荧光分子信标探针检测拉米夫定耐药基因的研究

建立荧光分子信标探针方法,探讨乙肝病毒对拉米夫定耐药的发生及病程进展。观察77例乙肝病人口服拉米夫定治疗前及治疗后12个月及24个月肝功能(ALT)及免疫学指标及检测HBVDNA含量,并采用PCR荧光分子信标技术检测YMDD耐药突变株(包括YIDDYVDD突变株)。结果表明,口服拉米夫定12个月或24个月,近半数病人血清HBVDNA转阴(小于01pgml),35%(2777)的病人出现e抗原血清转换或单纯e抗原转阴,而e抗原血清转换绝大多数发生于HBVDNA低于100pgml血清的病人。30%(2376)的病人出现YMDD耐药(YIDDYVDD),在HBVDNA小于10pgml(106拷贝ml)的病人中YMDD耐药株与野生株共存。加大口服拉米夫定剂量,绝大多数YMDD耐药株仍不能转变为YMDD野生株。提示中国乙肝患者YMDD耐药后不适合加大剂量继续使用拉米夫定治疗 。     

重组人胰岛素的纯化及其性质的初步研究

构建含有人胰岛素原基因的重组载体,并在大肠杆菌表达系统中进行高效表达。表达产物经变性、复性、凝胶过滤纯化后,再经胰蛋白酶和羧肽酶B酶切作用,产物经离子交换层析纯化得到重组人胰岛素,且具有天然生物学活性。     

紫杉醇诱导凋亡的信号传导通路及与凋亡相关的基因和蛋白

紫杉醇对临床多种恶性肿瘤都有疗效,并具广阔的市场应用前景,其抗癌机制是致使肿瘤细胞发生细胞周期阻滞而凋亡.作者结合课题组多年来的研究,对紫杉醇诱导凋亡过程中的信号通路、相关基因及蛋白进行介绍,包括微生物发酵生产紫杉醇的基因、细胞周期蛋白、端粒酶等.     

乙肝病毒DNA疫苗的构建及其诱导小鼠的免疫应答

构建含adr亚型HBV表面抗原基因的核酸疫苗 ,考察人白细胞介素II基因及重组白细胞介素II的免疫佐剂作用。用含有人白细胞介素II基因的真核表达质粒及基因重组白细胞介素II蛋白作为佐剂 ,将编码乙型肝炎病毒表面抗原的重组真核表达质粒 pVAX/HBS免疫BALB/C小鼠 (试验组 ) ,同时设置注射质粒pVAX的阴性对照组 ,并分别于第 2 ,4周后加强免疫各 1次。试验组在第 4周时开始有HBsAb产生 ,阴性对照组未测到HbsAb ,试验组和对照组均未检测到HBsAg。乙肝病毒DNA疫苗能引起小鼠特异性体液免疫应答 ,白细胞介素II的真核表达质粒的佐剂作用不明显 ,基因重组白细胞介素II蛋白具有提高小鼠对乙肝病毒核酸疫苗免疫应答水平的佐剂活性。     

不同纤维素原料超临界水解的研究

分别以稻草秸秆、经预处理的稻草秸秆、脱脂棉、微晶纤维素和定性滤纸为原材料,利用间歇式的超临界反应设备,在400℃的盐浴中进行木质纤维素的超临界水解,采用3,5-二硝基水杨酸(DNS)法对产物中的还原糖进行测定,研究反应时间对不同纤维素原料水解产糖的影响。结果表明:在超临界条件下,不同原料在较短的时间内还原糖含量均出现峰值,随着反应时间的延长还原糖产量呈现下降的趋势;稻秆、预处理后的稻秆、脱脂棉、微晶纤维素和定性滤纸的最大产糖量分别为7.42、9.05、12.55、18.01和14.24 g/L;与此对应的最佳反应时间分别为3.5、4、3、3、4 min;对应的最大还原糖产率分别为14.84%、18.10%、25.10%、36.02%、28.48%。     

