用改进的MVR-PCR方法检测河北地区汉族人群D7S21基因座多态性

为研究D7S21基因座在河北汉族人群分布的多态性,应用MVR-PCR ( Minisatellite Variant Repeat-Polymerase Chain Reaction)方法和聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法对124名河北汉人无关个体D7S21基因座进行了快速检测,并进行数字编码。每一个体平均得到36个数字编码,未发现任何两个无关个体所有编码相同,两无关个体36个编码相同的概率为3.48×10-18。三种重复单位a型、t型和0型出现的概率分别为：48.5 ％、49.4％和 2.1％。该基因座杂合度为0.9876,非父排除率为0.9746,多态性信息含量为0.9872。研究表明,D7S21基因座在河北汉族人群中具有高度的多态性,聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳银染法简便、快速,具有一定的实用价值。 Abstract:To study the polymorphism at D7S21 locus in Hebei Han population,124 unrelated individuals were detected rapidly by Minisatellite Variant Repeat-Polymerase Chain Reaction (MVR-PCR) and polyacrylamide gradient gel electrophoresis followed by silver staining,and digital codes were obtained.About 36 digital codes were obtained from each individual.No two unrelated individuals shared the same codes.The probability of identity in 36 digital codes was 3.48×10-18.The percentage of three repeat units,a-type,t-type and 0-type was 48.5%,49.4% and 2.1% respectively.The heterozygosity (H),excluding probability of paternity（EPP）and polymorphism information content（PIC）were 0.9876,0.9746and 0.9872 respectively.The results suggested that D7S21 locus has highly polymorphism in Hebei Han population.The method-polyacrylamide gradient gel electrophoresis followed by silver staining was simple,rapid and practical.     

MSTN对肥胖、糖尿病发生发展的影响和机制以及运动对MSTN的调控

肌肉生长抑制素(myostatin, MSTN)除负性调控骨骼肌质量外,还在肥胖、糖尿病的发生发展中起重要作用。肥胖和糖尿病患者的血清MSTN含量、骨骼肌MSTN水平显著增加,而降低MSTN表达水平或者抑制其活性可减少脂肪在体内的累积,延缓肥胖和糖尿病的发生发展。降低MSTN表达水平或活性延缓肥胖和糖尿病发生发展,除通过增加骨骼肌质量实现外,还可通过增加葡萄糖摄取,促进脂肪细胞发育、代谢和白色脂肪棕色化,提高瘦素敏感性,减轻炎症反应,以及提高线粒体功能等途径实现。运动也可显著降低肥胖和糖尿病患者的MSTN水平,这可能是运动减脂、改善胰岛素敏感性、预防糖尿病发生发展的重要机制之一。该文就MSTN对肥胖、糖尿病发生发展的影响和机制以及运动对其调控作一综述,这不仅为肥胖、糖尿病的预防和治疗提供了新靶点,也为运动改善肥胖和糖尿病发生发展的机制提供了新视角。     

耳蜗琥珀酸脱氢酶显示方法的改进

在采用耳蜗顶部灌流方法测定琥珀酸脱氢酶的活性时,本文提出了两点改进,实验动物为豚鼠:(1)孵育前用2%戊二醛磷酸盐缓冲液(pH7.4,4℃)将耳蜗预固定30min,再冰凉(—20——40℃)约3min,以便消除血管纹屏障,使该部位和柯蒂氏器官的琥珀酸脱氢酶活性能同时被显示出来。(2)在孵育液中加入细胞呼吸抑制剂(阿密妥),可使耳蜗背景色变淡,从而减少假阳性现象。通过对一些豚鼠的实验观察,所得结果基本一致。     

一类多分子反应微分方程模型的相图

本文对一类多分子反应微分方程模型进行定性分析,在第一象限内的奇点无法具体求出的条件下,讨论了轨线的有界性,分界线的位置关系以及极限环的存在性．     

大沙河水库主要入库河流氮磷营养输入分析

为了解大沙河水库流域内营养盐输入对水库水质的影响,以 2011年3月~2012年2月大沙河水库5条主要入库河流(大沙河、白沙河、双石河、富食河和沃江河)的水文水质监测数据为依据,分析了这些入库河流的流量和氮磷营养盐浓度,并估算了外源负荷总量,旨在为水库进行高效和合理的流域规划以及水质保护方案的制定提供科学依据。结果表明:位于西南方向的白沙河年平均流量最大(1.01 m³·s^-1),西北部富食河流量最小(0.23 m³·s^-1)。各入库河流总氮平均浓度变化范围为1.62~4.37 mg·L^-1,总磷平均浓度范围为0.08~0.36 mg·L^-1,其中富食河氮和磷营养盐的浓度最高,大沙河总氮浓度最低,白沙河总磷浓度最低,总体上西北部河流的氮磷浓度高于西南部河流。全年大沙河水库总氮输入量为176.7 t,总磷输入量为13.7 t。在所有入库河流中,位于水库北部的沃江河对水库营养盐输入量贡献最大,氮、磷负荷分别占总输入量的33%和32%,位于西部的双石河氮负荷最小(12%),西南方向大沙河磷负荷最小(9%)。     

聚合酶链反应检测实验动物弓形虫核酸的研究

建立弓形虫动物模型,常规方法提取肝、脾、肾、肺等组织DNA,应用聚合酶链反应（PCR）扩增,产物经电泳检测显示199bp的弓形虫特异带谱。并以γ－32p标记克隆的弓形虫特异DNA片段为探针,对扩增产物行Southern印迹分析,结果上述4种标本均出现阳性杂交带,进一步证实扩增条带是弓形虫特异DNA顺序。同时用酶标法检测显示鼠血清弓形虫抗体IgG;阳性。组织病理学检查结果,肝组织损伤较严重,肝细胞肿大,肝窦消失,脾、肾、肺组织可见轻微的病理改变。另外本文介绍一种简单PCR方法[1],取鼠尾静脉血2μl直接进行扩增,结果与酚-氯仿法提取的DNA扩增结果一致。     

吉富罗非鱼源无乳链球菌Sip-GAPDH融合基因的构建及其原核表达

利用重叠延伸(SOEing)PCR技术,将吉富罗非鱼(Oreochromis niloticus)源无乳链球菌(Streptococcus agalactiae)ZQ0910株表面免疫原性蛋白(Surface immunogenic protein,Sip)基因与甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)基因通过Linker序列融合,构建成为Sip-GAPDH融合基因。将其定向克隆至原核表达载体pET-32a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。结果表明,重组质粒pET-32a-Sip-GAPDH在大肠杆菌BL21(DE3)中表达后所获得的融合蛋白Sip-GAPDH分子量为102.01 kD,表达最佳条件为37℃,IPTG浓度0.1 mmol/L,诱导5 h。Western blot鉴定结果表明融合基因得到了成功表达。