提高高脂饮食家兔生存率的主要作用机制。     

金佛山自然保护区首次发现白颊黑叶猴

据资料记载,我国黑叶猴主要分布于广西和贵州的部分地区,四川省尚未见黑叶猴分布的报道。1980—1991年间,我们在金佛山渔泉后河村的猎户家收购到白颊黑叶猴(Presbytis francoisi francoisi Pousargues)标本两具,一雌一雄。雌体长41、尾长75、后足长22、耳长3.4cm,体重11.5kg;雄体长44、尾长86、后足长24、耳长3.5cm,体重13.4kg。1991年8月     

手术全期护理应用体会

目的: 对在手术室中进行手术治疗患者采用全期护理干预的效果进行分析。方法: 选取2010年11月—2013年6月在我院进行手术治疗的患者201例,随机分为两组患者,常规组患者100例,采用常规护理干预措施,全期护理组患者101例,在常规手术基础上进行手术全期护理干预措施,对比两组患者的护理效果。结果: 全期护理组患者的平均手术时间、住院治疗时间、术后患者护理满意度、合并症发生率显著优越于常规护理组患者,差异性显著,具有统计学意义(P<0.05)。两组患者均未发生因护理干预措施导致严重不良后果发生。结论: 针对手术患者在常规护理干预措施基础上应用手术全期干预措施,可显著缩短平均手术时间、住院治疗时间;显著提高患者术后满意度,降低术中并发症发生,安全性较高,适宜针对手术患者广泛应用和开展。     

胸腔镜辅助小切口与传统开胸手术对胸外伤患者凝血功能及预后的影响

目的:探讨胸腔镜辅助小切口(VTAMS)与传统开胸手术对胸外伤患者凝血功能及预后的影响。方法:回顾性选取2017年7月~2019年2月期间我院收治的胸外伤患者91例,根据手术方式的不同分为A组(n=44,行传统开胸手术)和B组(n=47,行VTAMS手术),比较两组患者围术期指标、术前及术后7d的凝血功能指标、术后并发症发生情况及病死率。结果:B组术中出血量、术中输血量少于A组,手术时间、住院时间短于A组(P<0.05)。两组患者术后7d活化部分凝血酶原时间(APTT)、血小板(PLT)较术前降低,D-二聚体(DD)、凝血酶原时间(PT)较术前升高(P<0.05);B组术后7d的APTT、PLT高于A组,DD、PT则低于A组(P<0.05)。B组术后并发症发生率为10.64%(5/47),低于A组的27.27%(12/44)(P<0.05)。B组病死率为2.13%(1/47),低于A组的15.91%(7/44)(P<0.05)。结论:与传统开胸手术相比,胸外伤患者应用VTAMS手术治疗,可改善围术期指标,对凝血功能影响较轻,减少术后并发症的同时还可降低病死率。     

小菜蛾溶菌酶Pxlys的基因克隆及其重组蛋白的抗菌活性分析

[目的]本研究旨在通过研究小菜蛾Plutella xylostella溶菌酶的功能,进一步认识小菜蛾的免疫防御机理,为小菜蛾的生物防治提供新的思路.[方法]利用RACE技术克隆小菜蛾溶菌酶基因.构建原核表达载体pET-29a-Pxlys,利用原核表达系统表达并用镍柱亲和层析纯化重组蛋白Pxlys.利用牛津杯法检测重组蛋...     

