木糖酸氧化途径在枯草芽孢杆菌的构建及转化乙醇酸的研究

通过过表达外源基因,旨在获得一株生产乙醇酸的食品安全菌。通过构建质粒在枯草芽孢杆菌A164S中过表达来自大肠杆菌的木糖酸降解途径,并用高效液相色谱对产物进行检测。诱导质粒表达后,重组枯草芽孢杆菌菌株成功地将木糖酸转化为乙醇酸,摩尔转化率达到42.54%。同时,枯草芽孢杆菌自身因存在非特异的醛缩酶及乙二醛脱氢酶,能够在只表达木糖酸脱水酶YjhG的情况下获得生物转化木糖酸的能力。成功构建了一株可利用木糖酸生产乙醇酸的枯草芽孢杆菌,并发现了可能的YjhH同工酶的存在。     

SIRT3过表达通过调控细胞代谢转换抑制肾肿瘤细胞的增殖

目的:研究SIRT3对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma, ccRCC)769-P细胞增殖和抗氧化能力的影响,并进一步探究其作用机制。方法:在769-P细胞的基础上构建SIRT3过表达稳转细胞系;利用CCK-8试剂检测769-P SIRT3过表达细胞的增殖速度;利用CellROX~Deep Red染料并结合流式细胞分析检测SIRT3过表达对769-P细胞中ROS水平的影响;利用定量蛋白质组学和代谢组学的方法,探究SIRT3对769-P细胞的作用机制。结果:CCK-8实验结果表明,769-P SIRT3过表达细胞的生长速度与对照细胞相比下降了约48%;定量蛋白质组学分析显示,769-P SIRT3过表达细胞中ALDOA、ALDOA、ENO2、PKM、LDHA、LDHB表达量下调约0.4至0.7倍,SDHB和CS上调约1.3倍;代谢组学分析显示,PEP、pyruvic acid、lactate、carnitine水平下降约0.4至0.7倍,isocitric acid和acetyl-CoA水平升高分别约1.3和2.8倍;分析还显示SIRT3过表达上调SOD2、TXN、GPX4和GLRX5的表达量约1.3至2倍,降低ROS水平约40%,增强细胞对过氧化氢的耐受力。结论:SIRT3过表达引起769-P细胞的代谢转换,从而抑制其增殖;且上调769-P细胞中抗氧化酶的表达,降低ROS水平,增强细胞的抗氧化能力。     

兰属“小金童”组织培养研究

兰属小金童(Cymbidium Golden elf.‘Sundust’)茎尖组织培养研究表明:茎尖外植体在不添加植物生长调节剂的花宝1号培养基上诱导产生原球茎;原球茎在花宝1号3g/L 6-BA 1.5mg/L的液体培养基上培养,能形成快速增殖的丛生原球茎;不同的培养方式对原球茎的增殖效果有显著差异;原球茎在不附加植物生长调节剂的1/2MS或花宝1号培养基上分化成无根小苗,然后在花宝1号 NAA 0.2mg/L IBA 0.6mg/L培养基上诱导生根,进而再形成完整植株。     

几种拟除虫菊酯类杀虫剂对美洲斑潜蝇的防治效果

测定了拟除虫菊酯类农药功夫、灭扫利、速灭杀丁和兴棉宝对美洲斑潜蝇各龄幼虫、雌成虫的毒力以及对成虫取食、产卵的影响,并进行了田间小区试验。结果表明：美洲斑潜蝇一、二、三龄幼虫和雌成虫对功夫最敏感,一、二、三龄幼虫对功夫的 ＬＣ５０分别是 ０．００７５、０．００９３、０．０１１２ ｇ（ａ．ｉ．）／Ｌ,雌成虫对功夫的 ２４小时、４８小时的 ＬＣ５０分别是０．００２７、０．００２５ ｇ（ａ．ｉ．）／Ｌ。功夫对美洲斑潜蝇的取食、产卵拒避持效期分别是 ４天和 ６天,用浓度 ０．０２５ ｇ（ａ．ｉ．）／Ｌ的功夫药液处理 ０、２、４、６天后接虫,幼虫存活率分别是０、６．３％、６．８％和 ６１．６％,田间用浓度 ０．０２５、０．０１６７ ｇ（ａ．ｉ．）／Ｌ功夫分别处理,６天的校正虫口减退率分别是９１．９６％和８３．６０％。     