猴痘病毒CrmB蛋白的结构特征及其抗原表位分析

为深入了解猴痘病毒(Monkeypox virus, MPXV)的CrmB(cytokine response modifier B)蛋白的结构特征和抗原表位，运用ORF Finder、ExPaSy、SignalP 6.0、TMHMM 2.0、Cell-Ploc、Conserved Domains、 SOPMA、SWISS-MODEL、NetNGlyc 1.0、NetPhos 3.1、IEDB、SYFPEITHI、Clustalx、MEGA 11.0、Prankweb、DrugBank等多种生物信息学方法，分析CrmB蛋白的开放阅读框、理化性质、信号肽、跨膜区、亚细胞定位、结构域、糖基化/磷酸化位点、二级/三级结构、B/T细胞抗原表位、抗原决定簇、蛋白同源性、配体结合位点、小分子抑制药物等。CrmB蛋白是由349个氨基酸组成的不稳定蛋白质，相对分子量为38 308.75;理论等电点为6.24,分子式为C₁₆₂₁H₂₅₅₀N₄₆₀O₅₅₀S₃₂;二级结构以不规则卷曲为主，有信号肽...     

不同盐浓度对盐敏感性高血压肾脏纤维化及巨噬细胞浸润的影响

目的:探讨不同盐浓度对盐敏感高血压肾脏纤维化及及巨噬细胞浸润的影响。方法:将6周龄Dahl盐敏感大鼠随机分为正盐组(0.3%氯化钠)、4%氯化钠组、8%氯化钠组三组,每组15只,持续喂养8周。在8周时间点应用tail-cuff method方法监测鼠尾血压,Masson三原色法检测三组大鼠肾脏组织纤维化情况,免疫组化及Western blotting方法检测各组大鼠肾脏巨噬细胞浸润情况。结果:1)4%高盐组及8%高盐组大鼠8周时间点血压均较正盐组现在升高,8%高盐组大鼠血压较4%高盐组进一步升高。2)4%高盐组及8%高盐组大鼠8周时间点肾脏相对重量及肾脏纤维化程度较正盐组增加,8%高盐组较4%高盐组进一步增加。3)4%高盐组及8%高盐组大鼠8周时间点肾脏组织巨噬细胞浸润增加,8%高盐组较4%高盐组进一步增加。结论:盐浓度不同对盐敏感性肾脏纤维化及巨噬细胞浸润程度影响不同,盐浓度升高可加重盐敏感高血压时肾脏纤维化及及巨噬细胞浸润。     

PROL4提高肺癌细胞LTEP-a-2对化疗药物顺铂的敏感性

PROL4(proline-rich protein 4)是我们筛选发现的一个在肺癌细胞中表达缺失的基因．为了深入研究其在肺癌中的生物学功能,构建了PROL4表达质粒,转染肺腺癌LTEP-a-2细胞,获得了稳定表达PROL4的单克隆细胞株．与空载对照细胞相比,过表达PROL4的LTEP-a-2细胞其生长的血清依赖性明显提高,软琼脂集落形成能力降低,裸鼠皮下荷瘤生长受到明显抑制．进一步研究发现,过表达PROL4可明显提高多种肺癌细胞对顺铂的敏感性,而且这种敏感性的提高与PROL4协同顺铂促进细胞凋亡密切相关．该研究结果为临床上如何提高肺癌的化疗效果提供了重要的实验依据．     

红耳龟在我国分布现状的调查

2006年11月-2010年9月期间,采用文献查阅和实地调查等方法．对国内红耳龟（Trachemys scnpta elegans）的养殖场、交易市场、放生池及野外分布情况进行了统计。查明全国17个省市自治区其有红耳龟养殖场68个;34个省市自治区有红耳龟销售的大型市场140个;18个省市自治区有红耳龟的放生池51个;22个省市自治区有红耳龟野外分布记录点104个。分析讨论后认为红耳龟入侵形式严峻,建议提高民众对红耳龟入侵防治的认识,立法规范管理,严格限制放生．加强入侵机制研究。     

肾肉瘤样癌误诊为肾滑膜肉瘤一例

目的探讨肾肉瘤样癌组织学表现及免疫表型特点,提高对肾肉瘤样癌的认识及诊断。方法通过HE染色、免疫组织化学染色和FISH基因学检测对1例肾肉瘤样癌进行诊断,并复习相关文献进行讨论。结果癌成分包含高级别透明细胞肾细胞癌,核级别4级,肉瘤样成分由非特异性高级别梭形细胞组成。肉瘤样成分侵犯主肾静脉。CD31和CD34显示血管腔隙阳性。同一肿瘤内可见高级别癌,这提示梭形细胞成分为肉瘤样转化。结论本例患者第一时间误诊为肾滑膜肉瘤,确诊后更改为肾肉瘤样癌。