国家种质库部分作物种子生活力监测结果与分析

对国家种质库中23种作物1．8万多份种子进行了生活力监测,结果表明,贮存10～12年后,96％以上的被监测种子发芽率仍保持在85％以上,但有95份种子(占被监测份数的0．51％)出现了明显的下降(发芽率从80％以上降至70％以下)。胡萝卜、莴苣、棉花、胡麻、蓖麻等5种作物种子整体监测发芽率平均值都出现了显下降,而胡萝卜、莴苣这二种作物的监测发芽率下降更为显。不同起始发芽率水平及贮存前所处环境条件对贮存种子的生活力下降有一定影响。     

还原酶缺陷型大肠杆菌对重组蛋白溶解性的影响

探讨大肠杆菌细胞质氧化还原环境对重组蛋白溶解性的影响。选择含有1对二硫键的牛碱性成纤维细胞生长因子（BbFGF）作为简单蛋白的模式分子,选择含有2对二硫键的人抗HBsAg单链抗体（HBscFv）作为复杂蛋白的模式分子,分别构建表达质粒并转化普通宿主菌和还原酶缺陷型宿主菌E. coli Origami(DE3),比较表达产物的溶解性和纯化产物的活性。结果发现,BbFGF在普通宿主菌中大部分形成包涵体,在Origami(DE3)中为可溶性表达,但表达量降低。两种工程菌的表达产物经离子交换和肝素亲和层析两步纯化后,MTT法测定活性,发现来自还原酶缺陷型宿主菌的BbFGF活性高于普通宿主菌表达产物,二者的ED₅₀分别是1.6 ng/mL和2.2 ng/mL;HBscFv在两种宿主菌中均形成包涵体,包涵体以6 mol/L盐酸胍缓冲液溶解后,镍离子螯合亲和层析纯化并透析复性,间接ELISA测定抗原结合活性,发现二者活性无明显差异,但在Origami(DE3)菌体破碎后的的上清中可检测到HBscFv活性,纯化后产量为1～2 mg/L,而在普通宿主菌破碎后的上清中检测不到HBscFv活性。上述结果说明,改变宿主菌细胞质氧化还原环境对于含有1～2对二硫键的重组蛋白的可溶性表达具有明显促进作用。     

未减数配子和多倍体植物演化

由植物体内外因素引起的细胞减数分裂是未减数配子形成的主要原因,而未减数配子的发生则引起自然界多倍体植物的不断演化形成丰富多彩的植物世界。     

Rubisco活化机制

Ｒｕｂｉｓｃｏ活化机制廖祥儒,朱新产（西北农业大学,陕西杨陵７１２１００）关键词Ｒｕｂｉｓｃｏ,ＣＯ_２,活化酶,ＣＡＩＰ１,５－二磷酸核酮糖羧化酶／氧合酶（Ｒｕｂｉｓｃｏ）是目前仅知的５种具有双功能催化活性的酶之一。它既能催化１,５－二磷酸核酮糖（?..     

活性氧代谢和植物抗盐性

活性氧代谢和植物抗盐性廖祥儒,朱新产（西北农业大学园艺系,陕西杨陵７１２１００）关键词抗盐性,活性氧活性氧代谢失调是逆境下需氧生物受害的普遍表现,也是逆境损伤的重要原因。早在８０年代以前,就发现盐渍影响植物的光合、呼吸和蒸腾等生理过程及蛋白、核酸和脂...     

PCR技术战略

ＰＣＲ技术战略朱新产张涌廖祥儒（西北农业大学分子生物学研究室陕西杨陵７１２１００）ＰＣＲ技术已成为分子生物学研究领域极为重要的工具,在几小时内沙克级的ＤＮＡ,甚至单拷贝基因能在体外扩增放大。其过程的广泛性预示着ＰＣＲ技术不仅能分离ＤＮＡ片段,也能修饰...     

