酵母蛋白质YJL084c的磷酸化分析

PCL6、PCL7(PAP1)和PHO80为酵母蛋白激酶PHO85的细胞周期蛋白因子 ,同属于PHO80亚类 ,它们在蛋白质序列上有较高的同源性 ,彼此在功能上有一定程度的重叠。YLR190w为先前鉴定的PCL7 PHO85的一个底物 ,根据BLAST比较 ,YJL0 84c与YJLR190w在一段区域内有一定的同源性 ,并且根据已公布公共数据库 ,YJL0 84c是PCL6的一个结合蛋白。利用双杂交系统分析了YJL0 84c与这三个细胞周期蛋白因子之间的相互作用 ,表明PCL7也可以结合YJL0 84c。利用免疫共沉淀证实它们在体内的相互作用 ;通过体外GST沉降分析 ,验证它们的体外相互作用。YJL0 84c的体外翻译产物可以被PCL7 PHO85复合物磷酸化 ,进一步分别表达纯化YJL0 84c的氨基末端、中间和羧端三部分的GST融合蛋白片段 ,PCL7 PHO85复合物可以磷酸化其中间部分 ,而对N末端和C末端则未表现出磷酸化。以该中间片段蛋白质为底物 ,进一步研究高低磷条件对其磷酸化的影响。PCL7 PHO85对YJL0 84c的磷酸化受到无机磷条件的明显影响 :高磷条件下 ,磷酸化程度高 ;而低磷条件下磷酸化程度低。有意思的是 ,PCL6 PHO85免疫沉淀复合物也表现出同样的磷酸激酶特征。于是分析PHO81与这三个细胞周期因子之间相互作用。此外 ,还构建了Yjl0 84c的缺失株 ,分析了缺失的可能影响。     

球子蕨孢子的无菌繁殖

以球子蕨成熟孢子为外植体,研究了不同激素及浓度对其孢子萌发、愈伤组织诱导、丛生芽分化及生根的影响。结果表明:孢子萌发最适培养基为1/2MS+2%蔗糖,20d后萌发率达55.7%;诱导愈伤组织的最适培养基为MS+0.5mg·L-1KT+0.5mg·L-12,4-D,诱导率达36%,愈伤组织为绿色颗粒状;颗粒状愈伤组织在不添加激素的MS培养基中即可生长出大量丛生芽,转化率可达49.3%;低浓度(0.2mg·L-1)的IAA可有效促进幼孢子体苗生根。     

酵母PAP1与PHO85激酶复合物对YLR190w的磷酸化

酵母基因Pho85编码一个依赖于细胞周期蛋白 (cyclin)的蛋白激酶 (CDK) ,参与多种调控途径。PHO85功能的多效性归于其相关的细胞周期因子 ,现已经鉴定了 10个与PHO85相关的细胞周期因子 (PCL)。为了筛选PAP1 PHO85激酶复合物的特异底物 ,以PAP1为靶分子 ,利用酵母双杂交 (two hybrid)系统从酵母cDNA文库中克隆到一个与PAP1相互作用的蛋白质因子的基因 ,Ylr190w。Ylr190w编码 491个氨基酸的多肽链。体外翻译的YLR190w与纯化的融合蛋白GST PAP1可以被谷胱甘肽亲和柱共同吸附 ,这表明PAP1与YLR190w在体外也可以结合。用免疫沉淀获得的PAP1 PHO85复合物可以磷酸化在大肠杆菌中表达GST YLR190w ;并受到无机磷浓度影响 :高磷条件时磷酸化程度高 ,低磷条件时磷酸化程度低。它能与酵母细胞内YAF9结合 ,YAF9是人具有转录调控活性蛋白质因子AF9的酵母同源物。YLR190w与YAF9的相互作用受到磷条件影响 ,突变YLR190w蛋白S/TP位点的S和T后 ,它们的相互作用明显减弱 ,且不再受到磷条件影响     

