双生子卵性相似诊断法

MZ和DZ双生子发生的遗传学特点不同,MZ双生子的遗传组成完全相同,DZ双生子的遗传组成与正常同胞是一致的。选取适当的遗传标记进行比较,可以鉴定双生子的卵性类型。选取的遗传标记越多,鉴定结果越可靠。     

酶解魔芋飞粉制备高F值寡肽最佳工艺条件的研究

目的:为了得到高F值寡肽,需要对蛋白质进行水解。方法:采用酶法水解魔芋飞粉制备高F值寡肽。通过对蛋白质水解度的测定,确定了碱性蛋白酶和链霉蛋白酶的最佳酶解条件:碱性蛋白酶加酶量0.1%,底物浓度3.75%,pH9.0,水解温度45℃,时间5h;链霉蛋白酶加酶量0.03%,pH8.0,水解温度50℃,时间7h。酶解液再经过凝胶层析分离纯化后可用于制备高F值寡肽。     

S-腺苷甲硫氨酸合成酶在大肠杆菌中的克隆与表达

目的:克隆与表达大肠杆菌S-腺苷甲硫氨酸合成酶的基因。方法:应用PCR技术从E.coliBL21(DE3)的总DNA中扩增出1.1kb的S-腺苷甲硫氨酸合成酶基因,将其连接到PGEMT载体上,测序证明正确后再将目的基因插入大肠杆菌高表达载体PET28a中,含有目的基因的重组质粒在大肠杆菌中进行表达与分析。结果:SAM合成酶在E.coliBL21(DE3)中的表达量达到23.6%,酶活达到4.17μmol/h.ml。结论:大肠杆菌表达出了具有生物活性的S-腺苷甲硫氨酸合成酶。     

多花筋骨草黑胫病及其病原菌鉴定

多花筋骨草是一种在江南广泛栽培的园艺植物,2005年秋,在杭州西湖风景区发现其黑胫病。该病害一年四季均可发生,发病最严重的是花期。黑胫病首先在寄主下部叶片的叶柄处发病,病斑初期为褐色、水渍状,很快变黑,最后整株枯萎死亡,典型症状是胫基部变黑腐烂。通过对病原菌形态学观察与核糖体DNA ITS序列分析,侵染多花筋骨草的6个分离菌株均被鉴定为多喙茎点霉Phoma multirostrata。致病性试验表明,多花筋骨草是多喙茎点霉的寄主。     

上皮性卵巢肿瘤组织MKP-1及p-ERK1/2蛋白表达的研究

研究丝裂原活化蛋白激酶（mitogen activated protein kinase, MAPK） 相关蛋白丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶（mitogen activated protein kinase phosphatase-1, MKP-1）和磷酸化细胞外信号调节激酶（phosphorylation extracellular signal-regulated kinases, p-ERK1/2）曲在上皮性卵巢肿瘤组织及正常卵巢组织中的表达差异,并探讨其在卵巢癌发生、发展中的作用,为卵巢癌的治疗提供新的思路及实验依据。选取64例上皮性卵巢癌、35例卵巢上皮性交界瘤及32例卵巢上皮性良性肿瘤患者的组织,另选取26例正常卵巢组织作对照,进行MKP-1及p-ERK1/2的免疫组化分析,并同时对其中部分病例进行上述蛋白的Western—blot研究。结果显示正常卵巢、良性肿瘤、交界瘤及卵巢癌组织MKP—1的表达依次递减,各组之间进行两两比较均有显著性差异（P〈0．01）,FIGOⅢ期与Ⅳ期卵巢癌组织MKP-1的表达显著低于Ⅰ期与Ⅱ期卵巢癌组织（P〈0．01）;而p-ERK1/2在正常卵巢、良性肿瘤、交界瘤及卵巢癌组织的表达依次递增．各组之间进行两两比较也均有显著性差异（P〈0．01）。FIGOⅢ期与Ⅳ期卵巢癌组织P～ERK1/2的表达显著高于Ⅰ期与Ⅱ期卵巢癌组织（P〈0．01）。且免疫组化及western—blot均显示MKP-1与p—ERK1/2在卵巢癌组织中的表达存在显著的负相关性,（r=-0．90,P〈0．01及r=-0．78,P〈0．01）。本研究结果表明MKP-1与p—ERK1/2的异常表达可能跟上皮性卵巢肿瘤的发生、发展有关,它们之间的表达失衡可能是卵巢癌发生、发展的原因之一．     

