阿尔茨海默病患者血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平与认知功能的关系及其预测价值分析

摘要 目的：探讨阿尔茨海默病（AD）患者血清磷酸化Tau蛋白-181（P-tau-181）、8-羟基脱氧鸟苷酸（8-OHdG）、脂蛋白相关磷脂酶A2（Lp-PLA2）水平与认知功能的关系及其预测价值。方法：选择2018年1月～2019年12月我院收治的AD患者90例作为AD组,血管源性痴呆（VD）患者90例作为VD组,同期于我院进行体检的健康者90例作为对照组,比较各组血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平、蒙特利尔认知评估量表（MoCA）、简易智力状态检查量表（MMSE）、临床痴呆评定量表（CDR）评分,比较不同认知功能障碍程度AD患者血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平,并分析各指标的相关性,应用ROC曲线分析血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平对AD的预测价值。结果：AD组血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平显著高于VD组和对照组（P＜0.05）,VD组和对照组血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平比较无统计学差异（P>0.05）。AD组、VD组MoCA、MMSE评分显著低于对照组,CDR评分显著高于对照组（P＜0.05）,AD组和VD组MoCA、MMSE和CDR评分比较无统计学差异（P>0.05）。随着AD患者认知功能的降低,患者血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平逐渐升高（P＜0.05）。Pearson相关性分析显示,AD患者血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2与MoCA、MMSE评分呈负相关,与CDR评分呈正相关（P＜0.05）。ROC曲线分析显示,P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2诊断AD的敏感度分别为88.55%、89.34%、89.77%,特异度分别为81.94%、82.56%、85.67%。结论：AD患者血清P-tau-181、8-OHdG、Lp-PLA2水平异常升高,其水平可以反映患者认知功能障碍程度,对AD的早期诊断和防治具有一定价值。     

下颌第二恒磨牙C形根管的离体实验研究

目的：寻找一种预备C形根管的有效器械,提高下颌第二恒磨牙的治愈率。方法：选用80颗具有C形根管的下颌第二恒磨牙,选择四种器械进行根管预备,第一组用不锈钢K锉,第二组用不锈钢K锉和手用镍钛器械,第三组用机用镍钛器械,第四组用超声根管治疗仪,预备中均用3％双氧水和生理盐水交替反复冲洗根管,预备后用Vitapex糊剂和牙胶尖冷侧压方法充填根管,观察根充后X线片和根尖微渗漏情况,评价充填效果。结果：四种器械根充后微渗漏有明显差异（P〈0．05）。结论：不锈钢K锉和手用镍钛器械联合应用及超声根管治疗仪为预备C形根管的有效器械。     

下颌第二恒磨牙C 形根管的离体实验研究

目的:寻找一种预备C形根管的有效器械,提高下颌第二恒磨牙的治愈率。方法:选用80颗具有C形根管的下颌第二恒磨牙,选择四种器械进行根管预备,第一组用不锈钢K锉,第二组用不锈钢K锉和手用镍钛器械,第三组用机用镍钛器械,第四组用超声根管治疗仪,预备中均用3%双氧水和生理盐水交替反复冲洗根管,预备后用Vitapex糊剂和牙胶尖冷侧压方法充填根管,观察根充后X线片和根尖微渗漏情况,评价充填效果。结果:四种器械根充后微渗漏有明显差异(P<0.05)。结论:不锈钢K锉和手用镍钛器械联合应用及超声根管治疗仪为预备C形根管的有效器械。     

