RNA干扰在柯萨奇病毒致心肌炎小鼠模型中的抗病毒研究

为了研究慢病毒介导的shRNA(Short hairpin RNA,shRNA)在柯萨奇B组3型病毒(Coxsackievirus B3,CVB3)导致的心肌炎小鼠模型中的抗病毒作用,合成针对CVB3基因组3753～3771区域的慢病毒Lenti-sh3753,感染HeLa细胞后感染CVB3病毒,通过荧光显微镜观测shRNA的表达和病毒致细胞病变效应,并测定培养上清中的病毒滴度,将慢病毒Lenti-sh3753感染BALB/c小鼠后感染CVB3病毒,观察小鼠的存活率,心脏组织中的病毒滴度和病理变化。结果发现Lenti-sh3753能在HeLa细胞中表达shRNA,并能有效抑制细胞中病毒RNA的复制。在小鼠模型上,Lenti-sh3753能提高小鼠的存活率,降低心脏中的病毒含量,从而减轻病理反应。这些结果提示,Lenti-sh3753在细胞和动物模型中能针对性地降解CVB3病毒RNA,明显降低病毒滴度,有效控制病毒感染。     

滇池沉积物中厌氧氨氧化细菌分布的时空差异

正厌氧氨氧化作用(Anaerobic Ammonia Oxidation,Anammox)是细菌在厌氧条件下,以NO_2~-为电子受体,以铵离子为电子供体的氧化还原反应[1]。厌氧氨氧化细菌的生长极为缓慢,只能在高菌体浓度时才显示其氨氧化活性,且对氧的存在十分敏感,所以传统的微生物纯化、分离和培养的方法并不适用于厌氧氨氧化细菌。由于微生物可培养技术的局限性,因此实时荧光定量PCR技术成为定量描述难培养微生物分布和丰度的有力手段[2]。宋亚娜等[3]。利用荧光定量PCR方法对土壤中厌氧氨氧化细菌进行了检测,但对于高原湖泊底泥中厌氧氨氧化细     

不同浓度茉莉酸甲酯对悬浮培养的胀果甘草细胞合成甘草总黄酮的影响

研究了不同浓度的茉莉酸甲酯对胀果甘草悬浮培养细胞的生长和黄酮合成的影响,初步探讨了其影响甘草黄酮合成的机制.研究结果表明,一定浓度(10-200lanol/L)的茉莉酸甲酯对胀果甘草细胞的生长有抑制作用,但是能够促进甘草总黄酮产量的增加.此外,茉莉酸甲酯的添加导致细胞中过氧化氢含量升高,引起细胞中苯丙氨酸裂解酶、过氧化氢酶、过氧化物酶活性的增强和丙二醛含量升高,说明茉莉酸甲酯能够引起细胞产生防御反应,并提高防御反应的关键酶的活性,同时细胞膜在一定程度上仍发生过氧化,但最终促进了甘草总黄酮的合成,其最大产量达到对照的3.39倍.     

杏褪绿卷叶病研究现状及展望

杏褪绿卷叶病(ACLR)是由ESFY植原体引发的一类昆虫媒传病害,在欧洲许多国家已将其列为检疫对象。近年来在我国新疆部分杏园首次发现类似欧洲ACLR的发病植株。简要介绍杏褪绿卷叶病的田间发病症状,疏理了国内外关于引起杏褪绿卷叶病的ESFY植原体的流行病学和病原检测以及防治方法的研究进展,特别对分子检测技术进行全面综述。另外,分析当前研究中尚存在的问题,并对今后的研究方向进行展望。     

链霉菌H03发酵液中具有抗菌活性多糖的分离纯化及其单糖组成分析

时链霉菌H03发酵产物进行了分离纯化,并对其进行了初步鉴定．对链霉菌H03发酵产物离心,采用减压蒸馏,乙醇沉淀,沉淀组分用Sevage法、盐析法去蛋白,用透析法除去小分子物质以及用Sephadex-100柱层析等技术进行纯化,纯化物质仍具有较强的抗菌活性、利用化学方法、紫外光谱、红外光谱、气质联用等方法分析该抗菌活性物质的理化性质．结果表明：从链霉菌的发酵产物中分离纯化得到的具有抗菌活性物质是多糖,这种多糖是由甘露糖、葡萄糖、半乳糖3种单糖组成的,其组成比例约为2：1：1．     

