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1993年 | 1篇 |
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1987年 | 2篇 |
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NF-кB已被证明在肿瘤和炎症过程中起到至关重要的作用.因此,建立抑制NF-кB信号通路的药物筛选模型至关重要.利用荧光素酶报告基因技术与蛋白印迹技术分别探索TNFα处理浓度及时间对NF-кB报告基因表达和NF-кB抑制亚单位IкBα降解的影响,进而构建NF-кB信号通路抑制剂药物筛选模型.实验结果表明,0.01 nmol/L TNFα作用24 h即能刺激HEK293T细胞中NF-кB报告基因较高水平的表达,且其表达量与TNFα的剂量和处理时间呈正相关性;0.01 nmol/L TNFα作用5 min即能使Pane-28细胞中IкBα明显降解,20min~30 min几乎降解完全,之后IKBa含量又开始增加.NF-кB阳性抑制剂藤黄酸验证表明NF-кB萤光素酶报告基因检测筛选体系和NF-кB抑制亚单位降解筛选体系两种体系稳定可行.结果证明,两种模型可以用于NF-кB信号通路抑制剂药物的筛选. 相似文献
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63.
外泌体是一种直径在30~100 nm的细胞外膜性囊泡,由真核生物体内的多种细胞产生,其内含有蛋白质、脂质、核酸以及和起源细胞相关的物质等。外泌体能够携带起源细胞内成分并作用于邻近或远距离的细胞,从而实现生理及疾病状态下不同细胞间的信息交流。近年来,研究表明神经退行性疾病发病相关的错误折叠蛋白(如α-突触核蛋白、tau蛋白、β-淀粉样蛋白等)能够通过外泌体运输,从而促进这些蛋白在细胞间传播并传播至未病变区域,加快疾病进程。本综述着重阐述了外泌体的起源和组成、生物合成、分泌、功能,尤其是在神经退行性疾病发生和发展中的作用。除此之外,还探讨了外泌体作为生物标记物和药物传递载体在神经退行性疾病的诊断与治疗中的作用和前景。 相似文献
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为拯救出一株能够在动物传代细胞中高水平复制的H3N2亚型猪流感疫苗株,利用反向遗传操作技术,将A/Goose/Dalian/3/01(H9N2)毒株的PB1、PA、NP、M、NS基因和A/PR/8/34毒株的PB2基因作为内部基因与猪流感病毒A/Swine/Henan/S4/01(H3N2)毒株的HA、NA基因进行重组,成功拯救出了具有高度细胞适应性毒株rH3N2株,该毒株接毒MDCK细胞60h后,血凝价可以达到1∶512,表明该毒株具有高度适应细胞繁殖特性,为H3N2亚型猪流感病毒细胞培养型疫苗的研制奠定了基础。 相似文献
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为了获得有活性的白喉毒素突变体蛋白 (Cross-reacting material 197,CRM197),本研究利用分子伴侣pG-KJE8与重组质粒pET28a-CRM197在大肠杆菌原核表达系统中进行共表达,来促进目的蛋白的正确折叠,进而提高CRM197蛋白的可溶性表达。将质粒转化至大肠杆菌后并诱导其表达目的蛋白,再通过SDS-PAGE胶染色、Western blotting等技术对所得蛋白进行检测分析。结果发现:利用体外重组技术成功得到了pET28a-CRM197重组蛋白原核表达质粒,且CRM197重组蛋白在原核表达系统中主要以包涵体形式表达;通过探索和优化,确定了诱导蛋白的最佳浓度和温度,当加入终浓度为1.0 mmol/L IPTG、0.5 mg/mL L-阿拉伯糖、5.0 ng/mL四环素,在20 ℃条件下诱导16 h时,目的蛋白的可溶性表达得到显著提高;可溶性表达的CRM197重组蛋白可以与CRM197一抗发生特异性结合,免疫反应性良好。因此,研究发现分子伴侣pG-KJE8可以促进CRM197重组蛋白在大肠杆菌中以可溶性形式表达,且能很好地与CRM197一抗发生特异性结合,证实CRM197重组蛋白具有良好的免疫反应性,为CRM197蛋白的工业化生产及应用奠定了一定的基础。 相似文献
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RNA干扰(RNA interference,RNAi)是指双链RNA诱导同源mRNA降解从而导致基因表达抑制的现象,其效应分子是一种短片段双链RNA分子,被称为小分子干扰RNA。RNAi技术作为新兴的基因表达抑制方法,在功能基因组学、基因表达调控、基因治疗等领域得到了广泛应用。并将极大促进当前生物科学研究的发展。 相似文献
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采取室内毒力测定和田间防效调查相结合的方法,对灰茶尺蠖核型多角体病毒(Ectropis grisescensnucleopolyhedrovir-us)的致病力进行了研究。毒力测定结果表明,该病毒对2龄灰茶尺蠖幼虫的剂量对数-死亡机率值回归方程为y=-0.8774 0.9498x,LC50=1.5417×106PIB.mL-1;田间用浓度为1×107、1.5×107和2×107PIB.mL-1的EgNPV防治灰茶尺蠖,防效分别达58.81%、89.51%和94.81%。 相似文献
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人参皂苷Rg2抗MTD大鼠海马神经元凋亡的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:观察多发梗塞性痴呆模型大鼠CPU凋亡相关蛋白的改变,研究其在学习记忆障碍中的作用机制,并探讨人参皂苷Rg2的干预作用。方法:将复合血栓诱导剂经大鼠左颈总-颈内动脉注射入其左侧大脑半球,诱导半球内血栓形成,造成多发梗塞,从而建立大鼠的学习和记忆功能障碍模型。分别给予不同剂量的人参皂苷Rg2治疗7天,并以尼莫地平进行对照。用Y型电迷宫检测正常对照及痴呆模型大鼠学习和记忆能力的改变;对大鼠的脑组织切片作尼氏染色行病理学检查;以免疫组化方法检测Glu、CalpainⅡ、Caspase-3、Bax的表达。结果:颈内动脉注射复合血栓诱导剂可造成大鼠在Y型电迷宫中的学习和记忆成绩明显降低,与假手术对照组比较有显著差异(P<0.05)。尼氏染色可在大鼠脑片的CPU区发现胶质瘢痕化的微梗塞灶。在免疫组化结果中,Glu、CalpainⅡ、Caspase-3、Bax表达均增高。结论:单侧大脑注射复合血栓诱导剂可造成大鼠的学习记忆能力降低,可部分模拟MID的行为和病理学改变。人参皂苷Rg2能明显改善MID模型大鼠的学习记忆成绩,其作用机制可能与它的钙通道阻滞作用使凋亡蛋白CalpainⅡ、Caspase-3、Bax表达降低有关... 相似文献
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