香菇转录本Unigene 10627过氧化物酶结构域的克隆表达及抗氧化活性研究

目的分析香菇C91-3转录本Unigene 10627基因的结构域,并对其进行诱导表达,初步探讨所得目的蛋白的抗氧化活性。方法将香菇C91-3菌丝体中总RNA提取出来,通过反转录获得cDNA文库,根据反转录结果,通过3′-RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends),5′-RACE技术扩增获取基因全长。通过生物信息学方法预测基因的结构域,利用PCR技术扩增该目的片段,将扩增产物连接到原核表达载体pET32a(+)上,采用热转化法转至E.coli Rosetta-gami(DE3)中进行诱导表达,对目的蛋白进行分离、纯化及鉴定。采用二苯代苦味酰自由基(2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl,DPPH)法检测蛋白的抗氧化活性。结果成功获得基因全长,预测结果表明该基因具有染料脱色过氧化物酶结构域(DyP_Perox),双酶切结果证实目的片段成功插入,并通过诱导表达获得目的蛋白。结论目的蛋白成功表达,且具有抗氧化活性,为进一步研究其生物学活性提供基础。     

更正医学微生物学教材中巴斯德制备狂犬病疫苗的一处描述错误

在目前供临床医学专业使用的人民卫生出版社出版的《医学微生物学》教材中,关于巴斯德研制狂犬病疫苗的过程有一处描述错误,即兔脑中的固定毒株对人或犬的致病性"明显减弱",本文根据文献特此更正为"明显增强",并利用现今的免疫学原理解释了当时疫苗发挥作用的机制。同时也对巴斯德的学术贡献略加叙述,让医学生对疫苗背后的人文知识有所了解。     

干旱胁迫对降香黄檀(Dalbergia oderifera)种子发芽及幼苗生长的影响研究

通过采集当年降香黄檀种子进行苗床播种试验,试验设计1 d、3 d、5 d、7 d以及CK浇水时间梯度,以对比不同干旱胁迫下降香黄檀生长差异。结果得到,不同干旱胁迫程度均会对降香黄檀幼苗的发芽率、发芽时间、叶量、根长等产生影响。此外,随着干旱胁迫逐渐增加,叶绿素相对含量、叶绿素相对含量增长率均下降;3 d组株高较高,CK组株高较低。5 d组基径较大,干旱程度减轻或加重均使植株基径显著下降;地上(下)生物量、全株生物量较高和较低均为3d组和CK组,3d组分别较CK组高4.5倍、3.2倍和4.5倍;1d和3d组幼苗根系根瘤数较多,而CK较少,干旱胁迫程度增加植株根系根瘤数逐渐下降;1d脯氨酸含量较低(7.4μg/g),而CK含量较高(16.3μg/g),CK组脯氨酸含量是1d的2.2倍,叶片脯氨酸含量随着干旱程度的增加而递增,而植物根冠比随干旱胁迫程度的变化与脯氨酸一致。     

近20年中国部分地区鸡源H9N2亚型禽流感病毒HA基因遗传演化及其变异频率北大核心CSCD

【目的】通过比较不同时期的H9N2亚型禽流感流行毒株HA基因的分子特征和变异频率,揭示免疫压力下病毒的遗传演化趋势。【方法】选取源于课题组的40株鸡源H9N2毒株,以及从Gen Bank下载的136株中国鸡源H9N2流行毒株和7株经典毒株的序列,利用Lasergen 7.1和MEGA 5.1等软件,对其HA基因进行系统演化、分子特征和变异频率分析。【结果】系统发育分析表明,近20年的鸡源H9N2流行株分属于BJ94、Y280和S2等谱系,优势流行株的分布与年代密切相关。氨基酸序列比较显示,H9N2病毒不同谱系之间具有各自的特征,且存在着明显的氨基酸变异积累。以Ck/BJ/1/1994 HA基因为参照,1994–2014年间,H9N2流行株核苷酸和氨基酸的年均进化率分别为5.73×10^(–3)和4.25×10^(–3)。其中,2011–2014年的核苷酸(氨基酸)年均进化率为6.35×10^(–3)(5.32×10^(–3)),明显高于2006–2010年5.22×10^(–3)(3.70×10^(–3)),更显著高于疫苗推广初期1999–2005年的0.74×10^(–3)(0.50×10^(–3))。【结论】H9N2疫苗株和流行毒株的不匹配是病毒变异频率加快的重要原因。     

