中国楤木根皮多糖超声提取工艺及含量测定

为了筛选超声提取中国楤木根皮粗多糖的工艺,以中国楤木根皮多糖得率为衡量指标,采用水提醇沉法,对中国楤木根皮粗多糖超声提取工艺中提取时间、提取温度、超声功率、料液比4个因素用正交设计法进行优化研究。结果表明:中国楤木根皮粗多糖超声提取最佳工艺为温度70℃,料液比1∶30(g/m L),提取时间80 min,超声功率100 W,此工艺下多糖得率为11.13%。该方法提取的多糖测得稳定性、重现性均良好。所得到的优化提取工艺准确可靠,保证了中国楤木根皮多糖的有效提取。     

珍珠鸡胚对几种病毒的抵抗力试验

珍珠鸡是一类具有天然抗病能力的禽种。珍珠鸡对传染性支气管炎、火鸡黑头病、传染性喉气管炎、鸡马立克氏病等有较强的抵抗力[1～ 3] ,珍珠鸡可发生新城疫、鸡白痢、传染病法氏囊炎 ,曲霉菌病[1,4～ 6 ] ,但未能对珍珠鸡的抗病力作明确验证。本试验以珍珠鸡胚为试验对象 ,用新城疫病毒(ＮＤＶ)、传染病法氏囊炎病毒 (ＩＢＤＶ)、传染性支气管炎 (ＩＢＶ)及减蛋综合征病毒 (ＥＤＳＶ)来评价珍珠鸡胚胎期对病毒感染的抵抗力。1　材料与方法1 1　毒株　ＮＤＶ、ＩＢＤＶ、ＩＢＶ及ＥＤＳＶ均为南京农业大学动物医学院传染病组分离鉴定并保存…     

姜黄素调节BDNF/TrkB信号通路对细菌性脑膜炎新生大鼠神经元凋亡的影响

目的：探讨姜黄素（Cur）调节脑源性神经营养因子（BDNF）/原肌球蛋白相关激酶B受体（TrkB）信号通路对细菌性脑膜炎（BM）新生大鼠神经元凋亡的影响。方法：随机选择15只大鼠作为非感染组（NF组）,其它大鼠通过额蛛网膜下腔注射肺炎链球菌ATCC49619菌悬液构建BM大鼠模型,将构建成功的BM模型随机平分为BM组、L-Cur组(1.25 mg/kg）、M-Cur组(2.5mg/kg）、H-Cur组(5 mg/kg）、H-Cur+K252a组（5 mg/kg Cur+2.5μg/kg K252a）,每组15只大鼠,每天一次,连续注射3周。对大鼠称量体重并进行临床评分,HE染色以及尼氏染色观察神经细胞损伤;TUNEL染色评估神经元凋亡情况。免疫荧光染色检测神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、脊髓钙离子接头蛋白-1(IBA-1)水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（qRT-PCR）检测脑组织炎症因子和趋化因子水平。蛋白质印迹法（Western blot）检测脑组织凋亡蛋白以及BDNF/TrkB通路蛋白表达。结果：NF组脑组织结构正常,神经元胞质内出现大面积蓝色尼氏体。BM组蛛网膜下腔出现大量炎...     

植物金属硫蛋白Ⅱ型与谷胱甘肽在烟草中的表达和合成特性

利用从印度芥菜(Brassica juncea)中获得的金属硫蛋白2型（BjMT2）基因通过农杆菌介导法转入模式植物种烟草中。转基因烟草在经过继代组织培养和抗生素筛选以及PCR和Western blot检测后,确定目的基因BjMT-2被整合到烟草基因组中并具备表达功能。与对照野生型相比,转入金属硫蛋白2型的烟草在植物形态和根部发育方面都发生了显著的性状变化。在正常条件下,转基因植物叶片组织中谷胱甘肽的含量与野生型没有明显差别,但经过100 mmol·L^-1 Cu²⁺胁迫后,谷胱甘肽的含量明显高于野生型。在转基因植物细胞膜系统中V-型ATP酶的活性低于野生型,而P-型ATP酶的活性则表现出明显的升高趋势。     

泛素化及相关疾病研究进展

泛素是一种普遍存在于真核细胞中的小分子量蛋白质.E1-E2-E3三步级联反应形成的泛素化修饰,是细胞中最常见、多样化和多功能的蛋白质翻译后修饰,参与蛋白质水解、信号传导等各种生命活动.本文综述了近3年来泛素领域的研究进展,并着重于论述泛素化系统在肿瘤、DNA损伤应答以及神经退行性疾病中的作用.     

松栎柱锈菌春孢子多糖体外抗氧化活性

为了研究松栎柱锈菌（Cronartium orientale S.Kaneko）春孢子多糖的体外抗氧化活性,制备了该菌破壁春孢子精制多糖,并对所得春孢子多糖进行了总抗氧化能力、总还原力以及清除二苯代苦味酰基（DPPH·）、清除羟基自由基（·OH）、清除超氧阴离子（O₂^·）的活性进行了测定。体外抗氧化活性分析结果表明：松栎柱锈菌春孢子多糖具有较强的总抗氧化能力;虽然该菌多糖不具有清除多数氧自由基母体（O₂^·）的作用,也不具有清除人工合成自由基DPPH·的作用,但是其能够有效清除对机体破坏力最强的自由基·OH。这表明本文获得的松栎柱锈菌春孢子多糖具有对自由基选择性清除的能力,对其他自由基研究者具有参考价值,可为该菌的开发利用提供参考,也能够为森林有害生物开发利用提供理论依据。     

