二化螟滞育幼虫与非滞育幼虫的抗药性比较研究

在室内测定了二化螟滞育幼虫与非滞育幼虫对杀虫单和三唑磷的抗药性。测试结果表明,二化螟滞育幼虫比非滞育幼虫具有更高的抗药性。杀虫单对二化螟滞育幼虫与非滞育幼虫的LD50分别为24．3452μg／头与10．4721μg／头;三唑磷的LD50分别为0．0685μg／头和0．0497μg/头.     

利用烟草表达人凝血IX因子 (hFIX)的研究

血友病B是凝血IX因子（hFIX）缺乏所导致的一种出血性疾病,通过输血和hFIX浓缩剂进行治疗疗效显著,但存在治疗费用高和安全隐患,因而获得安全、廉价的人凝血IX因子对血友病B治疗具有重要意义。植物系统表达外源蛋白在生产成本和安全性方面具有优势。为此,本研究构建含人凝血IX因子基因（hFIX,2.8kb）植物双元表达载体p35s-2300：：gus：：noster,用农杆菌介导法转化烟草 "百日红",通过PCR和Southern blot分析证实获得4株独立转基因植株, hFIX在转基因烟草基因组中的拷贝数为1-4个;RT-PCR和ELISA检测结果表明,hFIX在转录和翻译水平已成功表达,hFIX在转基因烟草叶片中的表达量为2.5~8.8ng/g·FW,并具有免疫活性。本研究为利用植物系统表达hFIX的后续研究作了必要准备,也为利用植物系统表达其他药用蛋白研究提供了一些理论和实验参考。     

蒲地蓝配合揿针治疗小儿颈部淋巴结炎对CRP表达的影响

摘要 目的：探讨蒲地蓝配合揿针治疗小儿颈部淋巴结炎对C-反应蛋白(C-reactive protein,CRP)表达的影响。方法：2017年8月到2019年6月选择在本院诊治的小儿颈部淋巴结炎84例作为研究对象,根据随机数字表法把患儿分为联合组与对照组各42例。对照组给予蒲地蓝治疗,联合组给予蒲地蓝配合揿针治疗,疗程都为14 d,记录治疗效果与CRP表达变化情况。结果：治疗后联合组的总有效率为97.6 %,显著高于对照组的85.7 %(P<0.05)。联合组的局部消肿时间、局部压痛消退时间、发热消退时间都显著少于对照组(P<0.05)。两组治疗后的血清CRP值低于治疗前,联合组低于对照组,对比差异都有统计学意义(P<0.05)。两组治疗后的CD4⁺T淋巴细胞比例都高于治疗前,联合组高于对照组,对比差异都有统计学意义(P<0.05),两组治疗前后CD8⁺T淋巴细胞比例对比差异无统计学意义(P>0.05)。结论：蒲地蓝配合揿针治疗小儿颈部淋巴结炎能抑制CRP的释放,提高小儿的免疫功能,从而促进临床症状的消失,提高总体治疗效果。     

MRSA气溶胶诱导烫伤SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型

目的探讨烫伤条件下,建立MRSA气溶胶致SKH-1无毛小鼠皮肤感染合并肺炎模型的方法及其评价指标。方法 48只SKH-1无毛小鼠,随机分成PBS对照组,单纯感染组和烫伤合并感染组。合并感染组小鼠皮肤烫伤后,MRSA（ST-239）气溶胶呼吸道感染,采用体重、血常规、菌血症率、皮肤和脏器荷菌量、病理组织学变化和分子生物学等指标对模型进行综合评价。结果与其他两组相比,合并感染组小鼠第3天体重下降明显;白细胞数显著增多;菌血症率达100%;皮肤和肺荷菌量较高,分别达108CFU/g和106CFU/g;镜下观察皮肤和肺炎症病变明显;免疫组化结果显示皮肤组织内CD138呈阳性表达;multi-PCR测定感染组织内nuc和mecA基因均为阳性。结论 SKH-1无毛小鼠烫伤再辅以MRSA气雾攻击的方式,可成功建立能够模拟临床上烧烫伤患者继发MRSA肺炎的动物模型,此模型对于抗MRSA药物药效评价研究具有重要临床应用价值。     

