通平养心方对高糖诱导H9c2心肌细胞损伤的保护作用机制研究北大核心CSCD

观察通平养心方对高糖诱导的H9c2细胞损伤的保护作用机制。高糖造成细胞损伤模型;MTT法检测细胞存活率;激光扫描共聚焦显微镜成像法,检测线粒体特异性荧光染料四甲基罗丹明乙酯(tetramethyrhodamine ester,TMRE),观察细胞线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,△Ψm)的变化,证明通平养心方是否通过抑制线粒体通透性转移孔(mitochondrial permeability transition pore,m PTP)的开放而发挥心肌线粒体的保护作用;Western-blot检测p-JNK、p-GSK-3β。结果发现,通平养心方和JNK抑制剂均能阻断高糖造成的H9c2心肌细胞损伤;0.1μg/m L通平养心方预处理10 min,细胞存活率升高、TMRE荧光减弱程度降低,p-JNK表达下降,p-GSK-3β表达升高。表明通平养心方能够通过线粒体保护途径对抗高糖诱导的H9c2细胞损伤,机制可能是通过JNK通路促进其下游因子GSK-3β磷酸化,从而抑制m PTP的开放实现的。     

福氏痢疾杆菌组氨酸合成中双功能焦磷酸水解酶和磷酸核糖环化水解酶双功能蛋白的初步研究

福志贺氏菌属是一类革兰氏阴性杆菌,是引起人类细菌性痢疾的主要致病源。以福志贺氏痢疾杆菌2a型301株全基因组为模板、以pET22b-(+)为载体、克隆了一个关键基因：组氨酸合成途径中双功能焦磷酸水解酶和磷酸核糖环化水解酶蛋白（简称：sf2088）。以BL21（DE3）为表达菌株,优化表达条件,获得了可溶表达的蛋白。经过亲和层析和分子筛层析获得目标蛋白。采用分析超速离心和动态光散射实验,对纯化后的蛋白进行稳定聚集状态的条件搜索,结果发现锌离子对稳定其聚合状态很重要。通过正交实验,获得蛋白保持稳定聚集态的条件。这对该酶的进一步研究奠定了基础。     

硫酸软骨素对慢性酒精中毒大鼠脑损伤的保护作用

目的:探讨硫酸软骨素对慢性酒精中毒脑损伤的作用及可能机制.方法:雄性 Wistar 大鼠60只随机分为6组,酒精模型组以剂量为8ml·kg-1·d-150%的酒精每天灌胃一次,纳洛酮药物组给予乙醇半小时后腹腔注射纳洛酮0.08mg·k-1·d-1,硫酸软骨素低、中、高剂量干预组在酒精模型组的基础上分别给予硫酸软骨素50、100、150mg·kg-1·d-1,空白对照组给予等体积的蒸馏水,持续2周;第三周把50%的酒精的剂量递增为12mg·kg-1·d-1,持续灌胃6周.在第八周末实验结束后取血,分离血清,留取脑组织.HE染色观察各组大鼠神经细胞的变化.生化测定各组大鼠血清及脑组织匀浆中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性以及脂质过氧物终未产物丙二醛(MDA);并测定脑皮质中β-内啡肽含量(β-EP).结果:模型组大鼠大脑皮质和海马区神经元数量明显减少,神经细胞排列紊乱.硫酸软骨素中剂量组大鼠大脑皮质和海马区神经细胞排列层次较清晰.与酒精组相比较,硫酸软骨素中剂量组大鼠血清和脑组织匀浆中MDA含量明显降低(P<0.01),脑皮质中β-内啡肽含量明显降低(P<0.01);GSH-PX含量及SOD活性显著升高(P<0.01).结论:硫酸软骨素对大鼠慢性酒精中毒脑损伤具有保护作用.     

小麦珠心细胞衰退过程中ATP酶的超微细胞化学定位

采用磷酸铅沉淀技术对小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ ）珠心细胞衰退过程进行了ＡＴＰ酶的超微细胞化学定位。初始衰退的珠心细胞,ＡＴＰ酶只定位于细胞膜上,其它部位未见有ＡＴＰ酶活性。衰退中期的珠心细胞,细胞膜上ＡＴＰ酶活性减弱并逐渐消失;细胞核染色质和细胞质中一些细胞器上存在ＡＴＰ酶活性。在严重衰退的珠心细胞中,只在细胞核染色质上存在ＡＴＰ酶活性。珠心细胞的细胞核以两种方式衰退。衰退的细胞核染色质碎片仍存在ＡＴＰ酶活性,并向胚囊方向转移。推测小麦珠心细胞衰退过程中细胞膜上ＡＴＰ酶变化反映了珠心细胞生理状态转变;细胞核染色质上ＡＴＰ酶与其形态变化和运动等有关     

