牛转FAD3B基因胎儿成纤维细胞中内参基因的稳定性评估

采用RT-PCR扩增亚麻种子(Linum usitatissimum Linn)FAD3B基因,构建不同启动子的两种重组真核表达载体pIRES-AcGFP-CMV-FAD3B和pIRES-AcGFP-CAG-FAD3B,通过qRT-PCR检测转基因细胞中FAD3B基因的表达水平.以不同过表达水平的转基因细胞为试验对象,评价9种候选内参基因ACTB、GAPDH、18S rRNA、UXT、PPP1R11、RPS15A、SF3A1、EEF1A2和HMBS的稳定性.根据GeNorm、NornFinder和BestKeeper 3种统计学算法得到的稳定性值对基因进行排序.结果显示,内参基因稳定性的综合排序为PPP1R11＞EEF1A2＞1 8S rRNA＞RPS15A＞GAPDH＞HMBS＞UXT＞ACTB＞SF3A1,其中PPP1R11和EEF1A2是最稳定的内参基因.稳定内参的选择可以更加准确地校正基因的表达水平,从而为阐述基因的功能奠定了坚实的基础.     

一种与受精有关的人精子膜蛋白（BS－17）的分离纯化

本文用盐分级分离,ＭｏｎｏＱＦＰＬＣ及ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳（ＳＤＳ－ＰＡＧＥ）等方法从人精子ＣＨＡＰＳ抽提液中分离纯化出一种与不育病人血清中抗精子抗体发生特异反应的ＢＳ－１７人精子膜蛋白。该蛋白为一糖蛋白,分子量为１７．５５±２．１５ｋＤ,等电点为５．６５,中性己糖含量为１６．６７％。在人精子上主要分布于顶体区域,不同于已有报导的人精子膜蛋白。在体外实验中抗ＢＳ－１７多克隆血清可以显著影响人精子的获能（ｐ＜０．０２５）和对去透明带仓鼠卵的穿透（ｐ＜０．００５）,但不影响人精子运动性及与去透明酯酸带仓鼠卵的结合。小鼠体内被动免疫实验结果证明抗ＢＳ－１７多抗血清具有明显地抑制受精的功能（ｐ＜０．００１）。     

不同环境因子对珍稀观赏蕨类金毛狗配子体性别分化的影响

金毛狗[Cibotium barometz(L.)J.Sm.]是珍稀观赏蕨类的重要类群,为国家二级重点保护野生植物。该研究以金毛狗孢子为试验材料,探究培养密度、外源赤霉素以及光质等不同环境因子对金毛狗配子体性别分化的影响,为金毛狗人工繁育和蕨类植物配子体性别决定机制研究提供技术支持。结果表明:(1)低配子体培养密度(1个/cm2和5个/cm2)有利于颈卵器和雌配子体形成,随着配子体培养密度增加,颈卵器平均数量及雌配子体比率下降,精子器平均数量以及雄配子体和两性配子体比例增加,但配子体培养密度过高(80个/cm2)会导致大量无性配子体产生。(2)不同配子体培养密度下,随着培养时间延长,两性配子体比率均有增加,且增加幅度基本一致。(3)外源GA4显著抑制颈卵器和雌配子体形成,并显著促进精子器和雄配子体形成;外源GA3对金毛狗配子体性别分化没有显著影响。(4)白光、红光、蓝光等不同光质对金毛狗配子体性别分化未产生显著影响,但会影响配子体的发育和形态建成。     

唇鱼骨受精的细胞学研究

唇精孔器属深凹陷、短孔径型。精子在受精后2s到达精孔管、5s进入卵子。受精后8—15min,卵子进入第二次减数分裂后期。受精后10min,开始形成雄性原核。受精后20min,进入第二次减数分裂末期。受精后25min,雌性原核形成。受精后30—35min,雌性原核向雄性原核移动。受精后40min,雌雄原核接近。受精后50min,雌雄原核结合。受精后70min,受精卵进入第一次有丝分裂中期,受精后80min,进入第一次有丝分裂后期,受精后120min,进入末期。卵黄降解与其内部或外周小泡的泡状缺口紧密相关。雌雄原核结合是精子星光扩张、牵引和细胞质流动的共同结果。有多精入卵的现象。     