C／EBPβ作为LIF的中介维持小鼠胚干细胞于未分化状态

C／EBPβ（CCAAT／增强子结合蛋白β,又称NF—IL6）是一个多功能的转录因子,其主要功能之一是促进细胞分化。白血病抑制因子（LIF）是一个细胞因子．其在不同类型的细胞中具有不同的效应：它诱导前脂肪细胞分化,却抑制小鼠胚多能干细胞（mES）的分化。在mES中,C／EBPβ究竟起什么作用．尚未有报道。本文首次报告在mES中。在LIF蛋白存在下,C／EBPβ的作用是维持mES的未分化状态．即C／EBPβ是LIF的调控对象。主要事实如下。在mES细胞中．内源C／EBPβ蛋白的表达量与加到培养基中的LIF蛋白的量呈正相关。而在未分化的mES细胞中人工高表达的外源C／EBPβ蛋白和其截短形式LIP蛋白。在LIF存在下．也不但不促进反而抑制mES细胞分化,C／EBPβ的大分子异型蛋白还显著促进mES细胞的增殖：而且,在LIF去除后,这种促进mES细胞增殖的效应还能持续一段短时间。当LIF不存在时。C／EBPβ和LIP才如所预期的那样．诱导分化相关基因表达并促进细胞分化。C／EBPβ和LIP所调控的某些分化相关的基因的表达水平．当LIF存在时．也比没有LIF时显著降低。因此,在mES细胞中C／EBPβ是受LIF的调控而作为LIF的中介．维持mES于未分化状态。     

鸡源奇异变形杆菌分离鉴定及生物学特性

【背景】奇异变形杆菌(Proteusmirabilis,PM)是人畜共患病原菌,在自然界分布广泛。近年来,随着畜禽奇异变形杆菌病发病率上升和耐药性增强,亟需开展对该菌的防控研究。【目的】分离鉴定鸡源奇异变形杆菌,鉴定其耐药性、致病性、生物被膜形成能力等生物学特性。【方法】采用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)方法鉴定了从2019-2020年病鸡中分离的52株临床奇异变形杆菌。分别采用药敏试验、PCR、结晶紫染色法对临床菌株的耐药性、毒力基因及生物膜的形成进行研究。【结果】选择14株代表性菌株进行16SrRNA基因测序,结果表明所测分离菌株均为奇异变形杆菌。所有分离菌株均对克林霉素、阿奇霉素、红霉素、四环素和利福平耐药,对氯霉素和头孢曲松外的抗生素耐药性均高于50%。对分离的奇异变形杆菌的13个毒力基因检测表明,所有菌株均能检测到hpmA、hpmB、rpoA、mrpA、fliL、zapA、ureC、atfC、atfA、pmfA,而ucaA和rsbA检出率分别为19.23%(10/52)和48.08%(25/52),hlyA未检出。对分离株生物被膜形成能力检测结果表明,所有菌株均能形成生物被膜,19.23%(10/52)的分离菌株形成生物被膜能力强,而且25℃条件下成膜能力比37℃更强。【结论】鸡源奇异变形杆菌携带多种毒力基因,具有较强生物被膜形成能力,耐药模式多样且日趋严重,应进一步加强对奇异变形杆菌在动物致病性和耐药性方面的监控,以降低其感染风险。     