D609 对Neuro-2a 脑神经瘤细胞增殖和细胞周期的影响

目的:探讨小分子化合物D609对脑神经瘤细胞Neuro-2a的生长抑制及诱导细胞周期阻滞的效应,并初步研究其机制。方法:采用CCK-8法检测D609对Neuro-2a细胞的生长抑制作用;利用流式细胞术(FACS)检测D609处理对细胞周期进程的影响;利用免疫印迹实验(Western blot)检测不同浓度的D609处理后,细胞裂解液中细胞周期蛋白抑制因子p27的表达水平。结果:CCK-8的实验结果显示,加入150μmol/L D609处理72小时后,细胞生长受到明显地抑制,且伴有剂量依赖效应;流式细胞术的结果表明,D609处理使细胞周期阻滞在G0/G1期;免疫印迹的结果表明药物处理提升了p27的表达,且随药物浓度升高其表达亦增强。结论:D609可以有效地抑制Neuro-2a细胞的生长;进一步研究表明药物处理可以提升p27的表达水平并可以诱导将细胞阻滞在G0/G1期。因此,此研究将为脑神经瘤的治疗提供借鉴。     

eIF-4E 和MMP9 在子宫内膜癌中的表达及临床意义

目的:探讨真核翻译起始因子4E(e IF-4E)和基质金属蛋白酶9(MMP9)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化法检测e IF-4E和MMP9在16例正常子宫内膜组织、10例增生子宫内膜组织及42例子宫内膜癌组织中的表达,分析其与子宫内膜癌临床病理之间的关系,并研究二者的相关性。结果:e IF-4E与MMP9在三组组织中的表达阳性率逐渐增加,三组间的差异有统计学意义(P0.05),两两比较,正常内膜和内膜癌之间的差异有统计学意义(P0.0167)。e IF-4E和MMP9的表达与子宫内膜癌的FIGO分期、组织学分级及淋巴结转移具有显著相关性(P0.05);子宫内膜癌组织中e IF-4E与MMP9的阳性表达呈正相关(r=0.717,P0.05)。结论:e IF-4E和MMP9在子宫内膜癌组织中表达显著上调,随FIGO分期的增加、组织学分级的增高及有淋巴结转移而增高,可能与子宫内膜癌的发生发展相关,二者的联合检测对于评估子宫内膜癌患者的病情及预后有重要的参考意义。     

鸢尾属植物的传粉者吸引及异交策略

已知鸢尾属（Iris）植物约有280种且花部特征多变,具有较高的科研和观赏价值。尽管该属植物具备一定的克隆和自交繁殖能力,但传粉者介导的异交仍在其物种和遗传多样性的维持中发挥重要作用,然而目前仍缺乏对该属植物传粉者吸引及异交策略的系统性总结。本文首先简述了鸢尾属植物的传粉者种类及其适应动物传粉的花部构造,以明确其动物传粉概况。在此基础上,详细论述了该属植物如何通过视觉和嗅觉信号呈现花粉、花蜜和热量报酬供给等策略,实现对传粉者的有效吸引。在传粉者访问前后,鸢尾属植物还可通过合理的花展示、单花内雌雄功能的时空隔离以及传粉后的调控以实现最大程度的异交。此外,影响其传粉者吸引及异交的第三方生物和非生物因素,如食花者和资源配置,也应受到重视。今后随着相关研究的深入和技术手段的革新,研究者应针对鸢尾属植物传粉的热点或有争议的问题,采用花信号定量测定及异交率分子检测等先进技术,通过大范围的对比研究,深入揭示鸢尾属植物与传粉者的互作模式及其繁殖策略。     