深海太平洋火色杆菌琼胶降解基因分析和琼胶酶Aga0950的表达及酶学性质

【目的】对深海太平洋火色杆菌(Flammeovirga pacifica WPAGA1)全基因组进行生物信息学分析,筛选获得琼胶酶基因aga0950,采用基因工程手段对该基因的功能和性质进行验证和分析。【方法】采用Illumina HiSeq2500测序技术进行基因组测序分析;采用克隆表达和镍柱纯化方法获得纯aga0950基因表达产物;采用薄层层析(TLC)和离子色谱(IC)法分析酶降解琼胶产物;采用二硝基水杨酸法(DNS)测定琼胶酶活性。【结果】基因组序列分析表明,菌株WPAGA1全基因组拥有13个β-琼胶酶相关基因;氨基酸序列比对显示,同源性为60%–85%,其中aga0950是具有GH16家族典型特征的基因,同源性为67%。纯化的重组酶Aga0950比活力达51770 U/mg,具有高效降解琼胶活性,降解终产物为新琼四糖和新琼六糖;最适温度为50°C,最适pH为4.0–10.0;Co~(2+)、Mn~(2+)和Fe3+促进酶活,Cu~(2+)抑制酶活。【结论】深海菌株WPAGA1具有丰富的琼胶酶基因;属于GH16家族的琼胶酶基因aga0950表达产物具有高效降解胶琼活性和良好的热、酸、碱稳定性。     

早期胚胎发育母源基因的表达调控

精卵细胞是自身细胞系谱发生的产物 ,具有与双亲生物环境相互作用发育的先天性遗传。受精是新个体发育的起始点 ,是基因表达在胚胎发育过程中的选择性和时间上的规律顺序[1,2 ] 。基因组内各个基因表达的选择性和程度 ,无论是由单基因的突变引起或是多基因的复杂影响引起 ,都随时间、位置和环境条件的不同而发生改变[3 ] 。基因表达的变化是控制个体发生的细调节中心 ,决定着所有的生命过程。1 .早期胚胎发育的物质基础伴随卵母细胞生长的是核糖体和信使ＲＮＡｓ转录活化 ,Ｐｏｌｙ(Ａ)ｍＲＮＡ的合成约占总ＲＮＡ的 2 0 % ,小鼠大约在排卵…     

丛枝菌根真菌物种多样性研究进展

丛枝菌根(arbuscular mycorrhiza, AM)真菌是生态系统中生物多样性的重要组分之一,具有十分丰富的物种多样性、遗传多样性和功能多样性.该真菌分类地位不断提高已上升至门,下设1个纲、4个目、13个科,19个属,现已报道214种.丛枝菌根对保持生态平衡、稳定和提高生态系统可持续生产力具有重要作用.本文分析了世界范围内丛枝菌根真菌物种多样性研究现状、不同生态系统中影响丛枝菌根真菌物种多样性的关键因子及其调控途径;认为分子生物学技术是今后丛枝菌根真菌物种多样性研究的主要方法.     

苦瓜籽蛋白的PEG/（NH4）2SO4双水相分离及抑菌作用的研究

优化试验条件影响因素,建立PEG/(NH4)2SO4双水相系统,确定出分离苦瓜籽蛋白的最适PEG6000和(NH4)2SO4质量分数分别是22%、25%,分配系数为0.089,回收率为96%。双水相分离的苦瓜籽蛋白经SDS-PAGE凝胶电泳显示,主要蛋白质是50 KD4、3 KD和10 KD亚基结合形成的多聚体12S(327 KD)球蛋白,还原条件下出现诸多小于35 kD的蛋白组分,表明蛋白质亚基是通过二硫键结合。抑菌试验显示苦瓜籽蛋白对受试细菌菌和真菌产生明显的抑菌活性,其MIC远低于苯甲酸钠,而且在不同盐离子浓度、温度、pH及紫外线等因素处理时,均具有一定的稳定性。此外试验还表明苦瓜籽蛋白也具有较强的清除羟自由基能力和总抗氧化能力。