NAVA模式与SIMV模式在新生儿呼吸窘迫综合症中的应用效果对比

目的:观察和比较神经调节辅助通气(NAVA)模式与同步间歇指令通气(SIMV)模式在新生儿呼吸窘迫综合症中的应用效果。方法:选择2015年3月至2017年3月我院接诊的94例呼吸窘迫综合征患儿,根据治疗方式不同分为观察组(n=47)和对照组(n=47),均使用西门子公司生产的Servo-i呼吸机治疗,对照组使用SIMV模式,观察组使用NANA模式,连续治疗7天。比较两组治疗前后血氧分压(PaO_2)、二氧化碳分压(PaCO_2)、氧合指数(PaO_2/FiO_2)的变化,临床疗效及并发症的发生情况。结果:治疗后,两组PaO_2、PaO_2/FiO_2均较治疗前显著升高,PaCO_2较治疗前显著降低(P0.05),观察组PaO_2、PaO_2/FiO_2明显高于对照组[(69.12±4.10)vs.(55.74±3.65) mmHg,(256.81±28.11) vs.(212.75±26.35) mmHg],PaCO_2明显比对照组低[(45.81±3.04)mmHg vs.(50.03±3.15)mmHg](P0.05)。观察组临床疗效总有效率明显高于对照组[93.62%(44/47) vs. 74.47%(35/47)](P0.05)。两组气漏综合征、死亡发生率比较无显著差异(P0.05),观察组呼吸机相关性肺损伤炎发生率明显低于对照组[4.26%(2/47)vs21.28%(10/47)](P0.05)。结论:和SIMV机械通气模式比较,NAVA模式用于呼吸窘迫症患儿的效果更加显著,其有助于改善血气分析,且可减少并发症的发生率。     

牛病毒性腹泻病毒的初步鉴定

近年来,我们在内蒙羔羊下痢病流行区采集到一株牛病毒性腹泻病毒。83年到85年间,对内蒙三盟,二市,六旗(县),二个良种场的229份病粪样做了病毒检测,其阳性率达59％。该病毒粒子为直径40—80nm,具有囊膜的球形颗料。且与BVDV(牛病毒性腹泻病毒)的NADL株及Danish株有共同抗源。该病毒感染羔羊已传至22代,经补体结合反应测定,其效价提高了6倍。病羔羊的解剖病变观察,说明有病毒性肠炎的病变。病羊的恢复期血清测定为阳性。根据上述结果,我们初步鉴定该病毒为BVDV的一个株,暂命为BVDV的1nL株。     

驼绒藜中两个新的咖啡酯及其它化合物

对采自宁夏沙坡头的藜科驼绒藜进行化学成分研究,从中分离得到20个化合物,其中一个为咖啡酯的混合物(其中咖啡酸十九酯和咖啡酸十五酯为新的咖啡酯),一个苯甲酸衍生物,5个已知植物蜕皮激素,10个甾体化合物,3个肉桂酸及其衍生物。它们的结构经光谱分析(IR,MS,NMR)结合一定的化学方法、物理常数被确定。这些化合物都是第一次从该属植物中分离得到。     

吲哚美辛栓在门诊无痛宫腔镜输卵管插管通液术治疗中的应用

目的:吲哚美辛栓在门诊无痛宫腔镜输卵管插管通液术治疗中的临床价值。方法:60例输卵管性不孕患者随机分为观察组和对照组,对照组采用静脉麻醉方法,观察组采用术前加用吲哚美辛栓镇痛。观察清醒后腹痛情况、手术并发症,手术不良反应,记录手术出血量和手术时间。结果:观察组无痛率为83.3%,显著高于对照组(23.3%),相比较有显著性差异(P0.05);观察组手术时间和宫腔出血量低于对照组,相比较有显著性差异(P0.05);观察组手术并发症发生率为3.3%,显著低于对照组(23.3%),相比较有显著性差异(P0.05);观察组无不良反应。结论:在门诊无痛宫腔镜输卵管插管通液术治疗中应用吲哚美辛栓,镇痛效果好,且安全、方便,值得临床推广应用。     

大百合种子休眠特性及休眠破除

对哀牢山自然保护区大百合种子休眠原因、休眠破除方法进行了研究,为大百合的种子繁殖提供理论与技术依据.结果表明:大百合种子休眠的主要原因是胚发育不全,种子休眠类型为复杂的形态生理休眠.温度是影响胚生长和分化的主要因素,经高温到低温的变温[25℃/15℃(60 d)→15℃/5℃(60 d)→4℃(50 d)]层积处理,种子可完成后熟而萌发,所需时间约170 d,比自然条件下层积所需时间缩短了11～12个月.