NF-κB与Slug在非小细胞肺癌及其上皮间质转化中的作用

目的:研究核因子NF-κB与slug在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达情况、及二者与非小细胞肺癌上皮间质转化(EMT)的关系,为非小细胞肺癌的诊断治疗提供理论依据.方法:(1)采用免疫组化PV9000二步法测定50例NSCLC组织及20例相应正常肺组织中NF-κBP65、slug、E-cadherin及Vimentin蛋白表达情况.(2)采用RT-PCR测定其中25例NSCLC组织及10例相应正常肺组织中NF-κBP65、slug的mRNA表达情况.结果:NSCLC中NF-κBP65蛋白表达量高于癌旁正常肺组织(Z=-2.370,P＜0.05),NF-κBP65mRNA表达量明显高于癌旁正常肺组织(t=4.967,P＜0.01);Slug蛋白表达量明显高于癌旁正常肺组织(Z=-4.443,P＜0.01),SlugmRNA表达量明显高于癌旁正常肺组织(t=6.483,P＜0.01).在NF-kBP65阳性癌组织中,E-cadherin蛋白表达下降(x2=5.024,P＜0.05),Vimentin蛋白表达上升(x2=4.723,P＜0.05);Slug阳性癌组织中,E-cadherin蛋白表达下调(x2=5.984,P＜0.05),Vimentin表达上调(x2=5.028,P＜0.05).另外,NF-kBP65与Slug在蛋白水平呈极显著正相关(r=0.443,P＜0.01),在mRNA水平呈显著正相关(r=0.439,P＜0.05).NF-κB与分化程度(x2=5.024,P＜0.05)、有无淋巴结转移(x2=7.933,P＜0.01)及肿瘤的分期(x2=5.614,P＜0.05)有关,与性别、年龄、组织类型无明显相关性(P＞0.05);Slug与淋巴结转移(x2=6.174,P＜0.05)及肿瘤的分期(x2=7.317,P＜0.01)有关,与性别、年龄、组织类型、分化程度无明显相关性(P＞0.05).结论:NF-κB、slug在NSCLC中表达增强,可能与NSCLC的发生、发展、转移有关;并且NF-κB与Slug可能协同抑制E-cadherin表达,促进Vimentin表达,诱使NSCLC的EMT发生,从而为进一步研究NSCLC的EMT提供理论依据.     

弗氏志贺菌5a 型 M90T 株 ClpB 蛋白在大肠杆菌中的融合表达和纯化

目的：构建弗氏志贺菌cZp8基因的原核表达质粒,在大肠杆菌中表达后,纯化带T7标签的ClpB蛋白。方法与结果：PCR扩增得到线性化表达载体pET24a与2574bp的c加曰基因片段,利用不依赖连接反应的克隆法（LIC）进行克隆,得到重组质粒pET-ClpB,转入大肠杆菌BL21（DE3）中进行诱导表达,通过一系列条件优化,确定可溶性表达条件为在30℃下、用1mmol／LIPTG诱导2h;利用抗T7单克隆抗体琼脂糖珠进行亲和纯化,得到了纯度很高的相对分子质量为95×10^3的ClpB-T7融合蛋白。结论：实现了ClpB-T7在大肠杆菌中的可溶性表达,并纯化获得了高纯度的融合蛋白。     

类胡萝卜素生物合成途径及其控制与遗传操作

类胡萝卜素在真菌和植物细胞胞液／内质网上是由乙酰CoA经甲羟戊酸途径合成的,在细菌与植物质体中由磷酸甘油醛与丙酮酸经1-脱氧木酮糖-5-磷酸途径合成。形成的异戊烯基焦磷酸经多次缩合生成第一个类胡萝卜素八氢番茄红素,再经脱氢、环化、羟基化、环氧化等转变为其它类胡萝卜素。类胡萝卜素生物合成中涉及的酶都是膜结合的或整合入膜中的。类胡萝卜素合成是通过底物可利用性与环化分支方式进行控制的。白色体到叶绿体的转变以及花与果实成熟时类胡萝卜素合成增加是在基因转录水平调节的。进行类胡萝卜素合成酶基因的转化,可增加转化体类胡萝卜素的积累。     

狗尾草总DNA的提取与纯化研究

狗尾草杂草中富含多糖和酚类物质,而用已报道的提取方法均难得到高纯度DNA。为此,对提取植物DNA的SDS法进行了改进。用4．5ml细胞提取液,1．0ml饱和NaAc溶液,0．10倍样液体积的无水乙醇,氯仿／异戊醇溶液与样液体积比为0．80,与样液等体积的酚／氯仿／异戊醇溶液(28：21：1)和异丙醇,在65℃水浴加热60min,可从1．0g狗尾草中提取780μg纯DNA。     

西双版纳石斛属药用植物资源

系统地介绍了西双版纳地区石斛属药用植物的种类、生长环境及其分布,为中国石斛属植物资源的保护和合理开发利用提供科学依据.     

适合本科教学的"DNA的粗提与鉴定"实验

对高中生物学实验“DNA的粗提与鉴定”做了一些改进,主要有：1）选用洋葱鳞茎作为实验材料;2）增加了离心机、移液器等基因工程常用实验仪器;3）DNA的鉴定改用琼脂糖凝胶电泳法。探索出一套适合本科生的实验技术体系。