壮阳药效动物实验评价方法的改进

目的对壮阳药效评价方法进行优化,以探求更为有效的候选药物筛选方法。方法模型组大鼠均灌胃给予西地那非10 mg/kg,对照组大鼠给予相同容量的生理盐水灌胃,每天1次,连续灌胃给药14 d。每次给药后连续记录2 h内大鼠阴茎勃起、阴部理毛、爬背次数和参与动物数,并计算PEI值。采用改良的壮阳药效评价方法,整个过程采用摄像头观察并在不同时间段给予雌鼠诱导。结果在雌鼠诱导组中,模型组大鼠给药后2 h PEI值较对照组明显升高（P〈0.05）。在模型组中,与人为观察组相比,摄像头观察组大鼠给药后2 h PEI值明显升高（P〈0.05）;与非雌鼠诱导组相比,雌鼠诱导组大鼠给药后2 h PEI值明显升高（P〈0.05）;与持续诱导组相比,间断诱导组2h PEI值无明显差异,但60～120 min时间段PEI值明显升高（P〈0.05）。结论优化后的壮阳药效评价方法能更为有效的评价候选药物的壮阳药效。     

羽衣甘蓝胁迫应答基因BoRS1转化烟草的初步研究

将克隆于羽衣甘蓝的胁迫应答基因BoRS<、I>1连入中间载体p35S 2 30 0 ::gus ::noster相应位点,成功地构建了含BoRS1基因的植物双元表达载体p35S 2 30 0 ::BoRS1::noster,并通过农杆菌介导法对烟草进行了遗传转化。PCR检测结果表明目的基因BoRS1已成功地导入并整合到烟草基因组中。RT PCR分析显示,在不同的转基因烟草植株中BoRS1表达量存在差异。转BoRS1烟草的耐干性和甘露醇胁迫研究表明,BoRS1基因的表达对提高植物抗干旱胁迫能力有一定的作用。     

妊娠晚期胎羊宫内外科手术的实验研究

目的　以妊娠晚期孕羊为研究对象 ,探讨宫内外科手术的可行性 ,为开展胎儿外科研究建立动物实验模型。方法　通过对妊娠 12 0d左右的 4只双胎孕羊进行宫腔手术 ,切除双胎中 1只胎羊的脚趾或唇部皮肤 ,观察妊娠结果。并取分娩后羔羊脑组织及手术切除部位皮肤作组织形态学观察和评价。结果　妊娠羊经阴道足月分娩后羔羊均成活 ,脚趾及唇部切除处未见疤痕形成 ,皮肤组织形态学观察对照组与实验组未见明显差异 ;脑组织形态学检查仅有 1例实验组羔羊有轻度病理学变化 ,与对照羔羊有差异 ,其余 3例实验羔羊与对照羔羊脑组织结构均正常 ,未见有明显的病理学改变。结论　妊娠羊经宫内胎羊外科手术后能够持续妊娠状态并经阴道自然分娩 ,产出羔羊的精神状态及病理组织学观察结果表明 ,利用妊娠晚期孕羊进行胎儿外科动物实验研究是可行的 ,为进一步开展人类先天性畸形胎儿的早期治疗奠定了动物实验基础     

转基因EGFP小鼠的主要脏器重量及脏器系数

目的测定转基因C57BL／6-Tg（ACTB—EGFP）1osb／J（EGFP）小鼠主要脏器重量和脏器系数。方法实验选用5～6周雄性、6～7周雌性小鼠各15只,用sartorius电子天平分别测定体重和9个主要脏器重量,计算脏器系数,并对雌雄脏器重量和脏器系数之间进行比较。结果雌雄小鼠脏器重量间比较,雄性鼠体重明显大于雌性的体重（P〈0．01）;心、肝、肺、肾、肾上腺的重量间差异极显著（P〈0．01）;脾脏比较差异显著（P〈0．05）;雌雄间脏器系数比较,肺、脑、肾上腺间差异极显著（P〈0．01）,心、肝、脾、肾脏间差异不显著（P〉0．05）。结论转基因EGFP小鼠不同性别间脏器重量及脏器系数间有一定的差异,为相关研究打下了基础。     

Pfu DNA聚合酶的表达条件优化及纯化研究

Pfu DNA聚合酶是分子生物学研究中最常用的高保真DNA聚合酶之一。本研究对重组菌株的Pfu酶基因表达条件进行优化,以提高Pfu DNA聚合酶的表达效率。通过在菌液深度OD600=0.87时加入1.5 mmol/L的IPTG进行诱导培养,诱导培养时间为11.03 h,用酶溶法对重组菌株进行破胞提取粗酶液,经热变性法与盐析沉淀法对杂酶进行纯化,最后经过透析后得到纯酶。采用考马斯亮蓝G-250法对酶进行含量测定及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测纯度,最后使用PCR反应检测提纯后的Pfu酶的活性。结果表明优化处理后制备的Pfu DNA聚合酶,其纯度、酶活性和酶特异性均达到市售的Pfu DNA聚合酶水平。本研究为Pfu DNA聚合酶的开发和利用奠定了基础。