沙棘不同部位总黄酮含量的测定及比较

考察了引种于俄罗斯的大果沙棘不同部位总黄酮含量的差异。用超声提取作为沙棘总黄酮的制备方法;以芦丁为对照品,采用分光光度法作为沙棘总黄酮的测定方法。实验结果表明,沙棘叶、果肉和果皮中总黄酮含量分别为1.71%、0.76%和0.55%,叶中总黄酮含量分别是果肉和果皮的2.3倍和3.1倍,因此引种于俄罗斯的大果沙棘叶具有较大的开发价值和应用前景。     

TLR7在1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用研究

目的:探讨Toll样受体7(TLR7)介导的My D88/NF-κB信号通路在1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤中的作用。方法:雄性SD大鼠随机分为3组(n=6),糖尿病假手术组(DS),糖尿病缺血再灌注组(DIR),糖尿病缺血再灌注+氯喹预处理组(DIR+CQ)。采用腹腔注射链尿佐菌素65 mg/kg建立糖尿病模型,TLR7抑制剂氯喹预处理于糖尿病模型成功后第3周0.5%氯喹40 mg/kg进行腹腔注射,连续给药7天。于第四周采用双侧肾蒂夹闭25 min,再灌注48 h建立肾缺血再灌注损伤模型。取大鼠肾脏HE染色观察大鼠病理学结果,血标本测定血尿素氮(BUN)和血肌酐(Scr)水平,ELISA法检测白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α),TUNEL法检测细胞凋亡,Western blot检测TLR7,My D88和NF-κB蛋白表达。结果:与DS组相比,DIR组肾小管肿胀,间质水肿,刷状缘丢失,空泡变性坏死,Paller评分升高(P0.01)。与DIR组相比,氯喹预处理可以改善肾损伤(P=0.017);与DS组相比,DIR组BUN,Scr,IL-6,TNF-α,细胞调亡指数(Apoptosis%),TLR7,My D88,NF-κB增高(P0.05);与DIR组相比,DIR+CQ组BUN,Scr,IL-6,TNF-α,Apoptosis%,TLR7,My D88,NF-κB降低(P0.05)。结论:TLR7介导的My D88/NF-κB信号通路参与糖尿病肾缺血再灌注损伤,氯喹通过抑制TLR7表达,阻断My D88/NF-κB信号通路,降低炎症反应,从而减轻1型糖尿病大鼠肾缺血再灌注损伤。     

巴什拜羊骨骼肌卫星细胞分离培养及诱导分化

为了获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,本研究采集出生1日龄巴什拜羔羊后肢骨骼肌组织,采用两步酶消化法结合差速贴壁法分离纯化巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,并对分离获得的骨骼肌卫星细胞进行了鉴定、传代培养及诱导分化等研究。结果表明,本研究采用的分离纯化方法可以高效获得巴什拜羊骨骼肌卫星细胞,RT-PCR检测结果表明骨骼肌卫星细胞标志性基因pax7、Myf5、MyoD、desmin和c-Met均呈阳性表达。获得的骨骼肌卫星细胞具有较强的增殖能力,连续传代12代,细胞的形态仍保持正常,且细胞的克隆形成率仍保持在50%以上,但是当细胞传代至第18代时,逐渐表现出较为明显的衰退。细胞的生长符合典型的"S"型生长曲线,且第2代和第8代细胞的生长曲线没有明显的差异,至第14代时细胞的增殖速度逐渐降低。采用低浓度马血清培养体系,可成功诱导巴什拜羊骨骼肌卫星细胞向肌管方向分化,诱导培养至第5天时,骨骼肌卫星细胞分化标志基因MyHC呈阳性表达。由此得出结论,本研究采用的骨骼肌卫星细胞分离纯化体系高效、可靠,可以满足较高纯度巴什拜羊骨骼肌卫星细胞的分离培养。     

夜间低温对薄皮甜瓜糖运转途径上各器官糖含量的影响

以薄皮甜瓜(Cucumis melo L.)品种'玉美人'为试材,通过高效液相色谱法测定薄皮甜瓜糖运转途径上各器官不同种类糖的含量.以分析夜间低温对薄皮甜瓜糖运转途径上各器官糖含量的影响.结果显示,甜瓜从"源"到"库"糖运转途径上各器官糖含量差异很大.叶片中葡萄糖含量最高,其次是果糖,而肌醇半乳糖苷、棉籽糖和水苏糖含量很低;子蔓和果柄维管柬中积累了大量的蔗糖、果糖、葡萄糖、棉籽糖和水苏糖,及少量的肌醇半乳糖苷;果实则以果糖、葡萄糖为主,而肌醇半乳糖苷、棉籽糖和水苏糖含量很低.夜间9℃低温处理后,叶片、子蔓和果柄维管束糖的积累明显高于相应对照,而果实中糖含量明显低于对照;夜间12℃低温处理后糖运转途径上各器官糖含量无明显变化.研究表明,夜间9"C低温使薄皮甜瓜叶片中糖大量积累,并限制了糖的运输,严重影响果实糖分积累,而夜间12℃低温并未对其产生明显的影响;果柄维管束中可能存在运转糖的分解,且夜间9℃低温可能会对其起到一定的促进作用.