负压封闭引流技术在躯干部皮肤恶性肿瘤切除术中的应用

目的:探讨负压封闭引流技术应用于躯干部皮肤恶性肿瘤切除术的临床效果,并分析其临床应用价值。方法:回顾性分析2012年5月~2015年3月我院收治的11例躯干部皮肤恶性肿瘤患者的临床资料,均予行肿物切除术并同时行自体皮游离移植术,并外用持续负压封闭引流术于植皮术区。结果:所有患者均接受肿物切除+植皮+封闭负压引流技术治疗。9例患者于4~9天后拆除负压材料,皮片全部成活。1例患者治疗后24小时内吸引管堵塞,经术后于24小时内行管路冲洗疏通后再次行负压吸引,于术后5天首次拆除负压材料,见皮片部分成活,部分皮片仍有浮动,血运未明显建立,予以扩大皮片引流孔后再次行负压封闭引流术,术后9天再次拆除负压材料,见皮片成活较好。1例患者治疗4天后出现新鲜渗血经引流管引出,予拆除负压材料,所植皮片下有积血块,有新鲜渗血,予以清创后再次行负压封闭引流术,术后9天再次拆除负压材料,见皮片成活较好。随访半年到3年,所植皮片无破溃,肿瘤无复发。结论:躯干部皮肤恶性肿瘤切除术中,植皮联合封闭式负压引流技术可使所植皮片固定确实,充分引流渗液积血,利于皮片成活,对无法有效包扎固定肢体特殊部位(肩部、臀部、躯干部)等术区植皮提供了有效方法,具有一定的推广应用价值。     

金顶侧耳胞内多糖生物活性研究

对金顶侧耳Pleurotus citrinopileatus胞内多糖的热水浸提工艺进行研究,并研究了该多糖的抑菌活性以及对超氧阴离子自由基和亚硝基的清除作用。结果表明,金顶侧耳胞内多糖的最佳提取工艺为:提取温度60℃,液料比100:1,时间4h,此条件下多糖提取率可达17.65%。该多糖对埃希氏大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有抑制作用且对超氧阴离子自由基和亚硝基有较强的清除作用,说明该多糖具有明显的生物活性。     

丛枝菌根真菌对郁金香生长及其切花生理的影响

为认识丛枝菌根真菌（arbuscular mycorrhizal fungi,AMF）对郁金香Tulipa gesneriana生长、光合特性以及切后瓶插期生理的影响,通过温室盆栽接种试验,以摩西斗管囊霉Funneliformis mosseae和幼套近明球囊霉Claroideoglomus etunicatum分别单独接种和共同接种,进行温室盆栽实验。结果表明,共同接种F. mosseae和C. etunicatum的郁金香叶片叶绿素a含量、叶绿素b含量和总叶绿素含量均显著高于不接种对照,分别增加了32%、18%和28%。与不接种对照相比,接种AMF处理的郁金香叶片的净光合速率、气孔导度、胞间CO₂浓度和蒸腾速率均显著提高,共同接种F. mosseae和C. etunicatum的郁金香在正午12点达到光合参数最大值。接种AMF处理的郁金香花葶长、地上干物质质量、地上鲜物质质量和叶面积均高于不接种对照,开花期早于不接种对照。切花瓶插期间,接种AMF处理的郁金香切花花瓣可溶性糖含量、可溶性蛋白质含量、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化物酶（POD）等抗氧化酶活性比不接种对照显著提高;且降低了膜脂过氧化产物丙二醛（MDA）含量和相对电导率。接种处理有效地改善切花花枝的水分平衡,并延长郁金香切花的瓶插寿命、最佳观赏期和花期。     

胎盘屏障建立与维持的机制

胎盘是妊娠期维持胎儿正常生长发育和母亲健康的临时性器官,直接介导了母胎之间的对话。胎盘防御屏障功能的建立与维持是正常妊娠维持的重要基础,一方面,胎盘发挥了抑制母体对胎儿免疫排斥的作用,同时,胎盘需要抵抗致病微生物的感染。本文从胎盘发育的角度出发,从细胞学、免疫学等多重领域探讨了胎盘防御屏障建立及功能维持的细胞和分子机制,重点介绍了胎盘合体滋养层细胞抗感染的作用方式,包括细胞自噬、外泌体途径、细胞连接及细胞骨架等;同时介绍了胎盘屏障功能异常与子宫内感染尤其是TORCH致病微生物感染的致病关联。     

