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51.
SM22α:血管平滑肌细胞分化的分子标志 总被引:7,自引:0,他引:7
SM22α是一种分化型血管平滑肌细胞(VSMC)的标志基因,编码一种22kDa的收缩调节蛋白。由于SM22α基因结构短小,表达具有VSMC特异性、调控机制较为清楚,因而被广泛用于VSMC发育分化的研究。利用该基因的表达调控特征,设计可在VSMC中高表达目的蛋白的人工启动子,是心血管病基因治疗的新策略。 相似文献
52.
hhlim促进DMSO诱导的P19细胞向心肌分化 总被引:3,自引:0,他引:3
为了确定hhlim是否参与胚胎期的心肌分化和发育过程,用可表达hhlim蛋白和hhlim反义RNA的真核表达质粒转染P19胚胎干细胞,经G418筛选得到稳定表达hhlim和hhlim反义RNA的P19细胞克隆后,观察hhlim对P19细胞向心肌分化和发育的影响.结果显示,Nkx2.5和GATA-4在未被外源性hhlim基因转染的P19细胞中不表达.DMSO刺激细胞2天后,GATA-4开始表达,3天后Nkx2.5的表达活性显著升高.hhlim的过表达不但有利于P19细胞的存活和生长,而且还可以使Nkx2.5和GATA-4的表达比对照细胞提前1天.反义hhlim细胞株被DMSO诱导5天后,细胞仍呈集落化生长.同时,Nkx2.5和GATA-4开始表达的时间明显延滞.结果表明,hhlim能促进P19细胞向心肌细胞分化,其作用是通过促进转录因子GATA-4和Nkx2.5的表达而实现的. 相似文献
53.
重组人EPO真核表达质粒在大鼠骨骼肌中的表达及其对贫血的治疗作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的和方法构建EPO真核细胞表达载体(pcD2EPO),用缝线法和注射法将其直接导入肾性贫血大鼠股四头肌,观察EPO在骨骼肌细胞中的表达及其对贫血的治疗作用。结果:pcD2EPO导入股四头肌2周后,骨骼肌细胞内出现EPOmRNA,提示被导入的EPO基因在肌细胞内得到表达。贫血动物被治疗1周后,缝线组和注射组动物的HGB和RBC均显著升高;在第3周,缝线组的HGB和RBC接近健康大鼠的水平;至第4周,两个治疗组的HGB和RBC仍显著高于对照组。结论:经缝线法导入的pcD2EPO在骨骼肌中的表达效率及对贫血的治疗效果明显高于直接注射法,而两种治疗方法对改善肾性贫血动物肾脏清除BUN的功能无明显差异 相似文献
54.
红细胞生成素(erythropoietin,EPO)是一种由胎儿肝脏和成人肾脏产生的多肽类生长因子,在体内的表达具有严格的组织特异性,因此,慢性肾病所引起的贫血常常难以得到有效的治疗.随着基因治疗技术的不断成熟与完善,尤其是近年一些实验室先后发现质粒... 相似文献
55.
血管再狭窄发生过程中MMP-2基因表达与胶原转换的动态变化 总被引:18,自引:0,他引:18
建立主动脉内皮剥脱后血管再狭窄大鼠模型,用Northern 印迹分析、含明胶SDS-PAGE、羟脯氨酸含量测定及流式细胞术动态观察血管再狭窄发生过程中MMP-2基因表达与胶原转换及血管细胞增殖之间的关系.实验结果表明,血管内皮剥脱后,MMP-2基因表达被显著诱导,MMP-2活性及胶原转换明显增高,在第7 d,MMP-2表达活性及胶原合成与降解均达到峰值;第21 d,MMP-2表达恢复正常,胶原合成和降解仍维持在较高水平.流式细胞分析结果显示,血管内皮剥脱后进入增殖状态及发生凋亡的细胞显著增加,增殖细胞所占比例高于凋亡细胞,且两者均随内皮损伤后的时间延长而增加. 相似文献
56.
57.
大鼠诱导型一氧化氮合酶基因转录调控区的克隆与鉴定 总被引:2,自引:0,他引:2
采用单特异引物PCR克隆法,得到大鼠诱导型一氧化氮合酶(iNOS)基因转录调控区DNA片段。核酸序列分析证实,大鼠iNOS基因的5'-侧翼区含有IFN-γ和TNF-α应答元件及NF-kB结合位点的保守序列。这些保守序列的位置及排列显区别于人和小鼠的iNOS基因。电泳迁移率改变分析(EMSA)表达,VSMC受IL-1和IFN-γ刺激后,细胞核内产生某种可与iNOS基因5'-侧翼区特异结合的核蛋白因 相似文献
58.
将克隆载体平端切割后,向反应体系中加入dTTP,用TaqDNA聚合酶处理载体,使其3-端带上一个凸出的单碱基T,修饰后的载体可直接与纯化的PCR产物连接。 相似文献
59.
大鼠iNOS基因上游调控区在转录激活中的作用 总被引:2,自引:2,他引:0
为了探讨大鼠iNOS基因上游调控区不同部位在对细胞因子诱导应答中所起的作用,将调控区不同部位插入pSV0-CAT报告基因载体,转染体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC),经IL-1β诱导后,采用氯霉素乙酰转移酶(CAT)活性测定和Northern印迹杂交,检查了调控区各部位在IL-1β诱导cat表达中所起的作用.结果表明,被转染的细胞在未经IL-1β刺激时,各种调控区序列启动cat表达的活性均很低.在IL-1β作用下,调控区远端序列(-1037~-438)、近端序列(-437~+46)和全长序列(-1037~+46)均能独立激活cat表达,其中以全长序列的作用最强,表明iNOS基因表达调控区远端和近端序列均具有启动子和增强子样功能.同时证实,远端序列和近端序列单独启动cat表达的活性分别为全长序列的91.3%和67.1%,揭示大鼠iNOS基因调控区远端序列在介导IL-1β的应答反应中发挥更重要作用. 相似文献
60.