紫外线和硫酸二乙酯复合诱变选育PHB高产菌株

【目的】获得高产聚β-羟基丁酸酯(Poly-β-hydroxybutyricacid,PHB)菌株。【方法】以假单胞菌属Pseudomonas koreensis PK3菌株为出发菌株,采用硫酸二乙酯和紫外线相结合的诱变方法进行多轮诱变。【结果】经过初筛和复筛得到一株高产PHB突变菌株,命名为Pseudomonas koreensis UVCN-18。连续传代9次后,发酵28 h条件下,PHB产量达到15.94 g/L,占细胞干重69.54%,较原出发菌株Pseudomonas koreensis PK3(4.42 g/L)提高了2.61倍,并且该菌株具有良好的遗传稳定性。【结论】采用硫酸二乙酯和紫外线相结合的诱变方法,成功获得了一株高产PHB突变菌株。     

养殖中华绒螯蟹肠道内优势细菌群组成分析

采用荧光染色计数法对养殖中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)肠道内微生物进行定量分析。结果表明肠道内细菌数量为(2.5±0.9)×106/μL。同时采用分离培养与16S rDNA基因克隆测序相结合的方法对其进行多样性分析,旨在揭示其中可培养细菌的组成结构。结果发现,分离自养殖中华绒螯蟹肠道内的49株代表性细菌均属于γ-变形菌纲(Gammaproteobacteria),其中假单胞菌属(Pseudomonas)、气单胞菌属(Aeromonas)和肠杆菌科(Enterobacteriales)为优势菌群。     

基于空腔填充效应构建伯克霍尔德菌脂肪酶LipA的热稳定性突变体

【目的】中温伯克霍尔德菌胞外脂肪酶LipA在工业领域具有重要的应用价值。利用蛋白质工程技术来提高其热稳定性,对开发脂肪酶LipA酶制剂及提高其应用范围及应用效果,具有重要的意义。【方法】利用生物信息学软件Castp、Voronoia和Cave分析LipA分子中存在的空腔及其组成氨基酸残基;利用FoldX软件构建上述氨基酸残基的突变体电子文库,并基于空腔效应(体积变小)、自由能变化值(降低)和空间结构特点等对前述突变体电子文库进行筛选。从突变体电子文库中选择具有代表性的突变体,通过基因工程技术,引入突变。经诱导表达后,实验验证并筛选出热稳定性的突变体。【结果】构建了一个由58个突变体组成的电子文库;并对其中17个代表性的突变体进行了实验验证;筛选到2个热稳定性有明显提高的突变体LipA-His15Pro和LipA-Ala210Val;其叠加突变体LipA-His~(15)Pro/Ala~(210)Val的T50~(12)较野生型LipA提高了8°C,在55°C下的半衰期较野生型脂肪酶LipA提高了23.1倍。【结论】基于空腔填充技术构建热稳定性伯克霍尔德菌胞外脂肪酶LipA突变体,是一种行之有效的策略。     

中国金色果蝇复合种的染色体研究——Ⅰ.中国某些地区金色果蝇及Ⅲ金色果蝇核型的研究

取果蝇脑神经节细胞,采用Giemsa染色的方法研究了我国某些地区,如北京、保定、青岛、大连、上海、梓潼的Ⅲ金色果蝇和杭州的金色果蝇的核型,并与来自日本的金色果蝇进行比较。所有材料都显示了基本相似的中期核型:2n=8,2V+1J+1D(即V形,J形,D点状)。各对染色体之间在形态上可以区别,大多数的材料显示次缢痕。但应特别指出的是,杭州金色果蝇H_2-Ⅲ品系的雄性完全缺失Y染色体,属于“XO型”性别决定。在复合种内的Y染色体及第Ⅳ染色体的中期染色体结构上存在着广泛而又重要的差别,这种差别是由于它们存在的异染色质含量的不同。     

木鼠视皮层单细胞的感受野和双眼反应

用静止的小光点测定细胞的感受野表明大鼠视皮层同心圆式感受野有两种类型:大多数感受野没有或只有极弱的外周拮抗区,少数有拮抗区。对前一类细胞,弥散光刺激有时可以引起比用小光点刺激更强的反应,后一类情况相反。在双眼区,58%的细胞能被两眼分别驱动:双眼细胞的比例和同侧眼的影均随电极由17区向17-18a 交界区移动而增加。     

果蝇的XO型雄性及体细胞染色体联合

为了比较研究Drosophila auraia果蝇和它的姊妹复合体的中期染色体结构,我们参照Wakahama(1983)的方法并对之进行了一些改进,采用空气干燥制片法,对采自我国大连、青岛、北京、保定、上海、四川各地区的野生群体中的D.triauraria,以及杭州和美国果蝇     

气球菌的分类及临床感染

气球菌属(Aerococcus)为草绿色溶血菌落特征、触酶阴性的革兰阳性球菌.目前气球菌属包括8个菌种,其中与人类感染密切相关的包括脲气球菌(Aerococcus urinae)、血气球菌(Aerococcus sarguinicola)、绿色气球菌(Aerococcus viridans)等,可造成临床尿路感染、血流...