以能力培养为导向的基于工厂化生产实践指导的“发酵工程”教学研究与应用

"发酵工程"是生物技术和生物工程等专业的核心基础课程,应用性非常强,其工艺流程包括上游的菌种和培养基,中游发酵动力学和过程控制,以及下游的发酵产物分离制备与精制等。在实际生产过程中,工艺流程的每个阶段都是理论知识在生产实践中的具体应用。授课过程中,如果教师只介绍教材的基础理论知识,而不结合具体生产实践,学生不仅难以掌握知识点,而且对利用发酵工程生产产品的工艺流程没有深刻的认识,更不知道如何去应用理论知识指导实际生产。由于发酵工程应用的重要性,发酵工程教学质量的好坏直接影响学生的专业素质与就业情况。因此,本课程组开展了基于生产实践指导的发酵工程教学方法的研究与应用,在发酵工程课程教学中,结合生产实践中的科研经验,总结教材的理论知识与生产实践的结合点,使教材中较为抽象、复杂的理论知识具体化。这样不仅激发了学生的学习兴趣,加强了学生对理论知识的理解,更为重要的是,结合实际科研、生产过程中曾面临的问题,引导学生如何利用基础理论知识去解决这些问题,这种授人以渔的方法对于指导学生的科研和毕业后的生产实践具有重要的应用价值。     

热带假丝酵母1230细胞色素P450基因CYPA14与CYPA16的克隆和表达

细胞色素P450(CYP)是一种单加氧酶,在热带假丝酵母(Candidatropicalis)ω-氧化过程中发挥关键作用。通过对来源不同的P450基因进行同源性分析,首先克隆到热带假丝酵母1230中P450基因的部分序列,再利用基因组步行法克隆其未知序列,结果分别获得了两个P450同工酶基因CYPA14和CYPA16的完整序列。经PCR方法证实,二者在染色体上的位置相邻,其读码框分别编码522和540个氨基酸残基的肽链。经NCBIBLAST搜索比较后发现,二者与热带假丝酵母ATCC20336中的P450成员CYP52A14和CYP52A16分别编码的序列几乎完全一致,与热带假丝酵母ATCC750中的P450成员CYP52A2和CYP52A1也具有较高的相似性。同时,对经诱变后的几株二元酸生产菌株的CYPA14与CYPA16也进行了克隆和序列比较,发现部分序列中的个别氨基酸残基发生了突变。CYPA14和CYPA16均在酿酒酵母中获得了有效表达,其中CYPA16的P450表达含量高于CYPA14,后者有部分表达产物发生了变性。     

桂西南石漠化区蚬木林土壤呼吸空间变异研究

通过对石漠化区蚬木林土壤呼吸及其影响因子的测定和分析, 研究蚬木林土壤呼吸的空间变异性。结果表明: 随取样面积增大, 土壤呼吸速率变异系数从25.64%增至48.48%; 土壤呼吸空间变异幅度为46.84%, 高于其他环境因子, 土壤温度和pH 变异幅度最小。土壤呼吸仅与土壤温度间存在显著相关关系, 与其他因子无显著相关性。在95%置信水平、85%估计精度下, 蚬木林土壤呼吸测定取样需大于37 个, 而土壤温度、土壤pH 仅需1 个取样即可, 样本容量计算可明显降低取样工作量。     

魔芋软腐病菌的致病条件及致病因子

本文研究了魔芋软腐病菌欧文氏杆菌的致病条件以及致病过程中起重要作用的因子。结果表明,该病原菌侵染魔芋的最适温度范围为25°C-30°C,湿度范围为90%-95%。当魔芋受病菌侵染后,从魔芋病斑处和病健处都能检测到果胶酶和纤维素酶,随着腐烂程度的升高酶活迅速升高,果胶酶酶活第6天达到最高值1.2473U/mg,纤维素酶酶活在第9天达到最高值1.0813U/mg。表明纤维素酶和果胶酶在魔芋软腐病菌致病过程中起重要作用。     

干旱胁迫对桂西南石漠化地区主要造林树种光合与耗水特性的影响

研究植物耐旱特性和耗水问题对困难立地植被恢复的树种选择具有重要意义。以桂西南岩溶山地常见造林树种肥牛树(Cephalomappa sinensis)、香樟(Cinnamomum camphora)和仪花(Lysidice rhodostegia) 2年生实生苗为对象,采用盆栽苗木称量法和Li-6400光合系统测定方法相结合,研究不同土壤水分条件下3个树种的光合特性、水分利用效率和蒸腾耗水特性。结果表明:3个树种苗木净光合速率(Pn)、气孔导度(Gs)和蒸腾速率(Tr)随土壤干旱胁迫增强呈下降趋势;胞间CO2浓度(Ci)随干旱增强先呈下降趋势,至重度干旱时显著升高,气孔限制值(Ls)则随干旱增强呈增加趋势,至重度干旱时则显著下降(P<0.05);轻度和中度干旱胁迫导致苗木Pn下降的主要原因为气孔因素;重度干旱胁迫下Pn下降的主要原因为非气孔因素。肥牛树在轻度干旱胁迫下水分利用效率最高,至重度干旱胁迫时显著下降;香樟和仪花的水分利用效率随干旱胁迫增强而增加,以中度干旱时期最高,至重度干旱时显著下降(P<0.05);苗木全天耗水量均随干旱胁迫增强而下降,相同土壤水分条件下以仪花的...