不同供氮水平下反枝苋的化感作用与资源竞争能力

为探讨反枝苋(Amaranthus retroflexus)在入侵农田生态系统过程中的化感作用与资源竞争能力之间的关系,采用添加活性炭的方法,比较了在有无活性炭条件下,反枝苋与大豆(Glycine max)的生物量积累、生物量分配及不同器官含氮量随供氮水平的变化情况。结果表明,在低供氮水平时,化感作用在竞争中占有的比重较大,在高供氮水平时,化感作用所占的比重相对降低;在高供氮条件下,反枝苋增加了对根和叶的生物量分配,而在低供氮条件下,则增加对繁殖器官的生物量分配;在氮素营养贫瘠的条件下,添加活性炭的大豆含氮量要明显小于不添加活性炭时,随着供氮水平的上升,差异逐渐减小。说明在入侵过程中,反枝苋可以通过调节自身的化感作用和生物量分配来适应不同的氮素营养条件。     

早产儿超声心脏几何形态学与血流动力学的相关性分析

摘要 目的：探讨与分析早产儿超声心脏几何形态学与血流动力学的相关性。方法：研究时间为2018年8月到2020年6月,选择本院收治的早产儿150例(早产组)和足月儿150例(足月组)作为研究对象,两组新生儿都给予超声检查,记录、左心室舒张期内径(Left ventricular diastolic diameter,LVDd)、左心室收缩期内径(Left ventricular systolic diastolic,LVDs)、左房内径(Left atrial diameter,LAD)、左心室相对厚度(Left ventricular relative wall thickness,LVRWT)、左心室心肌质量(Left ventricular myocardial mass,LVM)、左室后壁舒张期厚度(Left ventricular posterior walldepth,LVPWd)、左心室舒张末期容积(Left ventricular end diastolic volume,LVDV)、左心室收缩末期容积(Left ventricular end systolic volume,LVSV)、每搏输出量(Stroke volume,SV)、左心室射血分数(Left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室缩短分数(Left ventricular fractional shortening,LVFS)等指标并进行相关性分析。结果：早产组的LVDd、LVDs、LAD、LVPWd、LVRWT、LVM值都显著低于足月组(P<0.05)。早产组的LVDV、LVSV、SV值低于足月组(P<0.05),两组LVEF、LVFS值对比差异无统计学意义(P>0.05)。在早产组中,Pearson相关性分析显示LVDd、LVDs、LAD、LVPWd、LVRWT、LVM值与LVDV、LVSV、SV值存在正相关性(P<0.05)。Cox比例风险回归模型显示早产儿的出生体重、身长为影响LVDd、LVDV值的主要因素(P<0.05)。结论：早产儿超声心脏几何形态学指标与血流动力学指标呈正相关,提示超声能准确记录和监测早产儿的心脏几何形态学与血流动力学,可作为评估早产儿心功能的一种可靠方法。     

超声心动图检查指标与胎儿染色体异常的相关性

摘要 目的：探究超声心动图检查指标与胎儿染色体异常之间的相关性。方法：选择2017年1月至2020年1月于我院接受产前超声心动图检查的980例高危产妇为研究对象,均对其开展超声心动图以及染色体核型检测,记录受检者染色体核型异常具体情况,筛选出染色体核型异常产妇（80例）作为研究组,设另900例染色体正常产妇为对照组,就两组产妇的超声心动图检查指标左心室Tei指数、右心室Tei指数以及颈项透明层厚度（NT）值差异进行比较,Spearman相关性分析探究上述超声心动图指标的相关性,最后绘制心动图指标对染色体异常的诊断ROC曲线图并计算AUC值。结果：（1）比较显示研究组胎儿的左心室Tei指数、右心室Tei指数和NT值均明显的高于对照组胎儿,组间差异具有统计学意义（P<0.05）;（2）相关性分析显示NT值同染色体异常胎儿的左心室Tei值、右心室Tei值均呈现明显的正相关联系（r=0.8927,r=0.9315,P<0.0001）;（3）ROC曲线绘制显示左心室Tei值、右心室Tei值和NT值对胎儿染色体异常的诊断AUC分别为0.9889、0.7574、0.7959（P<0.05）。结论：超声心动图检查指标同胎儿的染色体异常之间存在明显的关联性,可以考虑将超声心动图作为胎儿染色体异常的初筛手段,推广于临床应用。