胆碱氧化酶电极生物传感器研究

以固定化胆碱氧化酶(EC 1.1.3.17)与H₂O₂电极构成电流型酶电极生物传感器．其输出电流可达500nA。用于胆碱测定的线性范围：0～200mg／L,精度：RSD小于1．5％．响应时间：40s,使用寿命大于60d,实际测定氯化琥珀胆碱注射液中胆碱含量,回收率：1OO．3％～102．3％。     

不同放牧强度下高寒灌丛群落特征和演替规律的数量研究

本文应用多样性指数、聚类分析等数学方法,研究了不同放牧强度下高寒灌丛群落特征的变化,用主分量分析方法,研究了不同放牧强度下高寒灌丛的演替规律。多样性分析结果表明,植物多样性指数在放牧强度为C组的草场达到最大。聚类分析结果,当相关系数R≥0.90 时,以重要值为特征的植物聚合为10类,它们分别属于植物群落不同演替阶段的建群种、优势种和伴生种。主分量分析表明,5个不同放牧强度的高寒灌丛群落聚合为3类,A和B组草场属于以灌木和杂类草为优势植物的2层结构的植物群落,C组草场属于以灌木为建群植物、杂类草和耐牧的莎草为共优势植物的2层结构的植物群落,D和E组草场属于以灌木为建群植物、禾草和莎草为共优势植物的3层结构的植物群落。     

微小毛霉凝乳酶的纯化和性质

微小毛霉(Mucor pusillus)凝乳酶经乙醇分步沉淀、CM-纤维素、DEAE-Scphadex A-25和Scpha rose 2B柱层析提纯后,酶的比活由296提高到3429u／mg,蛋白质收率为17．9％。经聚丙烯酰胺凝胶电泳和免疫扩散法证明酶的纯度达到均一。酶的分子量为41800道尔顿。酶对血红蛋白的Km值为0·0lgmmol／Lo酶的等电点为pH4．3。对酶的氨基酸组成和含糖量也进行了测定。酶的化学修饰表明：酪氢酸、组氨酸、色氨酸、精氨酸以及巯基与酶的活性无关,天冬氨酸的羧基是酶的必需基团,故此酶是一种典型的天冬氮酸蛋白酶。     

光活化杀虫剂α-三噻吩的电子自旋共振分析及其对库蚊保护酶系统活性的影响

以淡色库蚊Culex pipiens pallens为试材,初步进行了典型光活化杀虫剂α-三噻吩（α-T）的电子自旋共振（ESR）分析,并研究其对昆虫保护酶系统的影响。ESR分析表明,近紫外光和药剂α-T均可促进活性氧自由基浓度升高,且两者具有协同关系,近紫外光能显著促进α-T增加自由基的作用,处理3 h时试虫自由基总浓度增加了99.6%。近紫外光和药剂α-T对保护酶系统的影响随酶的种类而有所不同,但在近紫外光存在的条件下,α-T对超氧物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）和过氧化氢酶（CAT）活体活性均有抑制作用,且光照3 h时,抑制作用最强。     

利用流式细胞术测定CTL活性方法在EIAV免疫学中的应用

利用PKH-26和CFSE两种荧光染料对靶细胞染色,建立了一种通过流式细胞术进行马传染性贫血症病毒 (Equine infectious anemia virus,EIAV)抗原特异性细胞毒性T淋巴细胞(Cytotoxic T lymphocytes,CTL)反应的 新方法,避免了经典的Cr51释放法对检测人员的放射线威胁,降低了本底释放,提高了检测的灵敏度。将该检测方 法用于检测EIAV疫苗毒接种马和嵌合克隆接种马的细胞免疫反应变化趋势,数据显示细胞免疫反应在接种后3 个月达到成熟阶段而后保持在较高的反应水平。该方法的成功建立和应用为研究EIAV减毒疫苗的免疫机制提 供了好的研究手段,也为其他病毒的免疫学研究提供了新的参考方法。     

高糖诱导腹膜间皮细胞发生上皮间质转化中microRNA的异常变化

目的:定腹膜间皮细胞在高糖引起上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)过程中microRNA的表达差异。方法:常规培养PMC细胞,利用高糖培养液刺激诱导腹膜间皮细胞发生EMT,倒置显微镜观察各组细胞形态学变化,实时定量PCR检测EMT标志基因变化,以此确定高糖诱导EMT的发生。利用特异茎环结构的引物合成microRNA的cDNA,实时定量PCR检测重要microRNA的表达变化。结果:高糖培养液培养腹膜间皮细胞48hr后,细胞形态呈梭形改变,同时EMT标记基因E-cadherin表达明显减低(P0.01),Vimentin表达显著升高(P0.01),说明高糖诱导腹膜间皮细胞发生了EMT。利用microRNA特异的茎环结构引物,实时定量PCR检测结果发现高糖刺激后miR-193a的表达明显上调(P0.01);miR-15a和let-7e的表达明显降低(P0.01);miR-16和miR-21的表达无明显变化(P0.05),同时检测发现高糖刺激后miR-193a的表达水平随刺激时间表达升高。结论:异常变化的microRNA可能对高糖诱导的腹膜间皮细胞EMT具有重要调控作用。     

一种新的尿道感染病原菌

尿道炎气球菌（Ａｅｒｏｃｏｃｕｓｕｒｉｎａｅ）是１９９２年确认的新种，也是一种新的引起尿道炎的病原菌，本文综述了该菌有关的生物学和遗传学特征，以及分离和鉴定中的特点     

G 蛋白偶联受体寡聚体结构研究进展

G蛋白偶联受体(GPCR)是细胞膜上最大的一类受体,其通过构象变化激活下游G蛋白从而介导细胞响应多种来自内源和外界环境中的信号。自GPCR被发现以来,研究者就一直在努力解析GPCR的构象,x射线晶体衍射技术和GPCR蛋白质结晶技术的发展使得越来越多的GPCR单体在静息状态,以及与不同配体甚至G蛋白结合的晶体结构被成功解析。另一方面,FRET和电子显微技术的运用得到了GPCR二聚化和多聚化的多方面证据。本文将结合近年来该领域的进展,对GPCR寡聚体的结构和构象变化予以系统的综述,这些成果为研究GPCR的功能机制及其特异性的靶点药物开发提供了重要的基础。     

葎草雄性连锁的RAPD标记的克隆与SCAR标记的建立

应用随机扩增的DNA多态性（RAPD）技术可以快速简便获得雌雄异株植物雌雄株间的基因组差异信息,本文采用该技术对律草雌雄混合基因池进行了扩增,在选用的100条10bD的随机引物中,引物S1519和S2142分别扩增出长度为1207bp和762bp的雄性连锁标记,对其进行回收克隆和测序后发现这两个片段富含AT序列,AT含量分别为64％、54．7％,经核苷酸数据库BLAST检索未发现其同源序列。根据测序结果设计的SCAR引物可以将这两个雄性连锁的RAPD标记转化为稳定性和特异性更好的SCAR标记。     

呼肠病毒感染诱导的细胞凋亡和抗肿瘤作用

呼肠病毒感染可以引起多种细胞凋亡,这种调亡是造成某些动物特定组织损伤的关键机制。呼肠病毒还可以借助活化的Ras通路选择性地杀死癌细胞,因此它在肿瘤临床治疗上具有一定意义。