茉莉酸甲酯对灵芝三萜生物合成的影响及其灵芝应答基因的差异表达

灵芝三萜类化合物是灵芝的主要药用成分之一,灵芝三萜含量的多少是衡量灵芝质量高低的重要指标。经研究发现茉莉酸甲酯能显著提高灵芝三萜含量并上调灵芝三萜生物合成途径中的羟甲基戊二酰辅酶A还原酶、法尼酯焦磷酸合成酶和羊毛甾醇合成酶等基因的表达。通过在灵芝中建立的cDNA-AFLP体系,采用64对引物组合对灵芝的转录组进行分析。64对引物组合共产生3 910个TDFs。茉莉酸甲酯不同诱导条件下约有919个TDFs的表达谱发生了变化,占表达谱的23.5%,其中上调表达的有703个,下调表达的有216个。选择458个TDFs进行回收、TA克隆、测序后,获得390个高质量的TDFs片段。通过蛋白数据库同源性检索,并对蛋白功能进行GO分类,结果表明:390个高质量的TDFs中,BlastX比对后没有显著匹配的序列占77.1%。在有匹配蛋白的序列中,与碳代谢及能量相关的基因为最大一组,占35.2%,转录调控类及信号传导类基因分别占14.3%和11.0%。通过荧光定量PCR技术考察了茉莉酸甲酯对20个基因转录水平的影响,与cDNA-AFLP分析的结果相一致。并通过灵芝基因过量表达技术和基因沉默技术对筛选到的相关基因进行沉默和过量表达,研究筛选到的基因在灵芝三萜生物合成与调控中的作用,获得大量参与灵芝三萜生物合成与调控的候选基因,进一步阐明了茉莉酸甲酯诱导下灵芝基因表达的变化图。     

抗CPV-2a单克隆抗体的制备及双抗体夹心ELISA检测方法的建立

犬细小病毒病是危害养犬业的重要传染病之一,患病犬难以治愈.单克隆抗体治疗此病效果明显,本文介绍了制备抗CPV-2a单克隆抗体的方法.用纯化的犬细小病毒(canine parvovirus,CPV) 2a型分离株免疫新西兰大白兔和Balb/c小鼠制备抗CPV-2a多克隆抗体及单克隆抗体.经亚克隆得到1H9、2B5、2B7和2C7共4株单抗,Western blotting鉴定单抗的免疫反应性;间接ELISA方法检测单抗的特异性.为了快速对犬细小病毒病作出诊断,建立了CPV-2a双抗夹心ELISA方法.兔多抗作为捕获抗体,鼠单抗作为示踪抗体,辣根过氧化物酶标记羊抗鼠IgG作为检测系统;捕获抗体和示踪抗体最佳稀释度分别为1:800和1:2 000;检测系统最佳稀释度为1:4 000.结果表明:所得4株单抗与pET-32a-VP2蛋白发生特异性反应,且与狂犬病毒(RV)、犬温热病毒(CDV)不交叉反应;建立的双抗夹心ELISA方法对病毒的最低检出量为4.375 μg/mL,与美国RB试剂盒相比,符合率为95%.单抗制备为犬细小病毒病的治疗奠定了基础;双抗夹心ELISA方法的建立为疑似粪便样本提供了简单、快速和可靠的检测手段.     

甘蓝型油菜千粒重性状的QTL定位分析

该研究利用油菜双单倍体株系(348份)群体和已构建的遗传连锁图谱,采用复合区间作图法,对2009~2013年连续5年的千粒重性状表型数据进行QTL初步定位和分析,结果共获得46个显著性千粒重QTL,主要分布在A7、C1和C6等11条染色体上;其中qTSW-09 DL11-1的表型变异最高(19.63%),qTSW-11 DL9的表型变异最小(2.73%)。通过元分析方法将所获得的46个QTL进行整合,结果显示:cqTSW-C1-2的表型变异最大(10.64%),并发现多个整合后的一致性QTL能够在连续多年试验中被检测到,其中cqTSW-C1-3连续5年被检测到,表明控制千粒重的QTL在种植环境中能够稳定表达;同时,新发现位于C1染色体上的千粒重主效QTL cqTSW-C1-2,解释表型变异达到10.64%。油菜千粒重性状的QTL分析和主效QTL的获得,为进一步实现油菜大籽粒的分子育种和高产新品种的培育提供了重要的理论指导。     

卡介苗载体及其在疫苗研究中的应用

卡介苗是发展多价疫苗最好的载体之一.把外源基因导入卡介苗有3种途径:一是分枝杆菌噬菌体衍生的基因转移系统;二是分枝杆菌质粒衍生的基因转移系统;三是同源重组基因转移系统.重组卡介苗多价疫苗的研制为各种疾病的预防开辟了广阔的前景.     

南京汤山古人类化石的发现及其意义

简述了南京汤山直立人头骨化石发现的经过j描述了头骨的形态特征;通过对比认为,汤山直立人头骨与北京周口店直立人的相近程度大于其与安徽和县直立人的相近程度;据共生的哺乳动物分析,汤山直立人的地质时代为中更新世晚期.     

西藏二叠纪粗枝藻类(钙藻)一新属兼论拟角藻属(Goniolinopsis)

本文描述的材料系中国科学院南京地质古生物研究所及西藏地质局共同组队于1980年夏在西藏申扎县城东北约20公里永珠附近下拉山采自下二叠统下拉组(图1)。     

贵州安顺上二叠统的真菌化石

本文记述了贵州安顺上二叠统龙潭组的四种寄生和钻孔真菌,即寄生团菌孢(新属、新种)Sorosporonitesparasiticus(gen.et sp.nov.)内孢贵州丝菌(新属、新种)Guizhounema endosporicum(gen.et sp.nov.)和两种未定名称的菌丝化石。它们保存在钙藻——裸海松藻类的体内和(竹蜓)、腕足类(?)的钙质骨骼内。有些标本保存得相当精美,是寄生在海藻体内真菌化石的首次记录。这一发现的重要意义在于,它为研究古代的寄生现象提供了新的古生物证据。它表明,真菌寄生在藻体内的生态现象的发展历史至少可以追溯到二叠纪。     

常用口服营养液中游离氨基酸的测定与分析

我科实验室于９５年对全国市售的８种富含氨基酸成份的口服液进行了游离氨基酸测定,结果显示：１号液总量为８８９０．９８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．６６;２号液总量为４２９５．９６μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．９９;３号液总量为１０４４５．８８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．１０;４号液总量为２５８２０．５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．８１;５号液总量为５５３．５μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．７０;６号液总量为１１６８．５６μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值１．３８;７号液总量为３３９１．７１μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值２．４９;８号液总量为２８５１．１４μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值０．２２。正常人血清中游离氨基酸总量为２９６２．８μｍｏｌ／Ｌ,支／芳比值３．２７±０．５８。