TAIL-PCR的改良及其在分离小麦基因启动子中的应用

在经典TAIL-PCR(Thermal asymmetric interlaced PCR)的基础上, 对其进行了如下四处改进: 用10个碱基的RAPD引物代替16个碱基的随机兼并引物作为PCR中的随机引物; 将较低特异性循环的复性温度由44°C降至29°C; 增加5个高特异性反应循环, 减少5个较低特异性反应循环; 用单引物对第三轮PCR产物进行初步鉴定。利用改进的TAIL-PCR方法分离了小麦X基因的5′未知的侧翼序列, 与GUS基因融合后转入拟南芥, 通过组织化学检测分析表明分离到的5′侧翼序列具有启动子功能, 同时说明改进的TAIL-PCR能更好地应用到较复杂基因启动子的分离。     

新型乙酰胆碱酯酶抑制剂Bis(9)-(-)-Meptazinol的小鼠 和大鼠药代动力学研究

目的:研究新型乙酰胆碱酯酶(acetylcholinesterase,AChE)抑制剂Bis(9)-(-)-Meptazinol(B9M)在小鼠和大鼠体内的药代动力学、组织分布和排泄过程。方法:应用本课题组前期报道的大鼠血浆中B9M的LC-MS/MS定量方法:检测B9M皮下和静脉给药后小鼠血浆和脑组织中的含量,计算相应的药代动力学参数,测定B9M小鼠(1.5 mg/kg)和大鼠(1.0 mg/kg)皮下给药后不同时间点的组织分布和粪便、尿液中排泄量。结果:小鼠经皮下注射后,B9M可迅速进入血液(Tmax=0.25 h)血液中消除速度较慢(T_(1/2)=18.09h)绝对生物利用度为115.95%。皮下注射后,B9M在脑内的达峰时间和半衰期分别是8h和18.75h,生物利用度为44.67%。小鼠和大鼠皮下给药后广泛分布于各组织,以脾、肺、肾等血流量大的组织中分布最多。B9M从体内排泄迅速原型药物在小鼠和大鼠尿液和粪便中的排泄量低于3%。结论:皮下给药B9M在小鼠和大鼠体内具有易吸收、分布广泛、易排泄的特点药代动力学特征优良,是极具研发潜力的抗阿尔茨海默病(Alzheimer's disease,AD)新药。     

人工驯养鼋繁殖习性研究

鼋(Pelochelys cantorii, 1864)属于中国国家一级重点保护野生动物, 生物学资料相对匮乏, 2015和2016年连续2年对人工驯养的4只亲鼋(2雌2雄)进行了繁殖生物学研究。人工驯养鼋的产卵期集中在5—8月, 夜间产卵, 无护卵行为。通过视频观察分析, 鼋产卵过程可分为Ⅳ个阶段。2只雌鼋2015年共产卵10窝, 每窝32—50枚, 共406枚, 受精273枚, 受精率为67.24%, 孵出稚鼋140只, 孵化率为51.28%; 2016年共产卵11窝, 每窝40—55枚, 共489枚, 受精353枚, 受精率为72.19%, 孵出稚鼋212只, 孵化率为60.06%。鼋卵圆形, 刚性, 均重(16.82±1.99) g, 卵直径(3.10±0.18) cm, 刚孵出稚鼋均重(13.60±0.85) g, 在人工控温下平均孵化期为(64.94±3.47)d。繁殖数据表明这2对鼋处于生育盛年期。针对2016年的繁殖数据分析, 2只雌鼋每窝产卵量无明显差异, 卵均重和卵直径间有显著相关性, 雌鼋1个体体重大于雌鼋2, 前者产的卵均重显著大于后者, 孵出稚鼋的初重差异也显著, 卵大, 稚鼋也大。孵出的稚鼋以活鱼苗为饵料, 在温室内人工养殖周年, 均重可以达(510.30±82.77) g。研究旨在为鼋繁育生物学提供基础性数据, 为其资源保护做贡献。     