用量热法研究水稻线粒体不同条件下的能量释放

用精密微热量计（ＬＫＢ２２７７ 生物活性检测系统） 和差示扫描量热（ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｌ ｓｃａｎｎｉｎｇ ｃａｌｏｒｉｍｅｔｒｙ, ＤＳＣ） 仪（Ｄｕｐｏｎｔ９１０） 分别测定了广丛４１Ｂ 水稻线粒体体外能量释放热谱和ＤＳＣ 曲线。探讨了它在恒温和变温条件下能量释放的规律和特性,建立了广丛４１Ｂ水稻线粒体在不同条件下能量释放的动力学模型,计算了它在能量释放过程中的热力学和动力学参数,并比较了它们之间的差异。结果表明,温度愈低,线粒体能量释放速率愈慢。线粒体在零上低温下放置较长时间后,其放热量增加,能量释放速率加快。     

中国珍稀植物明党参嫩茎叶挥发油化学成分研究

采用毛细管气相色谱－质谱－计算机联用技术对明党参嫩茎叶挥发油的化学成分进行研究,从挥发油中鉴定出２７种成分,占总油量的９７．５０２％,其主要成分是Ｍａｎｇ牛儿醇乙酸酯（４６．６３６％）,明党参炔（１１．４８３％）,β－金合欢烯（１０．９８６％为阐明明党参特征性化学及茎叶的一切利用提供了依据。     

水稻红莲型细胞质雄性不育系与保持系mtRNA差异显示和差别片段？…

将Ｔ４ＲＮＡ连接酶和ＡＦＬＰ技术特点相结合构建于适于ｍｔＲＮＡ的差异显示方法,并比较水稻（Ｏｒｙｚａ ｓａｔｉｖａ Ｌ．）红莲型细胞质雄性不育系,保持系和杂种一代ｍｔＲＮＡ差异。在４组引物对的选择扩增产物中共找到６个差异片段,其中差异条带ＤＴＡ为不育系仅有,条带ＤＡＢ为不育系和保持系特有,而条带ＤＢＦ１、ＤＢＦ２、ＤＢＦ３、ＤＢＦ４为保持系和Ｆ１杂种共有。这表明水稻红莲型不育系粤泰Ａ与杂种一代泰优     

水稻红莲型细胞质雄性不育系与保持系mtRNA差异显示和差别片段的分析

将T4 RNA连接酶和AFLP技术特点相结合构建了适于mtRNA的差异显示方法 ,并比较了水稻 (OryzasativaL .)红莲型细胞质雄性不育系、保持系和杂种一代mtRNA的差异。在 4组引物对的选择扩增产物中共找到 6个差异片段 ,其中差异条带DTA为不育系仅有 ,条带DAB为不育系和保持系特有 ,而条带DBF1、DBF2 、DBF3 、DBF4 为保持系和F1杂种共有。这表明水稻红莲型不育系粤泰A与杂种一代泰优 2号mtRNA的差异大于保持系粤泰B和杂种一代泰优 2号mtRNA的差异。Northern杂交证实条带DTA在不育系、保持系和杂种一代的转录确有差异 ,表明它与红莲型细胞质雄性不育有关。条带DTA全长 2 5 9bp ,尽管未发现有同源序列和新的开放阅读框 ,但它可作为探针从cDNA文库中筛选全基因序列 ,进而寻找与细胞质雄性不育有关的开放阅读框架。     

过表达PKCβⅠ亚类2BS细胞模型之建立及与增殖相关性之初探

本文通过基因转染技术将大鼠蛋白激酶C(PKC)βⅠ亚类cDNA全长片段导入人胚肺成纤维细胞(2 BS)中,首次建立了一个稳定地过表达PKC βⅠ类的2 BS细胞模型。经实验证明在过表达PKC βⅠ亚类的细胞中PKC活性是对照细胞的三倍左右,表现出细胞增殖加速,进一步观察到与增殖有关的原癌基因c-myc的表达也明显加强。本文首次报道了PKC βⅠ在人胚肺细胞2 BS中加速生长与c-myc基因表达之密切相关性。这可能是PKC βⅠ作用于2 BS细胞生长加速的分子机理之一。