Visualization of Golgia apparatus as an intracellular calcium store by laser scanning confocal microscope

Using laser scanning confocal microscopy,we have found that the in cells loaded with fluo-3/AM,highest intracellular Ca^2 in the perinuclear region is associated with the Golgi apparatus.The spatiotemporal subcellular distribution of Ca^2 in living human fibroblasts exposing to calcium-free medium in response to agonists has been investigated.PDGF,which releases Ca^2 from intracellular stores by inositol(1,4,5)-trisphosphate pathway ,produced a biphasic transient rise in intracellular calcium.The initial rise was resulted from a direct release of calcium from the golgi apparatus.Calcium could be also released from and reaccumulated into the Golgi apparatus by the stimulation of thapsigargin,an inhibitor of the Ca^2 transport ATPase of intracellular calcium store,Permeablizing the plasma membrane by 10μM digitonin resulted in the calcium release from the Golgi apparatus and depletion of the internal calcium store.These results suggest that the Golgi apparatus plays a role in Ca^2 regulation in signal transduction.     

小鼠2—细胞胚胎单个卵裂球体外培养及其发育形成囊胚的玻璃化冷冻保存技术的研究（简报）

The present experiments were designed to study the effects of glucose, EDTA, glutamine on the in vitro development of single blastomeres from 2-cell embryos in mouse, and the efficiency of cryopreservation of blastocysts from single blastomers with different vitrification. Single blastomeres derived from female ICR x male BDF1 2-cell embryos were cultured in mKRB with or without glucose, EDTA and glutamine, respectively. The expanded blastocyst rates were significantly different between in mKRB with glucose and without glucose (34% vs 65%); The blastomeres were cultured in mKRB with EDTA and glutamine but glucose, the expanded blastocyst rate (90%) was significantly higher than other groups. The blastocysts derived from single blastomeres were vitrified in liquid nitrogen after equilibration in GFS40 for 0.5-2 min, the survival rate 24%-51%. The blastocysts were pretreated in mPBS with 10% glycerol for 5 min, followed by exposure to GFS40 at 25 degrees C for 0.5 min, then vitrified in liquid nitrogen(two-step method), the survival rate was 61%. However, the survival rates increased to 64% and 70% when the blastocysts were vitrified(one-step method) ater equilibration in EFS40 at 25 degrees C for 0.5-1 min.     

磷限制下大型海灌与微灌间资源竞争理论的实验验证

用一次性培养结合Monod方程测得海洋微藻－亚心型扁藻（Tetraselmis subcordiformis(Wile)Hazen)与大型海藻－孔石莼（Ulva pertusa Kjellm.)磷限制下的生长动力参数。孔石莼具有较低的半饱和生长常数及最大生长率,其分别为0．016μmol/L和0．16d^-1,而亚心型扁藻的半饱和生长常数和最大生长率分别是0．021μmol/L和0.83d^-1。两种藻类间的营养竞争实验采用半连续培养法在磷限制制条件下进行,实验过程中,分别对两者施予相同或不同的去除率,使两者享有相同或不同的资源需求值R^*。由Monod方程所作的竞争预测与实验观察结果的比较显示：仅在两种藻类间的资源需求值R^*差异显著（t检验,P＜0．01）时,Monod方程才能对竞争结果作出较为准确的预测;在两种藻类享的相同的资源需求值R^*时,亚心型扁藻在竞争中取代孔石莼。Monod模型仅能部分预测大型海藻与海洋微藻间的竞争结果。     

远程医学在北京大学肿瘤医院的实践与思考

远程会诊和远程教育是对医疗卫生工作的重要拓展和补充。通过分析北京大学肿瘤医院675例远程会诊案例,阐述了医院运用远程医学平台开展远程会诊和远程教育工作的方法、流程和特点,探索医院促进远程医疗工作的方法。     

医患纠纷仲裁的必要性与可行性及其建议

构建医患纠纷仲裁机制在法理和实践上均具有可行性。建议在现有仲裁机构内增设医患纠纷仲裁院,组织合议制仲裁庭,加强仲裁前的调解和设计灵活的仲裁程序,组建高素质的仲裁员队伍。     