肠道微生物菌群对脑及行为的影响

肠道微生物菌群组成的变化对正常生理的影响及其在疾病中的作用逐渐成为研究热点。肠道微生物菌群通过脑肠轴影响宿主生理学的各个方面,包括脑-肠交流、脑功能甚至行为。对无菌动物、被致病细菌感染的、使用益生菌或用抗生素药物的动物研究表明,肠道微生物菌群可以调节宿主焦虑样症状及行为。研究表明对肠道微生物菌群的调节可能是治疗复杂中枢神经系统失调症的新策略。     

重组人乳铁蛋白对食管癌细胞体外增殖的影响

目的:研究重组人乳铁蛋白(rhLF)对体外培养的食管癌细胞的生长特性的影响.方法:MTT法评定rhLF对人食管癌细胞Eca-109、人肝脏细胞L0-2、CHO中国昌鼠细胞系的生长抑制作用.结果:重组人乳铁蛋白对人食管癌细胞系Eca-109的增殖有抑制作用并呈现剂量依赖性,对正常细胞无抑制作用.结论:重组人乳铁蛋白作为新的抗肿瘤化学治疗荆,可以抑制食管癌细胞Eca-109的增殖.     

草履蚧种群地下空间分布

通过对草履蚧Drosichacorpulenta(Kuwana)种群地下空间分布调查的研究结果表明,草履蚧在树冠下土壤中的分布规律、分布量与距树干的距离远近有关,集中分布于树干根基部地面以下0～5cm的土层中。用多种聚集度指标分析了草履蚧种群的地下空间分布型,结果表明各组的L,mx的值均大于1;CA,I值均大于0,扩散系数C值大于置信区间上限,(C大于1)表明草履蚧在土壤中呈聚集分布。     

alpha- 硫辛酸联合胰岛素强化治疗对初诊2 型糖尿病患者胰岛细胞功能的影响

目的：比较应用alpha- 硫辛酸抗氧化应激治疗联合胰岛素强化降糖对初诊2 型糖尿病患者胰岛beta细胞功能的影响。方法：将 104 例初诊2 型糖尿病患者随机分为联合组、单药组两组,分别给予alpha- 硫辛酸联合胰岛素强化治疗及单独胰岛素强化治疗12 周,比较两组患者治疗前后口服葡萄糖耐量试验（OGTT）、C 肽释放试验各时间点血浆葡萄糖、C 肽及胰岛功能相关指标的变化。 结果：联合组OGTT 试验1 小时血糖（1 h PG）、2 小时血糖（2 h PG）、3 小时血糖（3 h PG）较单药组明显下降,空腹C 肽（FCP）、0.5 小时C 肽（0.5 h CP）、2 小时C 肽（2 h CP）水平较单药组明显升高,胰岛茁细胞功能指数[HOMA-beta（CP）]、糖负荷0.5 h时净增C 肽与净增血糖比值（△CP30/△Glu30）、C 肽曲线下面积(AUCC)与血糖曲线下面积(AUCG)比值（AUCG/AUCC）较单药组明显升 高,差异均有统计学意义（P＜0.05）。结论：alpha- 硫辛酸联合胰岛素强化治疗较单独胰岛素强化治疗能够更好的恢复胰岛茁细胞功能。     

中国“丝绸之路”地区血红蛋白病的遗传流行病学特点

对“丝绸之路“沿线陕、甘、新等省区的22万余人进行了血红蛋白病调查,应用蛋白质一级结构分析技术,从271例异常血红蛋白先证者中,发现变异体24种,以HbD Punjab、HbG TaiPei、HbG Coushatta 频率较高,呈梯度分布,其中HbJ Tashikuergan和Hb Tianshui 为世界新种异常血红蛋白。采用基因鉴定技术,于85例β地中海贫血携带者中,确定基因突变类型12种,以CD17（A→T）频率最高,其中[-28(A→G）.CD17(A→T）/N]双重突变杂合子,为同一染色体上的双重基因突变。极为罕见,CD8（－AA）、CDs8/9( G）为中国人中首次发现。根据“丝绸之路”地区异常血红蛋白和地中海贫血的类型特点、地理及民族分布规律,本文认为①我国西北部民族主要由中亚高加索人,黄河流域汉族人和蒙古高原的古代游牧民族组成。②β地贫CD17突变基因可能起源于甘肃的陇原大地,随华人迁徙传入东南亚各地。③该地遗传背景复杂,突变基因具有高度的异质性,存在显著的遗传流行病学特点。