甲醇浓度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素分离纯化得率的影响

研究了毕赤酵母Pichia pastoris表达的重组人复合α干扰素(cIFN)时不同诱导甲醇浓度对cIFN分离纯化得率的影响,并分析了原因.在5L罐中采用0.25、0.50和0.75％(W/V)三个甲醇浓度诱导时,在0.75％高甲醇浓度诱导下cIFN表达水平最高,达到2.06 g/L,是0.25％低甲醇浓度诱导的1.24倍,但是低甲醇浓度诱导下cIFN分离纯化得率却高于高甲醇诱导浓度下3.75倍.另外,低甲醇浓度下发酵上清液cIFN抗病毒活性为2.85×108IU/mL,较高甲醇浓度提高了4.48倍.进一步采用SDS-PAGE和Native-PAGE免疫印迹分析不同条件下发酵液中cIFN存在状态,发现在高甲醇浓度下cIFN容易形成大量的聚合体,分别为共价聚合和非共价聚合,而cIFN单体含量较少,但是低甲醇浓度诱导下情况完全相反.最终在0.25％甲醇诱导下分离纯化1L发酵上清液可得0.73 g单体cIFN,是0.75％甲醇诱导下的3.84倍.     

香港三种人工林下植物多样性的调查

报道了作者于1995年6月至19％年1月期间对香港3种人工林－红胶木林、相思树林、荷树及其混交林林下植物区系调查的初步结果。在10个面积为200-400m2的人工林样方中,共记载了184种非栽培的植物种类,它们分属于70个科139属,其中42％的种类是树木,约占香港树木区系的20％。最常见的植物种类通常具有可以被鸟类传播的小型浆果或核果,它们也是天然次生林中的常见种。这些人工林样方的树木多样性（Shannon指数）在0-2．66之间,随着人工林的年龄增长呈增加的趋势。人工林在加速森林植被的恢复和促进退化地区生物多样性的发展中具有重要的作用,特别是植物种源严重贫乏地区森林植被恢复的重要手段。在营造速生人工林时,适当引入鸟播的野生树种,可加速人工林的自然演替速度和提高人工林的生态效益。     

玉米浆对林可链霉菌的代谢特性及形态的动态影响

菌丝形态的定量计算表明,添加玉米浆后,菌团核心面积、菌丝面积、圆形因子和边缘菌丝密度等形态学参数均呈上升趋势,菌丝形态得到明显改善,中后期和后期的平均比生长速率增大,菌体的维持代谢和次级代谢保持在较高较稳定水平,有效解决了中后期及后期林可链霉菌的比生长速率为负及林可霉素产量的增长幅度很小的问题。     

不受纤维蛋白溶酶原干扰的脂蛋白(a)酶联免疫吸附测定法

实验证实脂蛋白(a)和纤维蛋白溶酶原之间具有免疫同源性,据此建立了不受Pg干扰的酶联免疫吸附法(ELISA)检测Lp(a)。a.根据Lp(a)含有apo(a)、apoB两种抗原位点,设计了抗apo(a)-Lp(a)-酶标抗apoB法;b.抗apo(a)经Pg亲和层析柱吸附处理后的抗apo(a)-Lp(a)-酶标抗apo(a)法。同时以火箭电泳为参考,经比较后,方法间相关性良好。     

华南4种乡土阔叶树种枯落叶分解能力

采用分解袋法,研究了樟树(Cinnamomum camphora (L.) Presl)、米老排(Mytilaria laosensis Lec.)、火力楠(Michelia macclurei Dandy)和黎蒴(Castanopsis fissa Rehd. et Wils.) 4种华南乡土阔叶树种枯落叶在阔叶混交人工林和湿地松人工林下的分解能力.4个树种枯落叶的分解速率大小依次为:樟树>米老排>火力楠>黎蒴,它们在混交林中的分解速率均大于松林.4个树种枯落叶的分解动态符合Olson指数模型,分解系数(K)在混交林中均大于人工林,且在两种林地中均表现为樟树＞米老排＞火力楠＞黎蒴.不同时间枯落叶养分动态分析结果显示,4个树种枯落叶的N元素分解均出现先富集,后释放的特点,但仅在松林下出现N元素的净释放;K元素释放方式表现为先释放,后富集,仅在阔叶林下出现K元素净释放;Ca、Mg和B元素均表现为分解前期少量富积,之后开始大量释放的变化趋势,它们在阔叶林和松林下均出现净释放.4个树种在P元素释放方式上差异较大,趋势不明显.     

重组人载脂蛋白ApoA-I表达条件的优化*

对大肠杆菌DH5α发酵培养表达人载脂蛋白ApoA I的发酵条件进行了优化研究。结果表明 :将重组质粒pBV220-ApoA I转化不同的大肠杆菌宿主菌 ,筛选得高表达水平的E. coliDH5α pBV220-ApoA I表达系统 ,摇瓶发酵表达率为 22.2 % ,BL2 1 (DE3)的表达水平与其相当 ,而TG1的表达率只有11%。在FMG-5L发酵罐进行发酵条件优化 ,认为细胞生长培养的最适pH为70 ,重组ApoA I表达时的最适pH为74。分批发酵的初始糖浓度为 3 0g·L 1     

林可霉素生物合成过程中后期的调控研究

在用林可链霉菌发酵生产林可霉素的过程中,采用FUS-50L多参数全自动发酵罐,通过在线参数、离线参数等的关联分析,发现中后期的调控非常关键.从80h开始补入适量的玉米浆和碳酸钙,可增加三羧酸循环的通量,强化菌体的维持代谢和次级代谢,184h时,发酵液的生物效价由4792 μg/mL(原工艺)增加到7543 μg/mL,(优化工艺);同时,结合生产实际,将50L罐的优化实验结果应用到60 t生产罐实验,184 h时,发酵液的生物效价由4536 μg/mL(原工艺)增加到6582 μg/mL(优化工艺).有效解决了生产后期生物效价增幅很小的问题.     

肌苷和鸟苷生产菌中嘌呤核苷合成途径三段基因序列的分析

为了研究肌苷和鸟苷生产菌中与产苷有关的嘌呤核苷合成途径的遗传背景,选择了pur操纵子的启动子序列、编码SAMP合成酶的purA基因和编码GMP合成酶的guaA基因,设计合适的引物,分别从野生菌、一株肌苷低产菌和肌苷鸟苷高产菌中扩增出相应片段,经克隆和测序后,对它们进行比较和分析。分析结果表明两株生产菌的purA基因发生了1个碱基缺失,导致阅读框发生移码突变;而鸟苷高产菌在pur操纵子的启动子部分和操纵子抑制蛋白结合区域发生了近10％的突变,可能影响整个操纵子的表达调控。     

生物技术在农作物上的应用研究与进展

二十一世纪,世界将进入高新技术大发展的时代。高新技术也将全面武装农业。农用高新技术占首要地位的是生物技术。生物技术、电子和新材料是高新技术的核心。许多科学家认为:生物技术将成为二十一世纪技术革命的主角,是新技术革命的标志之一。生物技术包括转化再生性原料的所有过程,以及由微生物、动物和植物细胞培养物产生各种对人类有用物质的过程。