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重组人血清白蛋白在Pichia pastoris中分泌表达影响因素的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
为获得高产稳产重组人血清白蛋白的Pichia pastoris细胞株用于高密度发酵,构建了多种分泌表达载体,在Pichia pastoris中作表达,研究表达载体构建等因素对表达量的影响。发现采用酿酒酵母α性成熟因子前导肽比人血清白蛋白天然前导肽作为分泌信号肽的表达量要高10%左右。而载体整合方式、整合拷贝数、5’非翻译区的改造和甲醇利用表型等对表达量无规律性影响。筛选到的高表达株经高密度发酵,细胞湿重达460 g/L,发酵液上清的人血清白蛋白含量为1.0 g/L。 相似文献
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为观察新型磷酸二酯酶5 (phosphodiesterase 5, PDE5)抑制剂CPD1对单侧肾脏缺血再灌注损伤(unilateral renal ischemiareperfusion injury, UIRI)后肾间质纤维化的影响,本文采用夹闭(35 min) BALB/c小鼠肾蒂建立UIRI动物模型,造模2 h后每天给予CPD1 (5 mg/kg)灌胃治疗,术后第10天切除对侧肾脏,第11天取患侧肾脏。通过HE、Masson三色和天狼星红染色观察肾组织结构损伤和胶原沉积情况,利用免疫组织化学染色、蛋白质印迹技术分析肾脏组织、大鼠肾脏成纤维细胞(NRK-49F)、人肾小管上皮细胞(HK-2)中纤维化标志蛋白的表达。结果显示:与假手术组相比,UIRI小鼠肾脏中出现明显的肾小管上皮细胞损伤和间质纤维化,I型胶原(collagen I)、纤维连接蛋白(fibronectin)、纤溶酶原激活物抑制剂1型(plasminogen activator inhibitor-1, PAI-1)及α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin, α-SMA)表达显著增加;CPD1... 相似文献