不断进化的生物传感器

在生物传感器市场中占据最大份额的血糖值传感器家族中，低侵袭性产品以及扩大了测定范围的新产品相继问世。企业通过开发能受到逐年增加的糖尿病患者欢迎的产品，来提高产品的市场份额。其中，日益重要的开发课题是低侵袭化技术。如果血糖能用间接的方法来测定，那么也可以应用于健康管理。本专题将以血糖值传感器的技术革新为模型，来展望生物传感器的未来前景。     

D-C培养基的改良

D-C培养基系Leifson氏首创,于1935年应用于肠道病原菌的分离培养,具有一定的选择性和鉴别作用。但由于Leifson氏的配方剂量存在一定缺陷,制备手续繁杂,在数十年     

蛇毒对肿瘤细胞的体外抑制实验

目的 探讨蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒对肿瘤细胞的抗癌活性,方法 应用蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒人源肿瘤细胞进行体外细胞毒试验。结果 蝮蛇毒及蝮蛇与眼镜蛇混合毒对传代细胞株（Ｎｏｖｉｋｏｆｆ及Ｈｅｐ－２）的抑制作用随蛇毒剂理的增加而增强,剂量为５μｇ／ｍｌ时,蝮蛇毒对传代细胞Ｎｏｖｉｋｏｆｆ及Ｈｅｐ－２的抑制率分别为５０．３％和４７．５％,蝮蛇与眼镜蛇混合毒对Ｎｏｖｋｏｆｆ及Ｈｅｐ－２的抑制率分别为     

氮负荷增强对闽江口短叶茳芏湿地植物-土壤系统氮累积与分配的影响

选择闽江河口短叶茳芏(Cyperus malaccensis)湿地为研究对象,基于野外氮负荷增强模拟实验,探讨了不同氮负荷水平下(NNT对照处理,0 g N m^-2 a^-1;LNT低氮处理,12.5 g N m^-2 a^-1;MNT中氮处理,25.0 g N m^-2 a^-1;HNT高氮处理,75.0 g N m^-2 a^-1)湿地植物-土壤系统的氮累积与分配特征。结果表明,不同氮负荷处理下湿地土壤(TN)、NH⁺₄-N和NO^-₃-N含量均发生了明显改变。相较于NNT,LNT和MNT的TN、NH⁺₄-N和NO^-₃-N含量均明显增加,增幅分别为9.44%、3.57%、11.99%(LNT)和6.71%、9.37%、46.50%(MNT)。与之不同,HNT的TN含量相比NNT增幅不大,而其NH⁺₄-N、NO^-₃-N含量均显著降低,降幅分别为9.26%和40.77%。不同氮负荷处理下土壤氮含量的垂直分布特征亦发生了明显变化。除HNT外,LNT和MNT的TN、NH⁺₄-N和NO^-₃-N含量均以表层土壤最高。不同氮负荷处理下的TN和NH⁺₄-N含量分布主要受SOM的影响,而NO^-₃-N含量分布主要受植物吸收和垂直淋失的影响。氮负荷增强条件下植物不同器官的TN含量整体表现为叶 ＞ 茎 ＞ 根。不同氮负荷处理下植物-土壤系统的氮储量整体以LNT和MNT较高,而HNT最低。研究发现,短叶茳芏在中低氮负荷条件下可能将更多的氮优先分配给根系,进而以拓展地下空间和提高地下生物量的方式来适应环境;而在高氮负荷条件下,其可能通过增强"自疏效应",并通过拓展地上空间的方式来适应环境。     

实验细胞资源同功酶分析鉴定

琼脂糖凝胶电泳检测细胞同功酶的方法,可用于实验细胞系种间鉴别和交叉污染检测。该方法所需样品少,时间短,费用低,并且具有较高的灵敏度。本文对HeLa细胞进行了LD、MD、G6PD同功酶检测灵敏度分析,结果表明:HeLa细胞LD和MD同功酶在细胞为5×107个/L时可有效检测出来,而G6PD分析时细胞为109个/L。20种实验细胞的LD、MD同功酶检测证明,每种细胞种属来源清楚,且均未被其它细胞污染。