黄土丘陵区草本植物覆盖下生物结皮对坡面径流流速的削减作用

生物结皮是干旱半干旱地区的常见地被物,与植物共同影响坡面径流及流速。迄今鲜有研究关注植物和生物结皮共同覆盖对流速的影响,是干旱半干旱地区坡面侵蚀驱动因素研究的薄弱环节。本研究以黄土丘陵区退耕草地为对象,通过野外模拟降雨试验,研究草本植物覆盖下有无生物结皮及不同组成生物结皮(多藻少藓、多藓少藻和藓)对径流流速的影响。结果表明: 植物和植物+生物结皮覆盖显著降低了流速,植物覆盖较裸土降低70.7%,植物+生物结皮覆盖较裸土降低83.1%;植物和生物结皮共同覆盖下,植物和生物结皮对径流流速的削减效益分别为70.7%和12.4%。植物覆盖下生物结皮对流速的影响程度与其组成有关,多藻少藓结皮、多藓少藻结皮和藓结皮对流速的削减效益分别为11.5%、12.4%和19.4%。流速与藓盖度呈显著负相关,与藻盖度呈显著正相关,藓结皮盖度(x)与流速(y)的关系式为:y=-2.081x+0.03(R²=0.469)。当植物盖度一定时(40%±10%),生物结皮组成中藓盖度是影响共同覆盖坡面流速的关键因子。综上,草本植物覆盖下生物结皮有显著减缓流速的作用,且作用程度与其组成有关。表明在研究退耕草地坡面侵蚀动力机制时,生物结皮的作用应予以考虑。     

小剂量罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外麻醉对高龄产妇分娩镇痛效果评估

目的:评估小剂量罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外麻醉对高龄产妇分娩镇痛效果。方法:选取我院2019年1月-2020年12月共收治的80例高龄无痛分娩产妇作为研究对象,对照组产妇应用罗哌卡因进行硬膜外麻醉;观察组产妇应用小剂量罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外麻醉,对比两组镇痛效果、VAS评分、Bromage评分、自控镇痛追加次数、产程时间、24 h的新生儿窒息情况与24 h泌乳量评分情况。结果:观察组镇痛效果明显优于对照组(P<0.05);观察组产妇的VAS评分在三个产程时间内评分明较对照组低(P<0.05);观察组产妇第一产程和第二产程的Bromage评分略低于对照组,但对比差异不显著(P>0.05),第三产程观察组的Bromage评分明显较对照组低;观察组产妇的自控镇痛追加次数较对照组低(P<0.05);观察组的第一产程和第二产程时间明显低于对照组(P<0.05);观察组产妇产后24 h泌乳量评分优于对照组(P<0.05);观察组新生儿窒息比例略低于对照组,但是并无显著差异(P>0.05)。结论:对高龄产妇分娩应用小剂量罗哌卡因复合舒芬太尼硬膜外麻醉镇痛效果显著,镇痛追加药剂量少,产程时间短,安全有效,有利于产妇产后分泌母乳,值得临床应用推广。     

太湖短吻银鱼春季早期胚胎发育以及温度与其孵化关系的研究

一、目的和意义 太湖短吻银鱼Neosalanx tangkahkeii taihuensis Chen为太湖中的名贵鱼类之一,也是太湖中的优势种类之一。调源丰富,产量较高。渔产品除供应国内市场外,又为我国主要出口水产品之一。根据过去记载,渔产量不断提高,尤以今年上半年又获较大丰收(接近100万斤),就春季繁殖生长的个体,在银鱼汛期的种群分析中占有一半左右(另一半为秒季繁殖的个体)。由于这一鱼类古今中外久享盛名,目前已列入国家水产资源中的重点繁殖保护对象之一。关于它在春季生殖时期的发育和孵化规律方面,目前尚缺乏参考资料。为此,作