从新疆吉木乃地区冬季泌乳双峰驼中培养的细菌多样性及产酸、产酶活效果

[目的]本研究拟通过可培养获得驼源细菌,分析菌种分布规律,获得产酸、产酶特性的菌株资源,为驼源益生细菌的开发和利用提供资源和技术支撑。[方法]采用稀释法筛选新疆吉木乃地区冬季养殖双峰泌乳骆驼驼乳、唾液及直肠粪便中的细菌,通过16S rRNA基因序列分析对菌株进行鉴定;透明圈法对产酸和产酶的菌株进行初筛,并对菌株产有机酸能力及产淀粉酶、纤维素酶和蛋白酶活力进行复筛。[结果]共培养出63株细菌菌株,经分子鉴定得知,从驼粪中分离的35株菌以嗜冷杆菌属和不动杆菌属为主;驼乳中分离出的21株菌以假单胞菌属和明串珠菌属为优势菌属;唾液中分离纯化出7株,主要为芽孢杆菌属;平板初筛得到产酸菌共有11株,1株粪源肠膜明串珠菌(Leuconostoc mesenteroides) 2F11M乳酸产量最高,达到3.93 mg/mL;1株奶源乳酸明串珠菌(Leuconostoc lactis) 2N5M乙酸产量最高,达到12.73 mg/mL;1株粪源蒙氏肠球菌(Enterococcus mundtii) 2F17M丙酸产量最高,达到10.36 mg/mL;根据初筛产透明圈,产酶菌株主要分离自驼粪和驼奶,其中产淀粉酶的菌株17株,产纤维素酶的菌株10株,产蛋白酶的菌株15株;1株奶源的贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis) Nai1的淀粉酶活性最高,为509.07 μg/(min·mL),1株粪源鲁氏不动杆菌(Acinetobacter lwoffii) 2F5N的纤维素酶活性最高,为156.87 μg/(min·mL),1株奶源枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis) 2N2N产蛋白酶活性最高,为3.59 μmol/(min·mL)。[结论]从新疆泌乳双峰骆驼中筛选出了多种产酸、产酶菌株,且活力都较好,具有制备微生态制剂的潜力。     

基于mRNA水平的差异表达基因筛选技术

随着分子生物学技术的深入发展,基因组研究重点已经由基因组测序转向基因功能鉴定,即由结构基因组学向功能基因组学转变。研究获得不同处理下基因的差异表达谱是功能基因组学的重要一环,目前已经有多种检测基因差异表达的技术可供选用。在减法杂交技术和PCR基础上发展起来的DDRT—PCR、cDNA—RDA、cDNA—AFLP和SSH技术因其实用性而得到广泛的应用,并取得了令人满意的结果。     

重组人卵泡刺激素在昆虫细胞中的表达

为了研究在昆虫细胞中表达重组人卵泡刺激素,我们以人胎盘组织提取的染色体DNA为模板,利用重叠PCR方法扩增出hFSHβ亚基的cDNA的编码区。将此cDNA克隆入核型多角体病毒(AcNPV)非融合蛋白基因表达载体pVLl393,我们得到了表达载体pVLl393-hFSHβ,然后与BaculoGold^TM线性杆状病毒DNA共转染昆虫细胞SF9,经多次扩增后获得高滴度的重组病毒AcNPV-hFSHβ。将此重组病毒感染昆虫细胞,我们得到了在胞浆中表达的hFSHβ亚基,Western blot显示分子量大约为21kDa。以重组病毒AcNPV-hFSHβ与AcNPV-hCGoL一同感染昆虫细胞得到了具有分泌性的重组hFSH异二聚体,在非还原的条件下Western blot显示分子量大约为33kDa。     

Ⅱ型猪圆环病毒检测试剂盒的研制

猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属圆环病毒科圆环病毒属成员。PCV分两种血清型,即PCV-1和PCV-2,其中PCV-1由Tischer等于1974年检测到,对猪没有致病性;PCV-2可引起部分断奶仔猪和育肥猪的断奶仔猪多系统综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,     

中国兽类新纪录──戈壁阿尔泰高山鼠

中国兽类新纪录──戈壁阿尔泰高山鼠ＮＥＷＲＥＣＯＲＤＯＦＭＡＭＭＡＬＳＩＮＣＨＩＮＡ──ＡＬＴＩＣＯＬＡＢＡＲＡＫＳＨＩＮＫｅｙｗｏｒｄｓＣｈｉｎａ;Ｎｅｗｒｅｃｏｒｄ;Ｍｏｕｎｔａｉｎｖｏｌｅ;作者于１９９３年８月２６－２７日在新疆巴里坤县中蒙边境...     