泥鳅和白鲢胚胎不同发育时期耗氧量的研究

泥鳅和白鲢胚胎发育时的耗氧量是随着发育进程而以指数函数方式在增长,其耗氧曲线显示出卵裂期、原肠期、神经胚期、肌肉效应期以及出膜期是5个呼吸代谢水平较高的时期,其中又以原肠期与出膜期对孵化环境溶氧的需求尤为突出。胚胎在发育过程中纳入氧的快慢与强弱,都直接或间接地反映出新陈代谢的速度以及营养物质不断地被氧化、消耗和能量传递的状况。因此,鱼类胚胎发育时耗氧的高低,无疑是其胚胎发育状况的一种生理指标。     

臭椿生物碱canthin-6-one对小鼠镇静催眠作用的研究

摘要 目的：研究臭椿生物碱canthin-6-one对小鼠的镇静催眠作用。方法：选昆明小鼠随机分为空白组、地西泮阳性药物组、canthin-6-one低、中、高给药组（5、10、20 mg?kg^-1），采用阈上剂量和阈下剂量戊巴比妥钠诱导小鼠睡眠，记录入睡小鼠比例、睡眠潜伏期和睡眠持续时间。此外，酶联免疫法测定小鼠脑组织中5-HT、NE、DA和GABA含量。结果：中、高剂量canthin-6-one可使小鼠的站立次数和自主活动次数均明显减少（P＜0.05），可使阈上剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠的睡眠潜伏期缩短（P＜0.05）；各剂量组可使阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠入睡率提高（P＜0.05）。此外，中、高剂量canthin-6-one也可降低小鼠脑组织中5-HT和NE含量，增加GABA含量（P＜0.05），对DA的含量有影响，但无统计学意义（P＞0.05）。结论：Canthin-6-one有明显的协同戊巴比妥钠改善睡眠作用，其作用与相关神经递质（5-HT、NE、GABA）具有密切关系。     

慢性阻塞性肺疾病患者中血清亲环素A、趋化因子CX3CL1表达水平及临床意义

摘要 目的：探讨慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者中血清亲环素A（CyPA）、趋化因子CX3CL1以及其他炎性指标的表达水平及其临床意义。方法：选取2019年1月-2021年6月本院收治的COPD患者120例作为研究对象,其中68例患者为急性加重期组,52例患者为稳定期组;另选取体检健康者45例作为对照组。收集所有受试者的临床资料,检测其血清中CyPA、CX3CL1、C反应蛋白（CRP）、白细胞介素-6（IL-6）以及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）水平,比较3组患者各参数的差异,并与肺功能进行相关性分析,比较急性加重期患者治疗前后各指标的差异。结果：急性加重期组患者的血清 CyPA、CX3CL1、CRP、IL-6、MMP-9水平均明显高于稳定期组和对照组患者,稳定期组患者的血清 CyPA、CX3CL1、CRP、IL-6、MMP-9水平均明显高于对照组患者（均P＜0.05）;而急性加重期组患者的第1s用力呼气量（FEV₁）、用力肺活量（FVC）、第1s用力呼气量（FEV₁）与用力肺活量（FVC）的比值（FEV₁%）、最大呼气峰流速（PEF）以及最大呼气中期流速（MMEF）明显低于稳定期组和对照组患者,稳定期组患者的FEV₁、FVC、FEV₁/FVC、PEF、MMEF明显低于对照组患者（均P＜0.05）。COPD患者的血清CyPA、CX3CL1、CRP、IL-6、MMP-9水平与FEV₁、FVC、FEV₁/FVC、PEF、MMEF呈负相关（P<0.05）。与治疗前相比较,急性加重期组患者在治疗后血清CyPA、CX3CL1、CRP、IL-6、MMP-9水平明显下降,而FEV₁、FVC、FEV₁/FVC、PEF、MMEF明显上升（均P＜0.05）。结论：COPD患者的血清CyPA、CX3CL1、CRP、IL-6、MMP-9水平可在一定程度上预测患者的严重程度,同时也可以作为急性加重期治疗后效果的评价指标。