我国综合医院门诊与出院医药费动态比较及相关分析

目的 探讨我国综合医院门诊和出院药费、检查治疗费动态规律,进行建模拟合预测,比值、相对增率计算和相关性分析研究。方法 以2004—2011年门诊次均、出院人均医药费为资料,计算相对增率、分析比值变化,建模拟合、预测2012年情况,作多层面相关分析。结果 原始数据均作回归预测;随医院级别降低,药费与检查治疗费比值为门诊次均小而出院人均大,比值时序变化无关;计算相对增率从同指标不同医院间、同医院门诊与出院间、同医院门诊或出院的药费与检查治疗费间等多层面检验相关显著性。结论 全面提取医药费动态信息,经原值建模拟合预测、相对增率和比值计算和相关分析等综合研究途径有决策参考意义。

     

东方鲎C因子的分段克隆及表达

东方鲎C因子 (factorCfromTachypleustridentatus)是鲎血细胞中的一种对内毒素敏感的丝氨酸蛋白酶原 ,它与内毒素特异结合的特性 ,使之具有很大的应用价值。根据报道的C因子序列 ,设计了两对引物 ,以中国福建沿海的东方鲎 (Tachypleustridentatus)为材料抽提其血细胞总RNA ,首次用RT PCR的方法分两段扩增了鲎血中编码C因子蛋白的基因全序列。序列分析表明 ,得到的FC基因与文献报道的来自日本的东方鲎的FC有很高的同源性。将分段克隆得到的两段FC片段经相应酶切后 ,与含T7启动子的质粒 pET 2 8a( )在一个体系中作连接反应 ,构建表达质粒pET2 8a FC ,转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,筛选表达菌株。表达菌株经 1mmol/LIPTG诱导表达 2 .5h后 ,收集菌体并超声破菌。经SDS PAGE分析表明 ,在 110kD左右处有明显的表达条带 ,大小与FC的计算分子量相吻合。但表达产物以包涵体形式存在。经洗涤与变复性后 ,重组FC在体外表现出明显的抑菌活性。同时蛋白质印迹实验也提示了在大肠杆菌中FC的单基因表达物可能发生部分自剪切反应 ,而形成了额外的免疫印迹条带     

豌豆细胞核仁中U3 snoRNA的分布和转运

rRNA前体剪切是发生在核仁中重要生物学事件。U3 snoRNA作为rRNA的一个剪切因子被认为是rRNA前体剪切第一步,即5′ETS剪切所必需的,鉴定U3能够为确定rRNA前体剪切位点和剪切产物转运提供间接证据。,本文利用原位杂交技术研究了豌豆（Pisum sativum L.)核仁中U3 snoRNA的分布和转运。结果表明,U3 snoRNA分布在致密纤维组分（dense fibrillar component,DFC)和颗粒组分（granular component,GC)中,在纤维中心（fibrillar center,FC)没有分布 ,当用放线菌素D（actinomycin,D,AMD)处理豌豆根端分生细胞时,rDNA转录受到抑制,标记信号减弱,随着AMD处理时间的延长,标记信号逐渐变弱并出现在DFC远轴区域和GC区域。本文结果提示,rRNA前体剪切发生在DFC和GC区域,剪切产物从围绕FC的区域向周边转运。     

养殖场鱼种池内死鱼原因调查和实验报告

1986年11月下旬,武昌某养殖场鱼种池内的鱼种突然大量死亡,成千上万的水鸟飞临池面觅食,上百群众,抡捞漂浮在水面的死鱼,这样的严重死鱼现场实属罕见。除了无数漂浮于水面的死鱼外,还有一些濒临死亡的鱼正处于昏迷状态与急剧地翻转和挣扎,为了查明死鱼原因,我们进行了现场调查和实验室研究和分析。     

大剂量尿激酶治疗急性下肢深静脉血栓形成18例报告

目的：探讨大剂量尿激酶溶栓治疗急性下肢深静脉血栓形成（DVT）的临床效果。方法：本组18例DVT患者,先将0．9％的生理盐水(N．S）50ml＋尿激酶（UK）50万U,由患肢远端静脉推入,5分钟推完,然后由健肢、患肢分别将0．9％N．S1000ml UK100万U持续24小时静脉滴入,1次／日,共7－10天。结果：12例痊愈,6例显效,总治愈率为100％,未出现肺梗塞、脑溢血和死亡病例。结论：急性下肢深静脉血栓形成时,应用大剂量尿激酶,能显著提高患肢血管通畅率。