简化cDNA末端快速扩增技术测定基因III、VIb和VIId型新城疫病毒基因组末端序列及分析

摘要: 【目的】简化cDNA末端快速扩增技术（Rapid amplification of cDNA ends, RACE）流程,测定基因III、VIb和VIId型新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）基因组两侧末端序列,并对NDV的leader和trailer进行分析。【方法】利用T4 RNA连接酶将特定寡聚核苷酸片段的连接于病毒基因组RNA和cDNA,再利用RT-PCR或PCR方法对病毒基因组的末端进行快速的扩增。【结果】建立一套操作简单、低成本、可重复性高的RACE方法,测定了三种基因型5株NDV 3’末端leader和5’末端trailer序列比对分析。【结论】本实验测定的鹅源VII型毒株JS/7/05/Ch基因组的15,184 nt由一个T变为了C,5’端trailer与3’端leader的连续互补序列由8 nt变为12 nt,而其它4株基因III型和VI型NDV均未发现该突变。通过RNA的二级结构分析,NDV基因组和反向基因组RNA的3’末端形成一个发卡结构。JS/7/05/Ch等3株NDV U→C（T→C）的突变位于发卡环上,不影响二级结构的形成,发卡环的RNA序列突变为3’-UCUC-5’,与基因组3’端发卡环的3’-UCUUA-5’相似,推测可能影响了基因组RNA的复制速度。     

三甲基月桂基硫酸钠（TLS）在蓝细菌核酸提取中的作用

本文首次把三甲基月桂基硫酸钠(TLS)应用于蓝细菌(蓝藻)总核酸的提取。在用溶菌酶破坏满江红鱼腥藻的细胞壁后,再用TLS分别取代常用法中的各种试剂,即:Triton X-100 Sarkosyl,蛋白酶K,总核酸产率分别是常用法的98.9％,47.3％,103.8％。用TLS取代蛋白酶K处理不同生长期的满江红鱼腥藻,总核酸产率随生长期延长而降低。TLS取代蛋白酶K提取的DNA和常用法提取的DNA,都能被限制性内切酶EcoR I水解。用光学显微镜观察到,满江红鱼腥藻经TLS处理后,丝状体断裂,细胞破裂成碎片。在扫描电子显徽镜下,未经TLS处理的细胞表面光滑平整,而经TLS处理的细胞表面有鳞片状突起、皱褶、凹陷,甚至穿孔。     

普通小球藻生长与武汉东湖水体磷形态的相关研究

本文探讨了武汉东湖水体中总溶解磷（TSP）、溶解反应磷（SRP）、总反应磷（TRP）、溶解水解磷（SHP）和颗粒磷（PP）对普通小球藻生长的生物有效利用性。进行了普通小球藻生长量与各磷形态及总磷（TP）被利用浓度的一元相关分析,进一步讨论了这些一元相关方程的不足,并用多元回归分析建立了普通小球藻生长量（N）与所测几种磷形态被利用浓度（CTSP,CSRP,CTRP,CSHP,CPP）的相关模型。这些模型可以用于评价湖泊水体富营养化的程度及预测藻的生长潜力。     

一株产共轭亚油酸瘤胃细菌Streptococcus infantarius RB111的筛选与鉴定

从内蒙古鄂尔多斯山羊瘤胃中分离筛选到1株产共轭亚油酸的瘤胃细菌RB111,该菌株的cis9,trans11-CLA和trans10,cis12-CLA总产量为269.2 mg/L,其中cis9,trans11-CLA占52.64%,trans10,cis12-CLA占47.36%。对菌株RB111进行了形态学观察、生理生化鉴定、脂肪酸组成分析以及16S rRNA基因序列分析。16S rRNA基因序列分析结果表明该菌株与婴儿链球菌(Streptococcus infantarius)的模式菌株NCDO 599的序列相似性为99%,该菌株的形态特征及生理生化特性与文献报道的Streptococcus infantarius一致。脂肪酸组成分析结果显示,菌株RB111的细胞脂肪酸主要成分是C16:0、C18:1ω9c和C18:0,3种脂肪酸占脂肪酸总量的60.64%。综合以上结果,菌株RB111被鉴定为婴儿链球菌Streptococcus infantarius。     

栝楼属花粉形态研究及其在分类学上的意义

本文收集了国内外栝楼属Trichosanthes 31种1变种,在光学显微镜和扫描电镜下,进行了花粉粒形态的比较观察。该属花粉粒为3孔沟型,外壁表面纹饰可分为四个类型,即：疣状或皱波状(小苞组),粗网状(大苞组),细网状或光滑(叶苞组),近光滑或皱波状(王瓜组)。这四个类型的划分与植物形态分类基本一致,可作为分组及分种的依据之一。花粉特征支持将叶苞组分为叶苞亚组和柔毛亚组,如叶苞亚组有明显的沟,而柔毛亚组没有。     

正常人体表心电图形态的逐拍变化

心电图的各种波形是众多心肌细胞动作电位在体表的综合效应。建立了对体表心电图的形态进行逐拍分析的硬件及软件系统。对５８例健康人体表心电图进行了采集和分析,得到了正常人体表心电图中Ｐ波,ＱＲＳ波,及Ｔ波的形态差异图,并进行了频谱及时域瞬态分析,从而展示了心肌电活动在体表心电图中的逐拍变化现象,体表心电图逐拍形态变化反映了心房肌和心室肌电活动的时变特征。     

猪胃的动脉分布

为了积累猪的解剖学资料以及为人胃的动脉分布提供比较解剖学依据,选用猪的离体内脏,将血管注射乳胶研究胃的动脉分布。结果表明,胃左动脉分为四种类型,来自脾动脉基部的Ａ型最多（５０．００％）;憩室动脉分为三种类型,来自脾动脉的Ａ型也最多（８４．３８％）;胃十二指肠动脉有六种类型,在第一肝固有动脉之后分出的Ａ型最多（４０．６３％）;胃右动脉有七种类型,在第二肝固有动脉之后分出的Ａ型最多（４３．７５％）;胃     

综合开发山区野菜资源

综合开发山区野菜资源杨世诚（山东省潍坊教育学院生物系２６２５００）曾召成（山东省临朐县第一中学生物组）野菜是自然资源之一，然而，随着人们生活水平的不断提高，却逐渐被淡忘了。多少年来，它们自生自灭，没有得到充分的开发和利用。实际上，充分认识野菜的应用价...     

重组人乳铁蛋白对食管癌细胞体外增殖的影响

目的:研究重组人乳铁蛋白(rhLF)对体外培养的食管癌细胞的生长特性的影响.方法:MTT法评定rhLF对人食管癌细胞Eca-109、人肝脏细胞L0-2、CHO中国昌鼠细胞系的生长抑制作用.结果:重组人乳铁蛋白对人食管癌细胞系Eca-109的增殖有抑制作用并呈现剂量依赖性,对正常细胞无抑制作用.结论:重组人乳铁蛋白作为新的抗肿瘤化学治疗荆,可以抑制食管癌细胞Eca-109的增殖.     

不同肥料对土壤动物的影响

对施用有机肥、化肥和普通耕作土3种类型的土壤动物进行实地调查。定性、定量分析土壤动物群落结构、多样性及其水平分布、垂直分布和月份分布。研究表明:大量施用单种氮肥会明显抑制或杀死土壤动物,造成土壤的理化特性下降;而施用有机肥能培养土壤动物,并通过这些动物改善土壤的结构和理化性质,使农作物增产。