新疆乌鲁木齐县达坂城—柴窝堡啮齿动物调查

1982年6月20—30日,作者在新疆乌鲁木齐县境内达板城—柴窝堡一带调查了啮齿动物的种类和数量,现简报如下。 此次调查共捕获啮齿动物7种:五趾跳鼠(Allactaga sibirica),小地兔(Alactagulus pygmaeus),小林姬鼠(Apodemus sylvaticus),红尾沙鼠(Meriones libycus),郑氏沙鼠(Merio-nes chengi),灰仓鼠(Cricetulus migratorius),鼹形田鼠(Ellobius talpinus)。     

伪狂犬病病毒上海株gE和gI基因的克隆及缺失转移载体的构建

根据已发表的伪狂犬病病毒(Pseudorabies Virus,PRV)的gI和gE基因序列,设计两对引物用PCR方法扩增出PRV-SH gI和gE基因,将其克隆入pUC18载体中,获得了缺失部分gI基因的转移载体质粒,命名为pgEI.     

15株中国TT病毒基因型鉴定和部分序列分析

TT病毒(TTV)为一种新鉴定的输血后肝炎相关的病毒.用聚合酶链式反应(PCR)扩增TTV DNA序列核苷酸1915到2185之间的片段,并将该片段克隆入pGEM-T Easy载体.重组克隆经酶切鉴定后,用全自动测序仪测序,发现本组病例中15株TTV毒株间的同源性在66.8%到99.3%之间,与TTV日本株比较同源性在66.1%到97.4%之间,分析结果显示在我国不仅有国外已报告的不同基因亚型毒株存在,而且,分离到的3株TTV毒株与日本株G1组和G2组的异源性分别达到13.3%-33.2%,可能为新的TTV基因亚型.     

甘蔗基因组研究进展

甘蔗基因组庞大(10 Gb)且为高倍体(5x~16x),甘蔗基因组的研究相对滞后。随着生物技术发展,如测序组装(Pacbio、Hi-C)、分子标记以及荧光原位杂交(FISH)技术,实现了对高粱、水稻以及小麦等多种禾本科植物有关的基因组研究工作。这些重要技术为研究甘蔗基因组提供了新手段。该文综述了甘蔗的起源、分类、图谱的构建,与近缘种的共线性,基因组结构以及核型演化等甘蔗的基因组学特征,以期为甘蔗基因组深入研究提供参考。     

非小细胞性肺癌患者Runx3基因启动子区甲基化状态研究

目的:分析非小细胞性肺癌(NSCLC)中Runx3基因启动子区甲基化状态.方法:运用甲基化特异性PCR技术检测62例NSCLC组织和癌旁正常肺组织中Runx3基因启动子甲基化,并分析该基因启动子甲基化Runx3基因mRNA和蛋白表达的影响及其与临床特征之间的关系.结果:NSCLC组织中Runx3基因异常甲基化率(48.4%)显著高于癌旁正常肺组织中Runx3基因的异常甲基化率(17.7%,P＝0.000);发生完全或者不完全甲基化的NSCLC组织或者正常肺组织中Runx3基因mRNA和蛋白表达显著降低.Runx3基因启动子区高甲基化和肿瘤分化程度及临床分期有相关性(P＝0.041和0.009),而与NSCLC患者性别、年龄、有无吸烟史及肿瘤类型等临床特征无关(P=0.400,0.301,0.290和0.965).结论:Runx3基因启动子区异常甲基化是导致Runx3基因在NSCLC中表达下调的重要因素,有望成为NSCLC早期辅助诊断的分子标志物之一.