聚-β-羟基丁酸(PHB)在细菌建立感受态中的作用

介绍了PHB作为细胞膜上的物质运输通道成分在细菌感受态中的结构、分布、分析方法以及其可能的作用 ,阐明了PHB的合成与细菌感受态建立的关系和PHB在感受态细胞摄取外源DNA时的作用方式 ,同时也对控制生物体合成PHB的相关基因和酶作了简要介绍 ,并探讨了研究PHB的实际意义。     

极端嗜盐多形性古菌病毒HRPV13的分离鉴定及生物学特性

【背景】与感染细菌和真核生物的病毒相比,目前发现的古菌病毒数量很少,但是却展现出形态多样性。因此,分离和鉴定新的古菌病毒具有重要意义。【目的】为了进一步了解古菌病毒的多样性,我们从青海省翡翠湖水样中分离到一株新的嗜盐古菌病毒株,研究其生物学特性并进行分类。【方法】首先通过挑取单菌落法分离嗜盐古菌,通过噬菌斑法获得嗜盐古菌病毒,PEG 6000两步沉淀法和CsCl密度梯度离心对病毒颗粒进行浓缩和纯化,用醋酸双氧铀对病毒负染染色,在透射电镜下观察病毒形态,提取病毒基因组后进行测序并进行生物信息学分析,以三氯乙酸法制备病毒蛋白样品并进行SDS-PAGE分析,分别用考马斯亮蓝和苏丹黑B染色并观察其蛋白和脂质条带。【结果】在以Halorubrum属极端嗜盐古菌K2菌株为敏感菌的双层平板上分离到了一株嗜盐古菌病毒,其噬菌斑为浊斑,透射电镜下呈多形性包膜病毒状,直径60 nm左右;含有9333bp大小的双链环状DNA基因组,与已报道的β多形包膜病毒属(Betapleolipovirus)的HRPV11、HRPV12和HRPV10具有约75%的一致性,是该属的一个病毒新种。根据形态及基因组特征,将其归...     

RT-PCR克隆人纤溶酶cDNA大片段

目的:以人胎儿肝脏总RNA为模板,克隆人纤溶酶(plasmin)cDNA大片段。方法:采用异硫氰酸胍一步法提取总RNA,RT-PCR技术获取目的基因。结果:成功地扩增出1.74kb的人纤溶酶基因,并研究了扩增人纤溶酶cDNA大片段的特定实验条件。结论:为克隆cDNA大片段研究提供了简便、快速的方法。     

山梨酸钾和D-异抗坏血酸钠联合作用HepG2细胞的生物学效应分析北大核心CSCD

该文研究食品添加剂联合作用人肝癌HepG2细胞后的多参数生物学指标,并探索可能存在的损伤机制。CCK-8法检测受试物山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠0.13~2.00 g/L分别作用HepG2细胞24、48及72 h后的细胞增殖活力,显示山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠均呈显著的时间、剂量依赖性的抑制HepG2细胞增殖,其24 h的IC50分别为1.35±0.11 g/L和1.58±0.17 g/L。高内涵分析结果表明,与单独组相比,联合组显著降低细胞数量和线粒体膜电位,增大细胞膜通透性及活性氧水平（P〈0.05）;高剂量联合组（0.30＋0.41 g/L）显著增加DNA损伤（P〈0.01）,表现为协同作用。qRT-PCR和Western印迹法显示,山梨酸钾及D-异抗坏血酸钠可显著提高P53、Caspase-3、Bax、γ-H2AX表达,同时显著降低Bcl-2表达,从而抑制HepG2细胞增殖。     

一株奥奈达希瓦氏菌烈性噬菌体的分离、纯化及鉴定

【目的】从环境中分离获得希瓦氏菌烈性噬菌体,并对其性质进行研究。【方法】以4株希瓦氏菌为宿主菌,采用双层平板法从污水样品中分离得到奥奈达希瓦氏菌MR-1烈性噬菌体M1;观察噬菌斑特征;利用超速离心法浓缩M1颗粒,进一步用氯化铯密度梯度离心纯化;采用透射电子显微镜观察纯化的M1颗粒;提取M1核酸,通过核酸酶处理分析其核酸类型及结构;绘制一步生长曲线。【结果】噬菌体M1在双层平板上形成圆形的噬菌斑,清晰透明,边缘光滑,直径为2.3 mm-2.5 mm;经电镜观察,噬菌体M1头部呈二十面体,直径约为55 nm,尾长约为170 nm,尾部可收缩,属于肌尾噬菌体科(Myoviridae);通过酶切分析表明噬菌体M1核酸为线形双链DNA;一步生长曲线显示该噬菌体感染后完成一个复制循环所需要的时间约为15-20 min。【结论】噬菌体M1属肌尾噬菌体科,研究结果为后续研究病毒在地球微生物成岩过程中所起的作用提供了实验材料。     

国家级重点教材“微生物学”的教学使用体验

采用面向21世纪国家重点教材《微生物学》进行了二次教学实践,深切地体会到该书是一本内容丰富,结构合理,重视对学生能力的培养,并较好地处理了基础性、系统性和先进性之间关系的优秀教材。对于教师建立科学、合理、适应现代微生物学发展趋势的课堂讲授体系,丰富教学内容、保证教学效果起着不容置疑的重要作用。     

治疗性乙型肝炎疫苗研究进展

乙肝疫苗多用于预防乙型肝炎病毒(HBV)。近年来,人们的研究重点转移到了针对慢性乙肝病毒携带和慢性乙肝患的治疗性疫苗的开发上。本就治疗性乙肝疫苗的分类、机制及临床疗效加以综述。     

我国辽宁，吉林地区恙虫病东方体分离株的PCR分型

为鉴定我国东北地区恙虫病东方体(Ot)型别,本文应用Ot外膜主要蛋白型特异抗原56ku构建的群、型引物,采用PCR技术对分离自辽宁、吉林地区的6株恙虫病东方体目的基因进行分析研究,并与Gilliam,Karp,Kato国际参考株进行比较.结果表明,辽宁、吉林恙虫病东方体分离株至少存在Gilliam和Karp2种型别.