超声引导下星状神经节阻滞对脊柱手术患者的应用效果及对消化功能、应激反应的影响

摘要 目的：探讨超声引导下星状神经节阻滞对脊柱手术患者的应用效果及对消化功能、应激反应的影响。方法：选取我院2020年1月到2023年1月收治的60例脊柱手术患者作为研究对象,分为观察组与对照组,每组30例。对照组患者采取静脉全身麻醉,观察组患者在超声引导下行星状神经节阻滞麻醉后再行静脉全身麻醉诱导,对比两组患者术中不同时间生命体征变化,手术前后谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-px）、超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）相关应激因子变化,并对比两组患者术后2 h、术后6 h、术后12 h和术后24 h视觉模拟量表（VAS）评分,对比患者消化功能恢复时间及15项恢复质量评分量表（QoR-15）评分。结果：T₁到T₄时间观察组SPO₂、HR、MAP、DBP、SBP对比无明显差异（P＞0.05）,T₁到T₄时间对照组SPO₂、HR、MAP、DBP、SBP对比差异显著（P＜0.05）,T₂和T₃时间观察组与对照组患者SPO₂、HR、MAP、DBP、SBP对比具有显著差异（P＜0.05）;两组患者手术前GSH-px、MDA、SOD对比无明显差异（P＞0.05）,术后2h两组患者GSH-px、SOD、MDA均升高,观察组低于对照组（P＜0.05）;观察组患者术后2 h、术后6 h、术后12 h的VAS评分明显低于对照组（P＜0.05）,两组患者术后24 h的VAS评分对比无差异（P＞0.05）;观察组患者术后24 h、术后48 h、术后72h的QoR-15评分明显低于对照组（P＜0.05）,观察组患者消化功能恢复时间短于对照组（P＜0.05）。结论：超声引导下星状神经节阻滞可稳定患者生命体征,减轻患者应激反应,改善术后短期疼痛情况,促进消化功能恢复。     

重庆市北碚区宠物源沙门氏菌耐药性监测及ESBL和PMQR基因检测

【背景】沙门氏菌是一种常见的人兽共患病病原菌。随着饲养宠物的人越来越多,宠物肠道内沙门氏菌对公共卫生的威胁逐渐显现,但鲜见宠物携带沙门氏菌的流行病学及宠物源沙门氏菌耐药性的报道。【目的】了解重庆市北碚区宠物源沙门氏菌的流行情况,以及其对常用抗菌药物的敏感性及超广谱β-内酰胺酶(Extended-Spectrumβ-Lactamases,ESBL)基因和质粒介导的喹诺酮耐药(Plasmid-Mediated Quinolone Resistance,PMQR)基因的携带情况。【方法】共采集北碚区宠物粪便样品1 038份,通过样品前增菌、选择性增菌、选择性平板筛选和PCR鉴定沙门氏菌特异性invA基因分离鉴定沙门氏菌;接着测定了分离菌株对28种抗菌药物的敏感性,检测了10种ESBL基因和10种PMQR基因。【结果】共分离到沙门氏菌41株,分离率为3.95%。这些菌株对磺胺异噁唑、氨苄西林、四环素、多西环素的耐药率都超过50%,而且82.92%为多重耐药菌株,对阿米卡星、氧氟沙星、依诺沙星、加替沙星完全敏感;85.37%的分离菌携带ESBL基因,以blaTEM基因最为流行;46.34%携带PMQR基因,以qnrS最为流行;48.57%的ESBL阳性菌株携带至少一种PMQR基因。【结论】北碚区宠物体内的沙门氏菌对一些抗菌药物存在不同程度的耐药性,而且耐药性可能是通过耐药质粒介导的。     

血清β2-MG、Cys-C及肾功能相关指标在肾病综合征中的水平及临床意义分析

摘要 目的：分析血清β2微球蛋白（β2-MG）、胱抑素C（Cys-C）及肾功能相关指标[24 h尿蛋白排泄率（UPE）、尿素（BUN）、肌酐（SCr）]在肾病综合征中的水平及临床意义。方法：选择我院自2019年3月至2022年3月收治的180例肾病综合征患者作为观察组,另选同期的180例健康体检者作为对照组。检测所有受试者血清β2-MG、Cys-C及肾功能相关指标;根据观察组患者治疗转归情况,分为转归组和未转归组,使用多因素Logistic回归分析血清β2-MG、Cys-C及肾功能相关指标与肾病综合征患者治疗未转归的关系,通过ROC下面积（AUC）评价血清β2-MG、Cys-C及肾功能相关指标对治疗未转归的预测效能。结果：观察组血清β2-MG、Cys-C、UPE、BUN、SCr水平均高于对照组（P＜0.05）;未转归组血清β2-MG、Cys-C、UPE、BUN、SCr水平均高于转归组（P＜0.05）;经多因素Logistic回归分析,血清β2-MG、Cys-C、UPE、BUN、SCr均是肾病综合征患者治疗未转归的独立预测因素（P＜0.05）;经ROC曲线分析,血清β2-MG、Cys-C、UPE、BUN联合SCr预测肾病综合征患者治疗未转归的AUC为0.910。结论：血清β2-MG、Cys-C及肾功能相关指标与肾病综合征密切相关,联合预测患者治疗未转归的效能较好,值得临床予以重视应用。